葛分子标记与表型性状关联分析

发布时间：2020-05-17 19:36

【摘要】：葛(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)是用途广泛、具有经济价值的豆科葛属植物,随着近些年来市场需求增加,优良品种的选育是目前的首要任务。本试验运用ISSR分子标记结合分析葛单株的表型性状分析个体间的的差异,筛选品质好、高产量的优良植株,为提高葛根产量及相关农艺性状的分子标记辅助选择育种等的研究提供一定的参考。本试验分别从表型性状及ISSR分子标记两种方法对137份葛植物材料进行分析研究,为葛属植物的种质资源和新品种培育提供理论依据。研究结果如下:本试验选取25个表型性状对137份葛单株进行田间调查及测定,研究结果表明,就16个形态学性状差异明显,变异系数的变异范围在17.55%-174.04%之间,平均变异系数为71.31%。根冠比、地上部分鲜重、单根重等是137份葛单株形态学性状主要的变异来源。5个生理指标中,蒸腾速率及相对叶绿素含量变异较为明显,变化系数分别为59.41%和49.53%,平均变异系数为36.00%。葛单株的6个营养成分指标的变异均值为19.97%,变化范围为9.42%-32.93%,其中P含量和Ca含量变异程度较大,变异系数分别为32.93%和28.16%。利用22条引物对137份葛单株进行ISSR-PCR扩增,采用琼脂糖凝胶电泳对扩增的产物进行检测,22条引物共扩增出62条条带,其中多态性条带共58条,多态性百分率为92.05%,平均每条引物扩增出2.64条。其中引物UBC826扩增出条带最多,扩增条带5条,多态性条带5条,多态性100%;引物UBC829与UBC853两条引物扩增出的条带最少,都为1条,均有1条多态性条带,多态性为100%。通过对22条引物进行PCR扩增,根据扩增的产物利用SPSS17.0软件将137份葛单株不同时期的表型性状进行方差及多重检验或T检验分析。结果表明137份葛单株的在不同生长期的性状存在显著差异或极显著差异,存在差异的主要性状有根冠比、地上部分鲜重、茎粗、节间长等。依据扩增结果分析性状有差异的引物有USB810、USB827、USB829、USB836、USB840、USB846和USB851。茎粗(SD)、叶宽(LW)、分枝数(SN)以及地上部分鲜重(GFW)可以作为优良植株的选择依据。引物USB829与为茎径(SD)性状相关联,USB840与节间长(IL)和净光合速率(Pn)这两个性状相关联,引物USB846与叶宽(LW)、相对叶绿素含量(SPAD)、根径(RD)、粗灰分(Ash)及磷含量(P)性状相关联。
【图文】：

葛分子标记与表型性状关联分析2.95 ，证明提取的 DNA 样品中蛋白质等杂质含量较少，符合分子试验对 DNA浓度和纯度的要求，可用作接下来的分子试验。表 3-1 葛单株 DNA 提取检测结果Table 3-1 Results of DNA Extraction and Detection of Kudzu260/280 260/230 DNA 含量1.87 2.95 92.3ng/uL3.4.2 引物的筛选合成的引物经过 PCR 扩增反应，，通过琼脂糖凝胶电泳对 100 条 ISSR 引物进行检测，将反应具有条带的引物进行记录。并从中挑选出多态性好的进行ISSR-PCR 反应试验。引物筛选的结果如表 3-2 所示。

图 3-2 引物 USB829 扩增结果Fig.3-2 Primer USB829 amplification results图 3-3 引物 USB829 扩增结果Fig.3-3 Primer USB829 amplification results
【学位授予单位】：江西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S567.19

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本文编号：2669071