白及内生真菌诱导子对宿主生长和主要活性物质的影响及调控

发布时间：2020-10-18 08:38

　　 白及通常以其假鳞茎为主要入药部位。本研究通过内生真菌诱导子与白及组培苗共生处理,以提升白及目标物质产量和人工种植植株中的有效成分含量。研究通过测定内生真菌诱导子与白及苗共生后的植株生长性状、总酚含量、总多糖含量,筛选出一株最能促生及提高活性物质的菌株。分别将该菌株的菌丝体、发酵液、菌丝体中分离出的蛋白质和多糖提取液与白及苗进行共生培养,进一步探究白及体内信号分子和次生代谢关键酶的调控,以及总酚含量的相关性。主要结果如下:(1)通过内生真菌诱导子与白及组培苗共生,得到菌株1-N2诱导子处理后的白及苗单株鲜重增长量为其中最大值2.45 g,鳞茎的总酚含量为4.59 mg/g,鳞茎的总多糖含量为12.42%,因此筛选出内生真菌1-N2诱导子可有效促进白及新芽和根系生长。(2)内生真菌1-N2的菌丝体和发酵液分别与白及组培苗共生后,在2组处理的信号分子含量变化的过程中,除水杨酸外,H2O2和NO的含量出现最大值时间一致。发酵液处理的样品中,3种次生代谢关键酶苯丙氨酸解氨酶、酪氨酸羧化酶、肉桂酸-4-羟化酶活性的最大表达时间分别为第20天、第12天、第4天;菌丝体处理样品中的3种关键酶活性均在第16天发生明显表达,可能为平行关系。菌丝体作用后的白及苗总酚含量高于发酵液处理的,菌丝体处理的样品在第16天时总酚含量最高,为4.55 mg/g,与关键酶活性的表达产生对应关系,则说明第16天为诱导菌丝体处理组的白及总酚含量的最佳时期。3种次生代谢关键酶在与菌丝体处理的白及组培苗总酚含量变化方面也有明显相关性。(3)内生真菌1-N2菌丝体中分离出的蛋白质和多糖提取液分别与白及苗共生培养后,2组处理的信号分子含量出现最大值的先后顺序完全一致,均为先H2O2、再NO、后SA。加入蛋白质处理的样品中,3种次生代谢关键酶苯丙氨酸解氨酶、酪氨酸羧化酶、肉桂酸-4-羟化酶活性的最大表达时间分别为第20天、第12天、第8天;多糖提取液处理的样品中3种关键酶苯丙氨酸解氨酶、酪氨酸羧化酶、肉桂酸-4-羟化酶活性的最大表达时间分别为第16天、第16天、第8天。多糖提取液处理的样品在第16天时总酚含量最高为4.26 mg/g,并高于蛋白质处理组,说明诱导多糖提取液处理组的白及总酚的最佳时间为第16天。
【学位单位】：广西大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S567.239
【部分图文】：

３．７０±０．１０ｍｇ／ｇ、４．２７±０．１１ｍｇ／ｇ、４．４１±０．１６ｍｇ、４．１６±０．１３ｍｇ?和?４．５９±０．１２ｍｇ／ｇ，??对照的白及组培苗总酚含量为３．６６±０．１５ｍｇ／ｇ。本试验的１０种真菌诱导子处理的白及??组培苗的总酚含量，均大于空白对照组。经单因素方差分析得知，如图３－３，?８种处理??的样品总酚含量与ＣＫ差异极显著（Ｐ＜０．０１），其中组间１－Ｎ２和３－Ｇ７之间差异不显著，??１－Ｎ２比３－Ｇ６处理的样品总酚含量多０．３２ｍｇ／ｇ；处理１－Ｎ２与１－Ｂ１、１－Ｇ３、１－Ｇ４、１－Ｇ５、??３－Ｇ６、２－Ｇ１?之间差异显著（Ｐ＜０．０５），处理?１－Ｎ２?与?１－Ｂ１、１－Ｇ４、１－Ｇ５、３－Ｇ６、２－Ｇ１?之??间差异极显著（Ｐ＜０．０１）；?１－Ｇ５与１－Ｇ４之间差异显著，与１－Ｇ３之间差异极显著；１－Ｂ１??与１－Ｇ３、１－Ｇ４、３－Ｇ６、３－Ｇ７均差异显著，１－Ｂ１与ＣＫ差异极显著，但总酚含量仅为ＣＫ??的１．１倍，相对于其他与ＣＫ差异极显著的处理，样品含量较低；处理１－Ｂ４、３－Ｇ２与??ＣＫ在０．０５水平上组间差异不显著
【参考文献】

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本文编号：2846072