吉林省四种马铃薯再生体系和‘春薯3号’遗传转化条件的初探

发布时间：2020-11-17 02:35

　　 本研究以吉林省主栽品种‘大西洋’、‘春薯3号’、‘春薯5号’、‘吉薯1号’马铃薯脱毒试管苗为试验材料,主要开展以下两方面研究工作。一是分别对四种马铃薯茎段再生体系进行研究,并从植物激素选择和使用浓度入手优化马铃薯再生条件,以期建立马铃薯高效再生体系;二是利用获得的再生体系将gus基因转入‘春薯3号’马铃薯中,获得‘春薯3号’马铃薯转基因植株。试验最终建立了四种马铃薯的高效再生体系,并对‘春薯3号’外源基因遗传转化影响因素中的菌液浓度、侵染时间、共培养时间进行了优化。主要研究结果如下:1)确定了‘大西洋’适合愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;适合愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L KT+2.0 mg/L ZT,分化率达95%。2)确定了‘春薯3号’愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L KT+2.0 mg/L ZT,分化率达79.4%。3)确定了‘春薯5号’愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+3.0mg/L ZT+0.5 mg/L GA_3,分化率达68.75%。4)确定了‘吉薯1号’愈伤组织诱导培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L KT,诱导率达100%;愈伤组织分化培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+3.0mg/L ZT+0.5 mg/L GA_3,分化率达85.7%。5)通过对农杆菌菌液浓度的分析、侵染时间的筛选、共培养时间的比较,确定了适合春薯3号的侵染条件:OD_(600)≈0.5,侵染时间为10min,共培养时间为3d。6)试验成功获得了‘春薯3号’抗性植株,通过PCR检测和gus染色证明外源基因已成功转入植物细胞中。通过上述研究,进一步了解了马铃薯种质基因型与其再生条件的关系,建立一套高效马铃薯植物再生体系,为吉林省地方马铃薯的栽培、种质资源保存和遗传育种提供了重要的参考。
【学位单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S532
【部分图文】：

与本试验结果相一致。诱导出的愈伤组织均在 S1 中分化出芽，C5 和 C9 中的茎段在 S1 中分化效果如图2.1 所示。从 C1、C5、C6、C9 中转出的茎段从接种到出芽结束分别用了 42d、33d、41d、40d，分化率分别为 80%、77.5%、85%和 95%。虽然 C5 和 S1 的组合用时最短，但 C9和 S1 的组合，分化率最高，为‘大西洋’理想的再生体系。图 2.1‘大西洋’愈伤组织的诱导及分化A：C5 中愈伤组织的诱导；B：C9 中愈伤组织的诱导；C：C5 中的愈伤组织在 S1 中的分化；D：C9 中的愈伤组织在 S1 中的分化

图 2.2‘春薯 3 号’愈伤组织的诱导及分化A：‘春薯 3 号’愈伤组织的诱导；B：‘春薯 3 号’愈伤组织的分化Figure 2.2 Induction and differentiation of ‘Chunshu3’callusA: induction of ‘Chunshu3’callus; B: differentiation of ‘Chunshu3’callus 号’马铃薯再生体系的建立 号’在除 C9 中均有愈伤组织形成，在 C5 中愈伤组织生长状态.3），诱导率为 100%（表 2-5）。但愈伤组织在分化培养基中大，并且后期发生褐化（图 2.3）。表 2-5‘春薯 5 号’茎段愈伤组织诱导结果统计表Table 2-5 Statistics on callus induction results of ‘Chunshu5’stem segments接种外植体数（个） 出愈外植体数（个） 愈伤组织形态 诱导40 26 黄绿色 40 23 黄绿色

硕士学位论文 第二章 马铃薯再生体系结果 NAA 对‘春薯 5 号’愈伤组织诱导的影响最小，可以认为 2mg/L 2,4-D+0.4mg/L KT 为‘春薯 5 号’愈伤组织最佳诱导培养基。诱导阶段，‘春薯 5 号’在 S1 中不分化，仅表现出茎段的膨大；从 C5 织在 S2 中分化出芽，从接种到出芽结束用了 48d，分化率为 68.75%。
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 ;春薯4号[J];中国农业信息;2003年04期

2 蒲中荣;;马铃薯整薯短壮芽秋播保种的研究[J];中国马铃薯;1988年04期

3 潘淑窈;李秋平;;介绍两个马铃薯优良新品种——春薯3号、春薯4号[J];专业户;2002年06期

4 姜润田;刘佩兰;;春薯1号[J];农业科技通讯;1980年02期

5 池再香;肖钧;龚雪芹;杜正静;吴华洪;于飞;;贵州西部春薯主要生育期降水分布及其影响分析[J];中国农业气象;2014年02期

6 林平生;伍宏达;;春薯品种主要性状相关的分析[J];广东农业科学;1983年04期

7 ;春薯品种介绍[J];农村科学实验;2008年04期

8 ;马铃薯新品种——春薯9号(吉审薯2010003)[J];吉林蔬菜;2011年01期

9 ;马铃薯新品种——春薯9号[J];吉林蔬菜;2010年04期

10 ;春薯5号[J];中国农业科技导报;2000年06期

相关硕士学位论文 前3条

1 杨明贺;吉林省四种马铃薯再生体系和‘春薯3号’遗传转化条件的初探[D];吉林农业大学;2019年

2 耿伟;长春地区马铃薯纺锤块茎类病毒检测研究[D];中国农业科学院;2012年

3 魏长拴;中国部分地区马铃薯晚疫病菌的遗传分化研究[D];河北农业大学;2004年

本文编号：2886986