铁皮石斛种子组织培养条件的优化研究

发布时间：2020-11-21 14:44

　　 铁皮石斛是我国古文献中最先记载的药用石斛兰科植物之一,也是我国最珍稀的中药材之一。但是长期以来,人们用此药都是依靠采挖,野生石斛资源濒临灭绝,价格高涨。近年来,铁皮石斛繁殖的技术逐步走入研究者的视野,特别是组织培养技术,通过组培进行快繁是一种解决铁皮石斛资源缺乏的有效途径。但是目前市场上很多厂家培养出的铁皮石斛苗不规范,育苗质量参差不齐,生产成本高,培养条件不优,本研究的主要目的就是在前期铁皮石斛组培快繁基础上,以种胚为原材料,对铁皮石斛组织培养条件进一步优化,研究一次成苗技术,以缩短周期,降低成本,提高芽苗增殖率和质量,为铁皮石斛优良种苗工厂化生产提供科学依据。研究结果表明:1铁皮石斛初代培养条件优化研究。铁皮石斛种子在组培环境下适应性强,对培养基要求不高,从萌发时间、数量、质量看,种胚萌发较好培养基为MS+0.5mg·L-1NAA+15%土豆泥;铁皮石斛种子消毒方式以75%乙醇浸泡30s+8.0%次氯酸钠浸泡8 min效果较佳,较传统升汞溶液消毒方式更具生态性和安全性。2铁皮石斛继代培养条件优化研究。原球茎在培养基MS+0.2mg·L~(-1)NAA+2mg·L~(-1)6-BA上的增殖率最高,达到了98%;原球茎分化较好培养基为MS+0.5mg·L~(-1)NAA+10%土豆泥;原球茎增殖系数高于丛生芽增殖系数,增殖速率快。原球茎在液态培育基增殖系数高于固态培育基,但是容易发生褐变。3铁皮石斛生根壮苗培养条件优化研究。生根壮苗培育基较好配比应为MS+0.5 mg·L~(-1)NAA+0.5 mg·L~(-1)IBA+80g·L~(-1)香蕉泥;培养基中增添10%香蕉泥和0.5%活性炭(AC)对于幼苗壮苗生根均有促进作用。4一次性成苗培养技术。一次性成苗培养技术集穴盘育苗和移栽驯化技术于一体,有周期短、流程简单、成本低等特点,穴盘液体育苗方式实现了传统组培过程的简化,比传统培养周期缩短了近30d,成本降低了近10%,同时通过一次成苗技术培养的组培苗,移栽可以提高成活率。
【学位单位】：浙江农林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S567.239
【部分图文】：

2图1-1铁皮石斛喜欢在凉爽、湿度大、空气流通的环境下生长。适合半阴半阳的环境暖和湿润气候，大多生长在海拔高的山地的阴湿岩石上[10]野生的铁皮石斛基本上分布在温度高、湿度大的热带、亚热带，如东亚、东南亚等国家和地区[12]。在我国，铁皮石斛分布广泛[11]，要分布于秦岭、淮河以南的安徽西南部、浙江东部、福建西部、广西西北部、四川、云南东南部等地区（图1-2）海拔 1600m 的上高山峻峰、悬崖峭壁及岩石缝隙之间。近年来，浙江铁皮石斛快速发展，资源主要分布在临安天目山、温州雁荡山、金华磐安等地。而如金华东阳、永康等工业较发达县市区铁皮石斛研究?

铁皮石斛种子组织培养条件的优化研究5目前，铁皮石斛组织培养工厂化生产育苗生产主要如图1-3，较为繁琐。图1-3 组织培养工厂化生产育苗生产工艺流程图Fig.1-3 Production process of tissue culture本研究主要目的就是在前人铁皮石斛产业化研究的广泛基础上，进一步通过优化铁皮石斛培育基、琼脂、有机物添加物等条件，研究一次成苗技术，为减少组培程序，降低组培成本，提高铁皮石斛组培效率，实现铁皮石斛工厂化提供参考依据。1.6 研究的意义和创新之处植物组织培养技术是一项农业高新技术，是发展现代农业不可或缺的一部分。在地方县级单位开展组织培养研究无疑对当地的相关农业发展具有重要的意义。铁皮石斛种子组培研究项目是东阳农科所成立组培中心以来第一个项目，对农科所今后组培研究具有承上启下的作用。而铁皮石斛种子组培条件的优化试验，从小的方面来说，是对东阳农科所前期研究又一次升华和补充，而对铁皮石斛组培技术的研究领域上来说

处理 ① 处理 ② 处理 ③处理 ④ 处理 ⑤图4-1 不同培养基下铁皮石斛种胚萌发情况Fig.4-1 the germination of different kinds of media to the seed germination4.1.2 外植体灭菌方法筛选经过30天培养，一些处理陆续出现污染情况，最早出现污染的为接种后的2天，以细菌污染为主，最晚的出现在接种后的10天，以真菌污染为主，而没有污染的基本上开始膨大、变绿，萌发。还有一小部分，未出现污染，但也不萌发呈睡眠状态。由表4-2见，处理2中75%乙醇浸泡30s+8.0% 次氯酸钠浸泡8min + 无菌水冲洗5-6次的方式较佳，死亡率最低为5%，对种子质量影响小，易萌发；处理1的操作简单
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本文编号：2893157