人参和三七不定根培养中诱导子的筛选及代谢调控研究
发布时间：2021-03-11 08:32
本文在已建立的人参和三七不定根培养体系的基础上,针对培养物中皂苷含量偏低以及皂苷合成下游途径不清楚等科学问题,进行了诱导子的作用研究和基因UGTPgX的功能验证。本文首先考察了米曲霉、黄曲霉、黑曲霉的菌体粗提物以及菌体发酵液对人参不定根生长和人参皂苷积累的影响。发现浓度为200 mg·L-1黑曲霉菌体粗提物可以显著提高不定根中人参皂苷的含量(29.90±4.67mg·g-1),是对照组的3.52倍。为了研究黑曲霉菌体粗提物中起诱导作用的主要成分,考察了菌体蛋白和菌体多糖对人参皂苷含量的影响,结果显示当菌体蛋白浓度为100 mg·L-1时,人参皂苷的含量达到最大值为20.37±0.98 mg·g-1,是空白组的2.83倍。因此我们又考察了不同分子蛋白片段对人参皂苷含量的影响,发现150 mg·L-1大于30 kDa的蛋白片段使人参皂苷的含量达到最大18.78±0.55 mg·g-1,为空白组的1.90倍。随后对人参不定根中人参皂苷种类以及诱导机制进行了考察,...
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：117 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
诱导子作用机制Figure1-1Themechanismoftheelicitor
第 2 章 诱导子对人参不定根作用的研究47图2-5 大于30 kDa的蛋白片段对人参不定根中 ABA (a), ET (b), JA (c), PLA2(d), SA (e), Ca2+(f), NO (g,h), H2O2(i,j) 的积累Figure 2-5 Accumulation of ABA (a), ET (b), JA (c), PLA2(d), SA (e), Ca2+(f), NO (g,h), H2O2(i,j) in adventitious roots of P.ginseng as affected by protein fragment more than 30 kDaconcentrations. Data represent mean values ±SE of three replicates; each experiment wasrepeated twice. Mean separation within column by Duncan’s multiple range test at P ≤ 0.05.为了研究大于 30 kDa 的蛋白片段是如何提高人参不定根中皂苷含量的，我们对大于 30 kDa 的蛋白片段的诱导机制进行了研究。主要是通过考察蛋白作为诱导子作用不同时间对信号分子积累、抗性基因表达的影响。当大于30 kDa蛋白片段作为诱导子作用于人参不定根时，发现钙离子（Ca2+）、磷脂酶（PLA2）、过氧化氢（H2O2）、一氧化氮（NO）、乙烯（ET）、脱落酸（ABA）、水杨酸（SA）和茉莉酸（JA）的含量在短时间内迅速得到积累。并且从图2-5中可以看出当大于30 kDa蛋白片段作为诱导子作用12 h时，Ca2+
[158]。图2-6 大于30 kDa的蛋白片段对人参不定根中抗性基因表达的影响, PAL (a), PR10 (b)Figure 2-6 The effect of protein fragment more than 30 kDa on the expression levels of defensegenes in adventitious roots of P.ginseng. Data represent mean values ±SE of three replicates;each experiment was repeated twice. Mean separation within column by Duncan’s multiple rangetest at P ≤ 0.05.2.4.3.3 A.niger 大于 30KD 菌蛋白作用不同时间对人参皂苷代谢途径中功能基因表达量以及人参皂苷含量的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]东北地区人参种植业现状与存在问题[J]. 姬少玲. 辽宁林业科技. 2015(03)
[2]三七组织培养研究综述[J]. 黄勇,张铁,张文生,辛文锋. 文山学院学报. 2012(06)
[3]中药基因组学与合成生物学[J]. 陈士林,朱孝轩,李春芳,王勇,姚辉,孙超,宋经元. 药学学报. 2012(08)
[4]真菌诱导植物次生代谢产物积累的信号机制及在药用植物中的应用[J]. 崔晋龙,付少彬,高芬,王梦亮. 中草药. 2012(08)
[5]外源调节物质对人参毛状根生长及皂苷合成的影响[J]. 徐立新,赵寿经,梁彦龙,钱延春,金士琨. 吉林大学学报(工学版). 2010(06)
[6]三七不定根的离体诱导与培养[J]. 高先富,徐朝晖,刘佳健,马丽萍,尹龙萍,贾伟. 中国中药杂志. 2006(18)
[7]Nitric oxide mediates the fungal elicitor-induced puerarin biosynthesis in Pueraria thomsonii Benth. suspension cells through a salicylic acid （SA）-dependent and a jasmonic acid （JA）-dependent signal pathway[J]. XU Maojun1, DONG Jufang1 & ZHU Muyuan2 Department of Biotechnology, Zhejiang Gongshang University, Hangzhou 310035, China; State Key Laboratory of Plant Physiology and Biochemistry, College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310012, China. Science in China（Series C:Life Sciences）. 2006(04)
[8]诱导子在药用植物细胞培养中的应用[J]. 王和勇,罗恒,孙敏. 中草药. 2004(08)
[9]真菌诱导子对人参毛状根皂苷生物合成和生长的影响[J]. 刘峻,丁家宜,周倩耘,何林,王峥涛. 中国中药杂志. 2004(04)
[10]质膜NADPH氧化酶的活化与H2O2的产生介导内源激发子诱导人参悬浮细胞中PAL活性的提高与人参皂甙的积累（英文）[J]. 胡向阳,Steven J NEILL,蔡伟明,汤章城. Acta Botanica Sinica. 2003(12)
硕士论文
[1]丹参毛状根中酚酸类和酮类成分合成途径中bHLH和WD40转录因子的调控[D]. 邢丙聪.浙江理工大学 2015
[2]小分子化合物的添加提高人参皂苷产量及其作用机制探索[D]. 黄超.华东理工大学 2013
[3]真菌诱导白桦三萜积累的营养生理和分子机制的初步研究[D]. 许道琦.东北林业大学 2013
[4]应用代谢组学策略研究茉莉酸甲酯对三七不定根次生代谢产物的影响[D]. 淡墨.上海交通大学 2008
[5]三七SE基因克隆及转化烟草、绞股蓝的初步研究[D]. 赵瑞强.广西医科大学 2007
[6]中生菌素对水稻悬浮细胞主要防卫反应基因转录表达的影响[D]. 王劲波.中国农业科学院 2002
本文编号：3076184
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：117 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
诱导子作用机制Figure1-1Themechanismoftheelicitor
第 2 章 诱导子对人参不定根作用的研究47图2-5 大于30 kDa的蛋白片段对人参不定根中 ABA (a), ET (b), JA (c), PLA2(d), SA (e), Ca2+(f), NO (g,h), H2O2(i,j) 的积累Figure 2-5 Accumulation of ABA (a), ET (b), JA (c), PLA2(d), SA (e), Ca2+(f), NO (g,h), H2O2(i,j) in adventitious roots of P.ginseng as affected by protein fragment more than 30 kDaconcentrations. Data represent mean values ±SE of three replicates; each experiment wasrepeated twice. Mean separation within column by Duncan’s multiple range test at P ≤ 0.05.为了研究大于 30 kDa 的蛋白片段是如何提高人参不定根中皂苷含量的，我们对大于 30 kDa 的蛋白片段的诱导机制进行了研究。主要是通过考察蛋白作为诱导子作用不同时间对信号分子积累、抗性基因表达的影响。当大于30 kDa蛋白片段作为诱导子作用于人参不定根时，发现钙离子（Ca2+）、磷脂酶（PLA2）、过氧化氢（H2O2）、一氧化氮（NO）、乙烯（ET）、脱落酸（ABA）、水杨酸（SA）和茉莉酸（JA）的含量在短时间内迅速得到积累。并且从图2-5中可以看出当大于30 kDa蛋白片段作为诱导子作用12 h时，Ca2+
[158]。图2-6 大于30 kDa的蛋白片段对人参不定根中抗性基因表达的影响, PAL (a), PR10 (b)Figure 2-6 The effect of protein fragment more than 30 kDa on the expression levels of defensegenes in adventitious roots of P.ginseng. Data represent mean values ±SE of three replicates;each experiment was repeated twice. Mean separation within column by Duncan’s multiple rangetest at P ≤ 0.05.2.4.3.3 A.niger 大于 30KD 菌蛋白作用不同时间对人参皂苷代谢途径中功能基因表达量以及人参皂苷含量的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]东北地区人参种植业现状与存在问题[J]. 姬少玲. 辽宁林业科技. 2015(03)
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[4]真菌诱导植物次生代谢产物积累的信号机制及在药用植物中的应用[J]. 崔晋龙,付少彬,高芬,王梦亮. 中草药. 2012(08)
[5]外源调节物质对人参毛状根生长及皂苷合成的影响[J]. 徐立新,赵寿经,梁彦龙,钱延春,金士琨. 吉林大学学报(工学版). 2010(06)
[6]三七不定根的离体诱导与培养[J]. 高先富,徐朝晖,刘佳健,马丽萍,尹龙萍,贾伟. 中国中药杂志. 2006(18)
[7]Nitric oxide mediates the fungal elicitor-induced puerarin biosynthesis in Pueraria thomsonii Benth. suspension cells through a salicylic acid （SA）-dependent and a jasmonic acid （JA）-dependent signal pathway[J]. XU Maojun1, DONG Jufang1 & ZHU Muyuan2 Department of Biotechnology, Zhejiang Gongshang University, Hangzhou 310035, China; State Key Laboratory of Plant Physiology and Biochemistry, College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310012, China. Science in China（Series C:Life Sciences）. 2006(04)
[8]诱导子在药用植物细胞培养中的应用[J]. 王和勇,罗恒,孙敏. 中草药. 2004(08)
[9]真菌诱导子对人参毛状根皂苷生物合成和生长的影响[J]. 刘峻,丁家宜,周倩耘,何林,王峥涛. 中国中药杂志. 2004(04)
[10]质膜NADPH氧化酶的活化与H2O2的产生介导内源激发子诱导人参悬浮细胞中PAL活性的提高与人参皂甙的积累（英文）[J]. 胡向阳,Steven J NEILL,蔡伟明,汤章城. Acta Botanica Sinica. 2003(12)
硕士论文
[1]丹参毛状根中酚酸类和酮类成分合成途径中bHLH和WD40转录因子的调控[D]. 邢丙聪.浙江理工大学 2015
[2]小分子化合物的添加提高人参皂苷产量及其作用机制探索[D]. 黄超.华东理工大学 2013
[3]真菌诱导白桦三萜积累的营养生理和分子机制的初步研究[D]. 许道琦.东北林业大学 2013
[4]应用代谢组学策略研究茉莉酸甲酯对三七不定根次生代谢产物的影响[D]. 淡墨.上海交通大学 2008
[5]三七SE基因克隆及转化烟草、绞股蓝的初步研究[D]. 赵瑞强.广西医科大学 2007
[6]中生菌素对水稻悬浮细胞主要防卫反应基因转录表达的影响[D]. 王劲波.中国农业科学院 2002
本文编号：3076184
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