外源ABA对低温下冬小麦bZIPs转录因子的表达调控
发布时间：2021-03-20 10:33
冬小麦（Triticum aestivum L.）品种东农冬麦1号（Dongnongdongmai 1,Dn1）、东农冬麦2号（Dongnongdongmai 2,Dn2）是在黑龙江省能够安全越冬的强抗寒品种,对其开展抗寒研究具有重要的现实意义。济麦22（J22）具有较强的抗寒能力,但不能在黑龙江省越冬。脱落酸（ABA）在植物非生物胁迫过程中发挥重要作用。本研究以这三种冬小麦为试验材料,挑选与抗逆相关的bZIP家族中的3个转录因子基因（TabZIP2、TabZIPD和TabZIP-like）,在大田自然降温（5℃、0℃、-10℃、-25℃）条件下,探究其转录水平表达是否受ABA及低温诱导调控。通过定量方法,测定3个转录因子基因在低温下的相对表达水平,从中筛选低温下ABA相关性变化倍数较大的转录因子并对其进行生物信息学预测分析,同时,克隆并构建TabZIP2的过表达载体,瞬时表达到烟草叶片中对TabZIP2表达进行分析,进而补充完善转录因子调控冬小麦抗寒的机制。研究结果如下:（1）在5℃、0℃、-10℃、-25℃（大田自然降温）时取样,对其3个转录因子（TabZIP2、TabZIPD和T...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
逆境胁迫与基因表达之间细胞信号转导途径[59]
低温相关转录因子（TabZIP2、TabZIPD 和 TabZIP-like）引因 TabZIP2、TabZIPD、TabZIP-like 和 TaActin 引物序列如表 3-1 所示：表 3-1 定量引物序列Tab. 3-1 Sequences of primers used in Real-time PCR称 上游引物 下游引物P2 AAACGTGCTGTCCAACAATATG CCACAGGAGAGGGAAAGAACCPD CCTCCGCTGGATCAACTACC TCCTCCTGATGTGCGTGTTCP-like GTGTTGTTGTCGTTGTCGTATTTC GCCTTGGTATTGCGTGTAAGCn CCTTAGTACCTTCCAACAGATGT CCAGACAACTCGCAACTTAGADn1 分蘖节和叶片 RNA 的提取 Dn1 不同温度（5℃、0℃、-10℃和-25℃）下取样的分蘖节和叶片中进行总 R用超微量紫外分光光度计检测其浓度，数据显示 RNA 纯度较高，可用于后续度下 RNA 进行琼脂糖凝胶电泳，来对其质量进行检测，如图 3-1 所示，均获明质量良好。Dn2 和 J22 同 Dn1。
东北农业大学工程硕士学位论文3.1.3 定量基因引物特异性检测对四个温度条件下（5℃、0℃、-10℃、-25℃）提取的 RNA 反转录为 cDNA，以 cDN为模板，对 3 个转录因子基因的引物进行特异性检测。如图 3-2（从左到右依次为 TabZIPTabZIPD、TabZIP-like），PCR 胶图显示为条带单一，亮度清晰，无拖尾现象，证明该引物定量程序能准确的体现相关基因的表达量变化，可用于后续实时定量实验。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小麦生产概况及其发展[J]. 赵广才,常旭虹,王德梅,陶志强,王艳杰,杨玉双,朱英杰. 作物杂志. 2018(04)
[2]荒漠昆虫小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698对酿酒酵母的低温保护作用[J]. 张凤娟,孙琳洁,李素丽,马纪. 食品与发酵工业. 2017(05)
[3]东农冬麦1号TabZIP1基因的生物信息学分析及低温和ABA对其表达模式的影响[J]. 吕岩,苍晶,卢秋巍,杨宁,冯明芳,孟德义,刘增兵,彭瞰看,徐庆华,张达,于晶. 麦类作物学报. 2017(01)
[4]MlNAC2基因的克隆及其在南荻根部的表达模式[J]. 吉璐,陈智勇,肖亮,易自力. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2016(01)
[5]甘蓝型油菜低温诱导下的bZIP转录因子挖掘及聚类分析[J]. 杜春芳,刘春晴,咸拴狮,范建春,胡恺宁,李萌,涂金星,傅廷栋. 植物遗传资源学报. 2016(01)
[6]木本植物低温胁迫生理及分子机制研究进展[J]. 乌凤章,王贺新,徐国辉,张自川. 林业科学. 2015(07)
[7]冬小麦抗寒相关microRNA生物信息学预测分析与表达特征的验证[J]. 卢秋巍,徐庆华,钟昊,苍晶,于晶,郑成成,吴冰,朱会杰,冯明芳,梅琳,孙仙泽. 植物生理学报. 2015(05)
[8]植物低温胁迫下的逆境耐受机制综述[J]. 张慧仙,李科. 安徽农学通报. 2014(18)
[9]外源SA对低温下杏花器官超微结构的影响[J]. 张俊环,王玉柱,孙浩元,杨丽,姜凤超. 园艺学报. 2014(03)
[10]外源ABA对东农冬麦1号miRNA表达模式的影响[J]. 王健飞,苍晶,于晶,刘丽杰,黄儒,郭人铭,王建超,徐琛. 麦类作物学报. 2014(03)
博士论文
[1]冬小麦抗寒lncRNA筛选及与tae-miR398应答低温胁迫的互作研究[D]. 卢秋巍.东北农业大学 2018
[2]低温下ABA调控冬小麦糖代谢及抗寒基因表达的研究[D]. 刘丽杰.东北农业大学 2013
[3]东农冬麦1号越冬期间的microRNA高通量测序及生物信息学分析[D]. 卢宝伟.东北农业大学 2012
硕士论文
[1]ABA调控冬小麦抗寒相关转录因子表达模式的分析及功能探究[D]. 吕岩.东北农业大学 2018
[2]冬小麦miR5049-3p和miR1120a分别与其靶基因6PGL和FBA互作响应低温胁迫的分子机制[D]. 彭瞰看.东北农业大学 2018
[3]低温驯化及ABA对冬小麦叶绿素荧光特性和抗氧化酶活性的影响[D]. 王秀田.东北农业大学 2017
[4]东农冬麦1号响应低温胁迫的比较代谢组学研究[D]. 包雨卓.东北农业大学 2017
[5]水杨酸处理对低温胁迫下冬小麦蔗糖代谢的影响[D]. 吴冰.东北农业大学 2015
[6]外源水杨酸提高小麦抗寒性的应用研究[D]. 李速.东北农业大学 2015
[7]水稻转录因子OsbZIP2的初步研究[D]. 代继松.安徽农业大学 2014
[8]旱涝—低温交叉胁迫对小麦抗寒性的影响[D]. 李怀伟.东北农业大学 2013
[9]几种常绿阔叶植物抗寒性研究[D]. 邵文鹏.山东农业大学 2009
[10]黄瓜耐冷指标的筛选及Ca～（2+）在黄瓜耐冷中作用的研究[D]. 李晓明.南京农业大学 2006
本文编号：3090857
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
逆境胁迫与基因表达之间细胞信号转导途径[59]
低温相关转录因子（TabZIP2、TabZIPD 和 TabZIP-like）引因 TabZIP2、TabZIPD、TabZIP-like 和 TaActin 引物序列如表 3-1 所示：表 3-1 定量引物序列Tab. 3-1 Sequences of primers used in Real-time PCR称 上游引物 下游引物P2 AAACGTGCTGTCCAACAATATG CCACAGGAGAGGGAAAGAACCPD CCTCCGCTGGATCAACTACC TCCTCCTGATGTGCGTGTTCP-like GTGTTGTTGTCGTTGTCGTATTTC GCCTTGGTATTGCGTGTAAGCn CCTTAGTACCTTCCAACAGATGT CCAGACAACTCGCAACTTAGADn1 分蘖节和叶片 RNA 的提取 Dn1 不同温度（5℃、0℃、-10℃和-25℃）下取样的分蘖节和叶片中进行总 R用超微量紫外分光光度计检测其浓度，数据显示 RNA 纯度较高，可用于后续度下 RNA 进行琼脂糖凝胶电泳，来对其质量进行检测，如图 3-1 所示，均获明质量良好。Dn2 和 J22 同 Dn1。
东北农业大学工程硕士学位论文3.1.3 定量基因引物特异性检测对四个温度条件下（5℃、0℃、-10℃、-25℃）提取的 RNA 反转录为 cDNA，以 cDN为模板，对 3 个转录因子基因的引物进行特异性检测。如图 3-2（从左到右依次为 TabZIPTabZIPD、TabZIP-like），PCR 胶图显示为条带单一，亮度清晰，无拖尾现象，证明该引物定量程序能准确的体现相关基因的表达量变化，可用于后续实时定量实验。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小麦生产概况及其发展[J]. 赵广才,常旭虹,王德梅,陶志强,王艳杰,杨玉双,朱英杰. 作物杂志. 2018(04)
[2]荒漠昆虫小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698对酿酒酵母的低温保护作用[J]. 张凤娟,孙琳洁,李素丽,马纪. 食品与发酵工业. 2017(05)
[3]东农冬麦1号TabZIP1基因的生物信息学分析及低温和ABA对其表达模式的影响[J]. 吕岩,苍晶,卢秋巍,杨宁,冯明芳,孟德义,刘增兵,彭瞰看,徐庆华,张达,于晶. 麦类作物学报. 2017(01)
[4]MlNAC2基因的克隆及其在南荻根部的表达模式[J]. 吉璐,陈智勇,肖亮,易自力. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2016(01)
[5]甘蓝型油菜低温诱导下的bZIP转录因子挖掘及聚类分析[J]. 杜春芳,刘春晴,咸拴狮,范建春,胡恺宁,李萌,涂金星,傅廷栋. 植物遗传资源学报. 2016(01)
[6]木本植物低温胁迫生理及分子机制研究进展[J]. 乌凤章,王贺新,徐国辉,张自川. 林业科学. 2015(07)
[7]冬小麦抗寒相关microRNA生物信息学预测分析与表达特征的验证[J]. 卢秋巍,徐庆华,钟昊,苍晶,于晶,郑成成,吴冰,朱会杰,冯明芳,梅琳,孙仙泽. 植物生理学报. 2015(05)
[8]植物低温胁迫下的逆境耐受机制综述[J]. 张慧仙,李科. 安徽农学通报. 2014(18)
[9]外源SA对低温下杏花器官超微结构的影响[J]. 张俊环,王玉柱,孙浩元,杨丽,姜凤超. 园艺学报. 2014(03)
[10]外源ABA对东农冬麦1号miRNA表达模式的影响[J]. 王健飞,苍晶,于晶,刘丽杰,黄儒,郭人铭,王建超,徐琛. 麦类作物学报. 2014(03)
博士论文
[1]冬小麦抗寒lncRNA筛选及与tae-miR398应答低温胁迫的互作研究[D]. 卢秋巍.东北农业大学 2018
[2]低温下ABA调控冬小麦糖代谢及抗寒基因表达的研究[D]. 刘丽杰.东北农业大学 2013
[3]东农冬麦1号越冬期间的microRNA高通量测序及生物信息学分析[D]. 卢宝伟.东北农业大学 2012
硕士论文
[1]ABA调控冬小麦抗寒相关转录因子表达模式的分析及功能探究[D]. 吕岩.东北农业大学 2018
[2]冬小麦miR5049-3p和miR1120a分别与其靶基因6PGL和FBA互作响应低温胁迫的分子机制[D]. 彭瞰看.东北农业大学 2018
[3]低温驯化及ABA对冬小麦叶绿素荧光特性和抗氧化酶活性的影响[D]. 王秀田.东北农业大学 2017
[4]东农冬麦1号响应低温胁迫的比较代谢组学研究[D]. 包雨卓.东北农业大学 2017
[5]水杨酸处理对低温胁迫下冬小麦蔗糖代谢的影响[D]. 吴冰.东北农业大学 2015
[6]外源水杨酸提高小麦抗寒性的应用研究[D]. 李速.东北农业大学 2015
[7]水稻转录因子OsbZIP2的初步研究[D]. 代继松.安徽农业大学 2014
[8]旱涝—低温交叉胁迫对小麦抗寒性的影响[D]. 李怀伟.东北农业大学 2013
[9]几种常绿阔叶植物抗寒性研究[D]. 邵文鹏.山东农业大学 2009
[10]黄瓜耐冷指标的筛选及Ca～（2+）在黄瓜耐冷中作用的研究[D]. 李晓明.南京农业大学 2006
本文编号：3090857
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/nzwlw/3090857.html
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