农杆菌介导的大豆不同外植体转化效率研究
发布时间：2021-03-22 21:43
本试验以20种东北地区主栽品种为试验材料,分别建立大豆子叶节转化再生体系和大豆愈伤组织的遗传转化体系,对这些大豆品种的丛生芽再生率、抗性丛生芽率、子叶节GUS染色率,愈伤组织GUS染色率等指标进行比较和研究,旨在筛选出适合用于大豆遗传转化试验的最有效的大豆品种,为东北地区大豆实验室建立优良的大豆转化体系和大豆再生体系,提供品种选择上的理论依据和数据支持。主要研究结果如下:1.铁丰31、沈农20、辽豆13、辽豆32、东豆17、黑农59、黑农60、南农31,以上8个品种在两种外植体的农杆菌介导转化试验中均表现出较高转化效率。2.中黄35、沈农8、辽豆50、东豆641、黑农54、铁豆81,以上6个品种,在两种外植体的农杆菌介导转化试验中表现为低转化效率。3.对比了不同品种的转化效率表现,发现中黄13、辽豆15、东豆9、铁豆37、中黄56、沈农22,这6个品种的转化效率情况与其在试验中所选择的外植体类型有关。4.中黄56、沈农22这两个品种,因其产生了嵌合体而呈现假阳性,导致在子叶节中体现出较低的转化率,而在愈伤组织的农杆菌介导试验中表现出高转化效率;中黄13、辽豆15、东豆9、铁豆37,这4...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
质粒pCAMBIA3301-1图谱
图 2 大豆种子的灭菌Fig.2 Sterilization of soybean seeds发的大豆种子，种脐向下接种至萌发培养基中萌发，每个子，在 26℃条件下，黑暗处萌发 16h。的获得与侵染豆种子，用镊子固定好，再用手术刀从两片子叶中间切腋芽。在子叶节处，用刀轻划 7 刀，切割前将刀片沾取放入含菌液的 CCM 液体培养基中，放入转速为 126r/m荡 30min。每个品种都重复上述步骤。
图 3 子叶节的丛生芽诱导过程ig. 3 Cluster Bud induction process of Cotyledon nodes选培养基中加入筛选剂草甘膦 PPT（5mg/L），以含有芽诱导培养基（SIM）的广口培养瓶中，在暗 8h）培养，培养 10 天后，切去其多余的下后，统计抗性丛生芽诱导率。组织的获得织的获得，不同于子叶节的获得，获取愈伤组别置于条件相同的培养瓶中，萌发 5 天，26℃，待其下胚轴伸长取下胚轴，用手术刀切成 1cS 培养基的培养皿中，培养 10 天，得到完整的
【参考文献】：
期刊论文
[1]优化子叶节转化法培育大豆MtDREB2A转基因植株[J]. 吴国栋,修宇,王华芳. 植物学报. 2018(01)
[2]发状根在大豆基因工程中应用的研究进展[J]. 于威君,李晓薇,肖洪庆,Aysha Jameel,侯心悦,李海燕. 农业与技术. 2017(09)
[3]农杆菌介导大豆遗传转化研究进展及其应用[J]. 姚丙晨,孙玥,孙林静,苏京平,闫双勇,刘学军. 中国农学通报. 2016(06)
[4]转基因技术在大豆性状改良上的应用[J]. 杜艳丽,谢甫绨. 大豆科学. 2015(02)
[5]大豆种子发芽期耐旱性鉴定的适宜PEG-6000浓度筛选[J]. 舒英杰,周玉丽,时侠清,胡能兵,邵庆勤,杜军利. 大豆科学. 2015(01)
[6]大豆再生体系的研究[J]. 张艳,南相日,满为群,李柱刚. 生物学通报. 2012(11)
[7]大豆遗传转化技术研究进展[J]. 杨向东,隋丽,李启云,杨静,邢国杰,郭东全,董英山. 大豆科学. 2012(02)
[8]影响农杆菌介导大豆子叶节遗传转化因素的研究[J]. 王凤敏,李涛,王运杰,荆慧贤,史晓蕾,张孟臣,邸锐,蒋春志. 大豆科学. 2011(04)
[9]大豆子叶节植株再生体系的研究[J]. 赖冰冰,韩阳,李春风,张兴政,张立军,宋书宏. 大豆科学. 2011(02)
[10]根癌农杆菌介导反义fad2-1基因转化大豆的研究[J]. 周延清,刘艳菊,李敏,段红英,周春娥,王芳,苑保军. 河南农业科学. 2010(09)
博士论文
[1]磷酸二铵对单混种植条件下超高产大豆农艺性状和生理生化指标的影响[D]. 马兆惠.沈阳农业大学 2014
硕士论文
[1]大豆再生相关的转录组分析及GmARF2基因的初步研究[D]. 李思楠.东北农业大学 2016
[2]农杆菌介导非抗生素标记的抗逆基因BADH转化大豆的研究[D]. 李虹章.浙江师范大学 2012
[3]小麦与叶锈菌互作体系中TaHIR2基因克隆及其特性分析[D]. 陈佳平.河北农业大学 2011
[4]转录调控基因GmGT-2A转化大豆与体系优化研究[D]. 杨海英.浙江师范大学 2011
[5]农杆菌介导的水稻转核糖体失活蛋白基因的研究[D]. 刘瑞芳.吉林大学 2007
[6]利用农杆菌介导法将双价抗虫基因（Bt、CpTI）导入大豆的研究[D]. 吴颖.中国人民解放军军需大学 2003
[7]农杆菌介导几丁质酶基因转化大豆子叶节主要影响因素的研究[D]. 刘北东.东北农业大学 2001
本文编号：3094528
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
质粒pCAMBIA3301-1图谱
图 2 大豆种子的灭菌Fig.2 Sterilization of soybean seeds发的大豆种子，种脐向下接种至萌发培养基中萌发，每个子，在 26℃条件下，黑暗处萌发 16h。的获得与侵染豆种子，用镊子固定好，再用手术刀从两片子叶中间切腋芽。在子叶节处，用刀轻划 7 刀，切割前将刀片沾取放入含菌液的 CCM 液体培养基中，放入转速为 126r/m荡 30min。每个品种都重复上述步骤。
图 3 子叶节的丛生芽诱导过程ig. 3 Cluster Bud induction process of Cotyledon nodes选培养基中加入筛选剂草甘膦 PPT（5mg/L），以含有芽诱导培养基（SIM）的广口培养瓶中，在暗 8h）培养，培养 10 天后，切去其多余的下后，统计抗性丛生芽诱导率。组织的获得织的获得，不同于子叶节的获得，获取愈伤组别置于条件相同的培养瓶中，萌发 5 天，26℃，待其下胚轴伸长取下胚轴，用手术刀切成 1cS 培养基的培养皿中，培养 10 天，得到完整的
【参考文献】：
期刊论文
[1]优化子叶节转化法培育大豆MtDREB2A转基因植株[J]. 吴国栋,修宇,王华芳. 植物学报. 2018(01)
[2]发状根在大豆基因工程中应用的研究进展[J]. 于威君,李晓薇,肖洪庆,Aysha Jameel,侯心悦,李海燕. 农业与技术. 2017(09)
[3]农杆菌介导大豆遗传转化研究进展及其应用[J]. 姚丙晨,孙玥,孙林静,苏京平,闫双勇,刘学军. 中国农学通报. 2016(06)
[4]转基因技术在大豆性状改良上的应用[J]. 杜艳丽,谢甫绨. 大豆科学. 2015(02)
[5]大豆种子发芽期耐旱性鉴定的适宜PEG-6000浓度筛选[J]. 舒英杰,周玉丽,时侠清,胡能兵,邵庆勤,杜军利. 大豆科学. 2015(01)
[6]大豆再生体系的研究[J]. 张艳,南相日,满为群,李柱刚. 生物学通报. 2012(11)
[7]大豆遗传转化技术研究进展[J]. 杨向东,隋丽,李启云,杨静,邢国杰,郭东全,董英山. 大豆科学. 2012(02)
[8]影响农杆菌介导大豆子叶节遗传转化因素的研究[J]. 王凤敏,李涛,王运杰,荆慧贤,史晓蕾,张孟臣,邸锐,蒋春志. 大豆科学. 2011(04)
[9]大豆子叶节植株再生体系的研究[J]. 赖冰冰,韩阳,李春风,张兴政,张立军,宋书宏. 大豆科学. 2011(02)
[10]根癌农杆菌介导反义fad2-1基因转化大豆的研究[J]. 周延清,刘艳菊,李敏,段红英,周春娥,王芳,苑保军. 河南农业科学. 2010(09)
博士论文
[1]磷酸二铵对单混种植条件下超高产大豆农艺性状和生理生化指标的影响[D]. 马兆惠.沈阳农业大学 2014
硕士论文
[1]大豆再生相关的转录组分析及GmARF2基因的初步研究[D]. 李思楠.东北农业大学 2016
[2]农杆菌介导非抗生素标记的抗逆基因BADH转化大豆的研究[D]. 李虹章.浙江师范大学 2012
[3]小麦与叶锈菌互作体系中TaHIR2基因克隆及其特性分析[D]. 陈佳平.河北农业大学 2011
[4]转录调控基因GmGT-2A转化大豆与体系优化研究[D]. 杨海英.浙江师范大学 2011
[5]农杆菌介导的水稻转核糖体失活蛋白基因的研究[D]. 刘瑞芳.吉林大学 2007
[6]利用农杆菌介导法将双价抗虫基因（Bt、CpTI）导入大豆的研究[D]. 吴颖.中国人民解放军军需大学 2003
[7]农杆菌介导几丁质酶基因转化大豆子叶节主要影响因素的研究[D]. 刘北东.东北农业大学 2001
本文编号：3094528
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