Bt Cry1Ac蛋白的代谢及在土壤中的转移和6-BA免疫分析研究
发布时间：2021-06-22 18:31
转Bt基因棉花已在全世界范围内得到广泛种植。有关Bt棉花生物安全性的研究,主要集中在土壤中Bt蛋白的来源和动态变化、Bt蛋白对土壤生态系统的影响、Bt棉田昆虫种群变化和环境安全等方面。对于Bt蛋白在土壤中降解、代谢、转移以及代谢产物对土壤微生物和非转基因作物的影响方面研究较少。本课题用土壤链霉菌所分泌的蛋白酶研究了 BtCry1Ac的代谢、鉴定了 BtCry1Ac蛋白降解的大分子片段和小分子多肽并研究了代谢产物在土壤中的转移及对所转移的作物和土壤微生物的影响。（1）合成BtCry1Ac基因,构建到质粒pGEX-4T-1中。该重组质粒BtCry1Ac-pGEX-4T-1转化到大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导原核表达融合蛋白。利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析纯化蛋白,纯化的Bt蛋白用已有的Bt Cry1Ac ELISA试剂盒进行了验证。（2）研究了利用免疫亲和层析法（IAC）从转Bt棉中纯化Bt蛋白的方法。活化凝胶结合抗体蛋白率0.0262 mg/mg,是商品化凝胶结合率的40.6%。棉籽提取液中90%Bt蛋白被凝胶亲和吸附,仅约1%能被洗脱,且杂质较多。（3）用液质联用、Edman...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：125 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１全球转基因作物种植面积趋势线（１９９６－２０１５年）??巧ｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｔｒｅｎ姐ｉｎｅ?ｏｆ?ｇｌｏｂａｌ?ａｒｅａ?ｏｆ?ｂｉｏｔｅｃｈ?ｃｒｏｐ?（１９９６－２０１５）??２０１５年世界上有二千八个国家和地区耕种了转基因?
９?苏丹＊?０．?１?棉花??０?洪都拉斯?〈０．?１?玉米??１?智利?＜０．?１?玉米、大豆、油菜??２?萄萄牙?＜０．?１?玉米??３?越南?＜０．?１?玉米??４?捷克共和国?＜０．１?玉米???斯洛伐克?＜０．１?玉米??６?哥斯达黎加?〈０．１?棉花、大豆??７?孟加拉国?〈０．１?茄子??８?罗马尼亚?＜０．?１?玉米??却?１７９．?７十九个转基因作物耕种超过五万ｈａ．的国家??２０１５年，美国等国转基因作物面积都超过了?０．１亿ｈａ．，己西保持持续增长的态势，除少，阿根廷、印度和加拿大相对持平。２０１５年的世界耕种形式为今后的连续増长创造了ｅｓ，?２０１５）。２０１５年亚非拉的农民共种植面积为０．９７１亿ｈａ．，占世界总面积的５４％，较２０比增加了?１％，发达国家总面积为０．抬６亿ｈａ．，前者耕种面积从２０１２至２０１５年持续超
ＣｏＨ?＋ＣＮＢｒ?？??Ｓ邸?ｈａｒｏｅｅ?４?反??图２－２琼脂糖凝胶活化方法??巧ｇ．?２－２?Ｔｈｅ?ａｃｔｉｖａｔｉ畑?ｏｆ?ｓｅｐｈａｒｏｓｅ?４Ｂ??２．２．２．２?Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ?４Ｂ活化效果分析??比较本研究活化的琼脂糖凝胶（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ?４Ｂ）与商品化的活化琼脂糖凝胶（ＣＮＢｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ??Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ），臥判断本研究的琼脂糖凝胶活化方法的效果。??（１）
【参考文献】：
期刊论文
[1]适宜滴灌定额提高枣棉间作中棉花产量和土地生产效率[J]. 李发永,王龙,王兴鹏,姚宝林,雷江. 农业工程学报. 2014(14)
[2]杏棉间作田间配置对棉花生长发育及棉铃时空分布的影响[J]. 刘郁娜,陈飞虎,胥新强,张巨松,徐文修,张永强. 棉花学报. 2013(01)
[3]多克隆抗体制备方法的研究进展[J]. 贾慧娜,罗海玲. 中国草食动物科学. 2012(S1)
[4]降钙素（CT）增强化学发光酶免疫分析法的建立及其在骨质疏松症中的应用[J]. 车彦海,赵令军,马宁,张培因. 中国医药指南. 2012(18)
[5]不同棉花间作模式中作物养分吸收和利用对间作优势的贡献[J]. 党小燕,刘建国,帕尼古丽,王江丽,危常州,李隆. 中国生态农业学报. 2012(05)
[6]Transgenic Crops:An Option for Future Agriculture[J]. Wei-Cai Yang Issue Editor Institute of Genetics and Developmental Biology Chinese Academy of Sciences China Jianmin Wan Issue Editor Institute of Crop Science Chinese Academy of Agriculture Sciences China. Journal of Integrative Plant Biology. 2011(07)
[7]喀什地区棉花-甜瓜立体套作栽培技术研究[J]. 李俊华,翟文强,王豪杰,栾作涛,吴海波,张淳. 新疆农业科学. 2010(12)
[8]化学发光免疫分析技术及其应用研究进展[J]. 魏光伟,余永鹏,魏文康,罗胜军. 动物医学进展. 2010(03)
[9]125I标记抗人CD40 mAb 5H6在荷人卵巢癌（HO8910）BALB/c裸鼠体内分布及放射免疫显像[J]. 罗先富,章斌,马泓冰,汤琳,郑舒丹,徐耀瑜,吴翼伟,张学光. 中国免疫学杂志. 2008(06)
[10]Bland-Altman分析在临床测量方法一致性评价中的应用[J]. 陈卉. 中国卫生统计. 2007(03)
博士论文
[1]青蒿素类药物特异性单克隆抗体的制备及快速免疫检测方法的建立与应用[D]. 郭素琴.中国农业大学 2016
[2]大肠癌上调表达蛋白NPM1单克隆抗体的制备及初步应用[D]. 杨光远.吉林大学 2013
本文编号：3243334
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：125 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１全球转基因作物种植面积趋势线（１９９６－２０１５年）??巧ｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｔｒｅｎ姐ｉｎｅ?ｏｆ?ｇｌｏｂａｌ?ａｒｅａ?ｏｆ?ｂｉｏｔｅｃｈ?ｃｒｏｐ?（１９９６－２０１５）??２０１５年世界上有二千八个国家和地区耕种了转基因?
９?苏丹＊?０．?１?棉花??０?洪都拉斯?〈０．?１?玉米??１?智利?＜０．?１?玉米、大豆、油菜??２?萄萄牙?＜０．?１?玉米??３?越南?＜０．?１?玉米??４?捷克共和国?＜０．１?玉米???斯洛伐克?＜０．１?玉米??６?哥斯达黎加?〈０．１?棉花、大豆??７?孟加拉国?〈０．１?茄子??８?罗马尼亚?＜０．?１?玉米??却?１７９．?７十九个转基因作物耕种超过五万ｈａ．的国家??２０１５年，美国等国转基因作物面积都超过了?０．１亿ｈａ．，己西保持持续增长的态势，除少，阿根廷、印度和加拿大相对持平。２０１５年的世界耕种形式为今后的连续増长创造了ｅｓ，?２０１５）。２０１５年亚非拉的农民共种植面积为０．９７１亿ｈａ．，占世界总面积的５４％，较２０比增加了?１％，发达国家总面积为０．抬６亿ｈａ．，前者耕种面积从２０１２至２０１５年持续超
ＣｏＨ?＋ＣＮＢｒ?？??Ｓ邸?ｈａｒｏｅｅ?４?反??图２－２琼脂糖凝胶活化方法??巧ｇ．?２－２?Ｔｈｅ?ａｃｔｉｖａｔｉ畑?ｏｆ?ｓｅｐｈａｒｏｓｅ?４Ｂ??２．２．２．２?Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ?４Ｂ活化效果分析??比较本研究活化的琼脂糖凝胶（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ?４Ｂ）与商品化的活化琼脂糖凝胶（ＣＮＢｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ??Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ），臥判断本研究的琼脂糖凝胶活化方法的效果。??（１）
【参考文献】：
期刊论文
[1]适宜滴灌定额提高枣棉间作中棉花产量和土地生产效率[J]. 李发永,王龙,王兴鹏,姚宝林,雷江. 农业工程学报. 2014(14)
[2]杏棉间作田间配置对棉花生长发育及棉铃时空分布的影响[J]. 刘郁娜,陈飞虎,胥新强,张巨松,徐文修,张永强. 棉花学报. 2013(01)
[3]多克隆抗体制备方法的研究进展[J]. 贾慧娜,罗海玲. 中国草食动物科学. 2012(S1)
[4]降钙素（CT）增强化学发光酶免疫分析法的建立及其在骨质疏松症中的应用[J]. 车彦海,赵令军,马宁,张培因. 中国医药指南. 2012(18)
[5]不同棉花间作模式中作物养分吸收和利用对间作优势的贡献[J]. 党小燕,刘建国,帕尼古丽,王江丽,危常州,李隆. 中国生态农业学报. 2012(05)
[6]Transgenic Crops:An Option for Future Agriculture[J]. Wei-Cai Yang Issue Editor Institute of Genetics and Developmental Biology Chinese Academy of Sciences China Jianmin Wan Issue Editor Institute of Crop Science Chinese Academy of Agriculture Sciences China. Journal of Integrative Plant Biology. 2011(07)
[7]喀什地区棉花-甜瓜立体套作栽培技术研究[J]. 李俊华,翟文强,王豪杰,栾作涛,吴海波,张淳. 新疆农业科学. 2010(12)
[8]化学发光免疫分析技术及其应用研究进展[J]. 魏光伟,余永鹏,魏文康,罗胜军. 动物医学进展. 2010(03)
[9]125I标记抗人CD40 mAb 5H6在荷人卵巢癌（HO8910）BALB/c裸鼠体内分布及放射免疫显像[J]. 罗先富,章斌,马泓冰,汤琳,郑舒丹,徐耀瑜,吴翼伟,张学光. 中国免疫学杂志. 2008(06)
[10]Bland-Altman分析在临床测量方法一致性评价中的应用[J]. 陈卉. 中国卫生统计. 2007(03)
博士论文
[1]青蒿素类药物特异性单克隆抗体的制备及快速免疫检测方法的建立与应用[D]. 郭素琴.中国农业大学 2016
[2]大肠癌上调表达蛋白NPM1单克隆抗体的制备及初步应用[D]. 杨光远.吉林大学 2013
本文编号：3243334
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