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基于AFLP及UHPLC-MS/MS技术的广藿香优良种质筛选与评价

发布时间:2021-06-25 13:34
  广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.为唇形科多年生草本植物,其干燥地上部分入药,具有芳香化湿,和中止呕,发表解暑之功效,是广东道地药材之一。广藿香已被广泛应用于医药、香料及化妆品等领域,它是藿香正气口服液、藿香正气滴丸、霍胆丸等多种中成药的原材料,其挥发油还可作为化妆品、定香剂和杀虫剂等生活用品的生产配料。然而,由于城市化及经济效益低等原因,作为道地药材的“酮型”广藿香(“牌香”与传统“肇香”)已经鲜有种植,而如今广泛种植的“肇香”及其他品种的广藿香均为“醇型”广藿香,且不同产地之间存在相互引种的情况,可能会导致种质混乱的情况出现,难以从源头上保证广藿香的质量与产量。因此,对广藿香种质资源进行重新整理及评价具有重要意义,可为广藿香种质的有效保护及充分开发提供参考依据。(1)广藿香AFLP反应体系的优化及引物筛选本实验首先建立并优化广藿香扩增长度多态性(AFLP)反应体系,对酶切连接体系、连接产物稀释倍数、预扩增产物稀释倍数等关键因素进行考察,然后对AFLP引物组合(E/M组合)进行筛选,从225对引物组合中筛选出条带清晰,多态性丰富的引物组合。结果表明,... 

【文章来源】:广东药科大学广东省

【文章页数】:98 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

基于AFLP及UHPLC-MS/MS技术的广藿香优良种质筛选与评价


广藿香基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳图

模板,反应时,产物,连接条件


广东药科大学硕士研究生学位论文20图2-2不同DNA模板量对酶切反应的影响注:M:DL2000DNAMarker;1~5:DNA用量分别为100,200,300,400,500ng图2-3不同反应时间对酶切反应的影响注:M:DL2000DNAMarker;1~5:酶切时间分别为1,3,5,8,12h2.2.3连接反应时间是影响连接效果的重要因素之一,决定了能否连接充分。连接反应时间在3~16h的产物电泳结果如图2-4所示,连接产物无明显区别,说明该连接体系较好,在较短时间内就能反应完全。为了确保酶切产物与接头连接完全,选定连接条件为:16℃下连接12h。

反应时,产物


广东药科大学硕士研究生学位论文20图2-2不同DNA模板量对酶切反应的影响注:M:DL2000DNAMarker;1~5:DNA用量分别为100,200,300,400,500ng图2-3不同反应时间对酶切反应的影响注:M:DL2000DNAMarker;1~5:酶切时间分别为1,3,5,8,12h2.2.3连接反应时间是影响连接效果的重要因素之一,决定了能否连接充分。连接反应时间在3~16h的产物电泳结果如图2-4所示,连接产物无明显区别,说明该连接体系较好,在较短时间内就能反应完全。为了确保酶切产物与接头连接完全,选定连接条件为:16℃下连接12h。

【参考文献】:
期刊论文
[1]基于UPLC-LTQ-Orbitrap代谢组学技术的不同产地黄连组分比较研究[J]. 邵坚,吴样明,李诒光,陈芳,甘侠,季巧遇.  中药材. 2020(02)
[2]基于UPLC-Q-TOF-MS技术的不同品种当归代谢组学分析[J]. 荔淑楠,王引权,王富胜,樊秦,雒军,安培坤,张亚丽,李钦,彭桐.  中国实验方剂学杂志. 2020(08)
[3]基于UPLC-MS非靶向代谢组技术研究当归头与尾功效差异的生物学途径[J]. 杨杰,万斌,姚维一,龚弟鸿,彭启伦,甘露,郭步伐,丁维俊.  华西药学杂志. 2019(06)
[4]连作土壤施加竹炭对广藿香幼苗生长的影响[J]. 李敬辉,李明,李龙明,蔡淼,周界,洪彪,段书蕾.  西北农业学报. 2019(09)
[5]薏苡种质资源的AFLP遗传多样性分析[J]. 杨成龙,周明强,班秀文,李志芳,黎青,刘凡值.  分子植物育种. 2020(15)
[6]广藿香酮对COPD小鼠肺部损伤保护作用机制研究[J]. 张味娜,张明明,俞敏.  健康研究. 2019(04)
[7]广藿香醇抗幽门螺杆菌的作用及对肠道微生物的影响[J]. 伍世颖,庄惠玲,丁彧,许沛珊,魏文辉,钟远遵,邓秋华,许艺飞,黄萍.  中药新药与临床药理. 2019(08)
[8]广藿香酮对分泌性中耳炎模型豚鼠耳黏膜中TNF-α及ICAM-1的表达影响研究[J]. 曾祥悦,孙海燕,李阳阳,李翔宇.  中华中医药学刊. 2019(07)
[9]不同产地广藿香化学成分及药理作用研究进展[J]. 吴卓娜,吴卫刚,张彤,王冰.  世界科学技术-中医药现代化. 2019(06)
[10]广藿香法呢基焦磷酸合成酶基因(FPS)的克隆及生物信息学分析[J]. 张贵翔,吴友根,陈赫,于靖,杨东梅,张军锋,杨豫章.  分子植物育种. 2019(07)

博士论文
[1]广藿香种质资源分子标记、栽培生理及其品质评价[D]. 吴友根.南京农业大学 2009

硕士论文
[1]基于UPLC-QTOF/MS方法的小麦发芽过程的代谢产物分析[D]. 王丽娜.中国农业科学院 2019
[2]基于UPLC-QTof-MS的宽皮柑橘和橙果皮化学成分及代谢组学研究[D]. 邢天天.西南大学 2018
[3]广藿香醇和广藿香酮治疗急性髓性白血病的药效研究[D]. 杨雨婷.成都中医药大学 2016
[4]广藿香化感自毒作用与根际土壤微生物互作效应研究[D]. 徐岩.海南大学 2015
[5]利用组织培养技术研究广藿香的化感自毒作用[D]. 李玲梅.广东药学院 2012
[6]广藿香非挥发性成分研究[D]. 张岗.广东药学院 2007



本文编号:3249299

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