蓝光对灵芝内源生长素和有效成分积累的影响

发布时间：2022-01-08 20:45

　　论文采用HPLC,紫外分光光度法等方法探明灵芝生长发育过程中蓝光处理对生长素和有效成分（灵芝多糖和灵芝三萜酸）含量的影响。利用已经获得的灵芝基因组信息筛选生长素合成途径中相关基因和灵芝蓝光受体基因,进行相关的生物信息学分析和功能预测。采用荧光定量PCR等方法了解生长素相关基因和蓝光受体基因的时空表达情况,了解生长素对光的响应和在灵芝形态建成中的作用,为开展内源激素和光质对药用真菌生长发育作用的研究提供理论基础。蓝光对灵芝子实体生长素和三萜酸含量都有影响。在灵芝的生长发育过程中,蓝光处理灵芝子实体的千重鲜重均高于对照组。生长素的含量在菌盖形成期最高,对照组生长素的含量显著高于蓝光处理。采用HPLC对10种三萜酸含量进行分析,发现灵芝酸A是灵芝子实体内含量最高的灵芝三萜酸,3种灵芝烯酸的含量极低,7种灵芝酸的含量均在弹孢前期最高,在弹孢后期蓝光处理和对照组三萜酸含量均迅速降低。弹孢前期蓝光处理的7种灵芝酸的含量均显著高于对照组。利用KEGG网站对IAA合成途径进行预测,结果表明,IAA合成途径包含在色氨酸代谢途径中,编号为00380。灵芝编码基因序列中与色氨酸代谢途径相关的有41个,其中有... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
文献综述
    1 生长素
        1.1 生长素的发现
        1.2 生长素的生理作用和作用机制
        1.3 生长素的合成途径
        1.4 生长素的信号转导
    2 生长素在在药用植物中的应用
        2.1 促进药用植物插条发根及根的生长
        2.2 促进药用植物培养愈伤组织和不定根形成
        2.3 促进药用植物果实和花芽发育
        2.4 在药用植物其它方面的作用研究
    3 展望
    参考文献
第一章 蓝光处理灵芝子实体不同生长发育阶段生长素含量变化研究
    1 材料
        1.1 供试菌株
        1.2 试剂和仪器
    2 方法
        2.1 灵芝木段栽培法
        2.2 光质处理
        2.3 灵芝样品鲜重和干重的测定
        2.4 HPLC法检测灵芝中生长素的含量
            2.4.1 分析样品溶液的制备
            2.4.2 高效液相色谱条件
            2.4.3 IAA标准品的配制
            2.4.4 数据处理
    3 结果与分析
        3.1 灵芝子实体不同生长发育阶段鲜重和干重的积累
        3.2 IAA标准曲线的绘制
        3.3 灵芝子实体不同生长发育阶段IAA含量
    4 讨论
    参考文献
第二章 灵芝中生长素的合成途径研究
    1 方法
        1.1 灵芝生长素合成途径预测
        1.2 生长素代谢相关基因的蛋白结构域及保守基序分析
    2 结果与分析
        2.1 IAA生物合成途径的预测
        2.2 灵芝生长素代谢相关基因的生物信息分析结果
            2.2.1 吲哚色胺途径
                2.2.1.1 芳族基-L-氨基酸脱羧酶(DDC)
                2.2.1.2 单胺氧化酶(AOC1)
                2.2.1.3 醛脱氢酶(Aldh)
            2.2.2 吲哚丙酮酸途径和吲哚乙酰胺途径
                2.2.2.1 色氨酸转氨酶(Tam1)
                2.2.2.2 酰胺酶(AMI)
    3 讨论
    参考文献
第三章 灵芝生长素合成相关酶基因相对表达量研究
    1 材料、试剂及仪器
        1.1 实验材料
        1.2 实验试剂和仪器
    2 方法
        2.1 灵芝木段栽培法
        2.2 光质处理
        2.3 灵芝子实体RNA的提取
            2.3.1 RNA质量检测
            2.3.2 逆转录生成cDNA
        2.4 灵芝子实体不同发育时期cDNA的荧光定量PCR
    3 结果与分析
        3.1 不同生长发育阶段灵芝子实体总RNA提取结果
        3.2 灵芝不同生长发育阶段生长素合成关键酶基因相对表达量分析
            3.2.1 吲哚色胺途径关键酶基因相对表达量分析
            3.2.2 吲哚丙酮酸途径和吲哚乙酰胺途径关键酶基因相对表达量分析
    4 讨论
    参考文献
第四章 蓝光对灵芝子实体多糖和三萜酸含量的影响
    1 材料、试剂及仪器
        1.1 材料
        1.2 实验试剂和仪器
    2 方法
        2.1 灵芝木段栽培法
        2.2 光质处理
        2.3 灵芝干重和鲜重的测定
        2.4 灵芝多糖测定
        2.5 检测10种三萜酸含量
        2.6 数据处理与分析
    3 结果与分析
        3.1 灵芝多糖含量变化
        3.2 三萜酸总含量变化
        3.3 对10种三萜酸含量分析
    4 讨论
    参考文献
第五章 灵芝中蓝光受体的克隆及分析
    1 材料、试剂及仪器
        1.1 材料及处理
        1.2 原始数据及引物设计
        1.3 实验试剂和仪器
    2 方法
        2.1 灵芝木段栽培法
        2.2 光质处理
        2.3 灵芝wc-1和wc-2基因的序列验证
        2.4 GlWC-1和GlWC-2的蛋白结构域及系统进化分析
        2.5 不同时期蓝光处理和对照组RNA提取
        2.6 荧光定量PCR
    3 结果与分析
        3.1 蓝光处理和对照组灵芝不同生长发育阶段总RNA提取结果
        3.2 Glwc-1和Glwc-2克隆结果和核酸序列分析
        3.3 灵芝GlWC-1和GlWC-2氨基酸序列与其他真菌蓝光受体氨基酸序列比对
        3.4 GlWC-1和GlWC-2的系统进化分析
        3.5 灵芝不同生长发育阶段Glwc-1和Glwc-2相对表达量分析
    4 讨论
    参考文献
第六章 结论与展望
    1 结论
    2 展望
附录
致谢
作者简介与发表文章


【参考文献】：
期刊论文
[1]普通烟草ARF基因家族序列的鉴定与表达分析[J]. 孙亭亭,张磊,陈乐,龚达平,王大伟,陈雅琼,陈蕾,孙玉合.  植物遗传资源学报. 2016(01)
[2]柠檬F-box基因的克隆及表达分析[J]. 安振宇,张树伟,何新华,李丽淑,罗聪,黄桂香,林蔚,胡颖,董龙.  分子植物育种. 2015(11)
[3]油菜F-BOX蛋白序列特征与生物信息学分析[J]. 刘中华,王俊生,谭光轩,仇丽燕.  南方农业. 2015(33)
[4]黄瓜生长素受体同源基因CsAFB和CsTIR在拟南芥中的转化与功能表达[J]. 姚丽琴,陈哲皓,鲍林文,何露霞,王利琳.  农业生物技术学报. 2016(02)
[5]麻花秦艽休眠芽离体培养时的丛生芽发生途径研究[J]. 张延红,高素芳.  中药材. 2015(09)
[6]弱光下菊花‘清露’的激素水平及相关基因表达[J]. 韩霜,陈素梅,蒋甲福,房伟民,管志勇,陈发棣.  中国农业科学. 2015(02)
[7]不同基质与生长素处理对长白山笃斯越桔嫩枝扦插生根的影响[J]. 李悦怡,巴春影,谭智文,曹后男,宗成文.  延边大学农学学报. 2014(04)
[8]轮叶党参不定根的诱导培养[J]. 李美阳.  安徽农业科学. 2015(01)
[9]龙芽草组织培养和快速繁殖体系的建立[J]. 孙骏威,王飞娟,江琼,丁艳菲.  贵州农业科学. 2014(12)
[10]落叶松LaIAA2基因的克隆及表达分析[J]. 冯健.  辽宁林业科技. 2014(06)

硕士论文
[1]拟南芥中一个SAUR基因的功能研究[D]. 朱宇斌.浙江大学 2010



本文编号：3577252