花粉介导法获得转GFP基因玉米的农艺性状及遗传特性的分析

发布时间：2022-07-08 14:25

　　玉米（Zea mays L.）属禾本科、玉米属植物,是世界上重要的粮食作物之一,有关玉米的遗传改良研究一直是农业科学领域重要的问题,玉米的遗传改良方法也深受关注。本实验采用超声波花粉介导法获得了转GFP基因玉米,旨在考察通过该转基因方法获得材料的农艺性状及遗传稳定性,本实验主要研究内容及结果如下:1.转GFP基因玉米的获得。利用超声波辅助花粉介导转化法将带有GFP基因的质粒导入自交系‘郑58’花粉中并人工授粉,获得结实植株6株,玉米籽粒15粒,结实率为13%。经PCR检测之后,其中6株为阳性植株。以收获的15粒种子为基数,用花粉介导法所获得T1代种子的阳性率约为40%。2.对转基因玉米自交后代农艺性状的分析。T2代转基因的玉米植株的田间农艺性状的调查分析显示,在茎粗上,除了T2-6之外,其它株系同对照相比均有显著性差异;除T2-5和T2-1株系出现诸如株高和穗位高的显著差异外,T2代转基因玉米植株同非转化对照组比较,它们主要的农艺性状基本一致。3.T2代转基因玉米植株的室内考种结果显示,除了T2-4和T2-5之外,其他株系的穗长与非转化对照组相比均有显著差异;所有株系的穗粗同对照组相比... 

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
1 文献综述
    1.1 转基因玉米的研究意义
    1.2 植物转基因方法的研究
        1.2.1 基因枪轰击法
        1.2.2 根癌农杆菌介导法
        1.2.3 花粉管通道法
        1.2.4 超声波花粉介导法
    1.3 转基因植物研究中中常使用的报告基因—绿色荧光蛋白
        1.3.1 绿色荧光蛋白的生化性质以及发光机制
        1.3.2 绿色荧光蛋白的特点以及应用前景
    1.4 转基因植物中不同转化方法外源基因整合表达的特性
    1.5 本课题研究目的及意义
2 超声波花粉介导法获得转GFP基因玉米
    2.1 实验材料
        2.1.1 受体材料
        2.1.2 供体材料
        2.1.3 实验药品与试剂的配制
        2.1.4 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 大肠杆菌的培养
        2.2.2 质粒DNA的提取
        2.2.3 转化方法—超声波花粉介导法
        2.2.4 T_1代转化玉米植株的阳性材料检测
        2.2.5 玉米种子的萌发
        2.2.6 T_2代种子的获得
    2.3 结果与分析
        2.3.1 T_o代玉米转化植株结实情况统计
        2.3.2 T_1代玉米转化植株的PCR检测结果
        2.3.3 T_2代转化植株GFP观察筛选结果
    2.4 讨论
3 转GFP基因玉米自交后代农艺性状的分析
    3.1 实验材料
    3.2 实验设计
    3.3 实验方法
    3.4 结果与分析
        3.4.1 田间农艺性状的调查分析
        3.4.2 室内考种的结果
        3.4.3 T_2代转基因玉米变异植株的分析
    3.5 讨论
4 转基因玉米遗传特性的分析
    4.1 实验材料
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 实验所需试剂以及配制
        4.1.3 主要仪器和设备
    4.2 实验方法
        4.2.1 遗传规律分析
        4.2.2 转基因玉米RT-PCR的检测
        4.2.3 转基因玉米western-blot杂交检测
    4.3 结果与分析
        4.3.1 T_2代玉米植株孟德尔单基因显性遗传定律的验证
        4.3.2 转基因玉米RT-PCR的结果分析
        4.3.3 转基因玉米western-blot的结果分析
    4.4 讨论
5 结论
参考文献
在学期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]基因枪法介导大白菜小孢子转基因技术研究初报[J]. 李菲,张淑江,章时蕃,武剑,王晓武,张慧,孙日飞,张振贤.  园艺学报. 2017(01)
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[6]玉米转基因技术研究现状及发展趋势[J]. 张彦琴.  安徽农业科学. 2015(32)
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硕士论文
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[2]转BADH基因玉米与非转化受体生长、生理特性及农艺性状比较[D]. 刘晓璐.山西师范大学 2016
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[4]增强UV-B辐射对拟南芥叶绿体蛋白质组影响的研究[D]. 田雪.山西师范大学 2015
[5]花粉介导法获得转耐盐基因AhCMO玉米植株的研究[D]. 任小燕.山西大学 2013
[6]T-DNA在农杆菌介导转基因玉米中的整合模式[D]. 杨琳.四川农业大学 2012
[7]小麦成熟胚受体筛选及基因枪法转几丁质酶基因植株获得和插入位点研究[D]. 李晔.四川农业大学 2011
[8]转基因大麦的gfp基因遗传表达及整合位点结构[D]. 赵梅香.扬州大学 2007
[9]转基因大麦gfp基因在杂交后代中的表达及转基因座位结构研究[D]. 黄洁.扬州大学 2007
[10]转基因棉花材料获得及主要农艺性状变异分析[D]. 刘冬梅.中国农业科学院 2006



本文编号：3657192