AtNEK6在棉花旱盐胁迫响应中的表达分析研究

发布时间：2022-10-19 19:50

　　棉花（G.hirsutum）作为世界上主要的天然纤维来源,在70个国家种植,像其他作物一样,棉花也遭受严重的生物/非生物胁迫。虽然常规育种、诱变育种和病虫害管理措施提高了棉花的耐热性、纤维品质以及产量,但病虫害、干旱、盐渍等生物和非生物胁迫仍然严重威胁着棉花产业。不良环境（如低温、高温、干旱、盐渍等）作用于植物,将会引起植物体内发生一系列的生理代谢反应,表现为代谢和生长的不可逆性抑制,严重时甚至引起不可逆伤害,导致整个植株死亡。棉花的耐旱性、耐盐性均较粮食作物强,随着粮棉争地矛盾的日益突出,不适宜粮食作物种植的旱地、盐碱地、沿海滩涂成了棉花种植的另一个选择。AtNEK6编码一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,具有参与调控细胞周期的功能,并且与植物的生长发育和抗逆性相关。本研究通过在棉花中过表达AtNEK6,促进了棉花的生长发育并提高了其耐盐耐旱性。本研究取得的进展如下:1.通过农杆菌介导的转化方法,将AtNEK6基因转化棉花,获得T₂代转基因株系。通过qRT-PCR检测,结果表明基因在转基因棉花的根、茎、叶中均有表达;2.正常培养条件下,相较于野生型植株,转基因株系的株高... 

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
    1.1 抗逆转基因棉花研究进展
    1.2 NIMA相关激酶的研究进展
        1.2.1 NIMA相关激酶家族
        1.2.2 人类中NIMA相关激酶的研究进展
        1.2.3 植物NEK家族的进化
        1.2.4 NEKs在植物中的研究进展
    1.3 研究目的与意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 菌种和质粒
        2.1.2 植物材料
    2.2 常用试剂及仪器
        2.2.1 常用试剂及试剂盒
        2.2.2 常用仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 阳性转基因棉花筛选与鉴定
        2.3.2 CTAB法提取植物基因组DNA
        2.3.3 Southernblotting
        2.3.4 qRT-PCR检测
        2.3.5 转基因棉花表型分析
        2.3.6 根长、侧根数、鲜重和干重比较
        2.3.7 温室条件模拟耐盐耐旱性实验
        2.3.8 CAT、SOD活性和MDA含量检测
        2.3.9 叶绿素相对含量(SPAD)测定
第三章 结果与分析
    3.1 转基因阳性植株的鉴定和表达情况
    3.2 过表达AtNEK6转基因棉花的表型分析
        3.2.1 过表达AtNEK6促进了植株的生长发育
        3.2.2 细胞周期基因和生长发育基因的表达情况
    3.3 转基因棉花的耐盐耐旱性分析
        3.3.1 转基因棉花在胁迫条件下根系的表型
        3.3.2 转基因棉花的耐盐耐旱性及生理指标分析
        3.3.3 转基因棉花的叶绿素相对含量(SPAD)分析
        3.3.4 逆境胁迫相关基因在转基因棉花中的表达情况
第四章 结果讨论
    4.1 在棉花中过表达AtNEK6对植物生长发育的影响
    4.2 AtNEK6对转基因棉花幼苗的影响
    4.3 AtNEK6对植物的抗氧化能力的影响
    4.4 AtNEK6对植物光合作用的影响
    4.5 AtNEK6对植物响应胁迫的标记基因的表达的影响
第五章 全文结论
参考文献
附录
致谢
作者简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]浅述棉花的抗逆性与抗逆育种研究进展[J]. 黄云,蓝家样,陈全求,韩光明,詹先进.  棉花科学. 2015(01)
[2]棉花盐害与耐盐性的生理和分子机理研究进展[J]. 辛承松,董合忠,唐薇,温四民.  棉花学报. 2005(05)
[3]我国盐渍土资源及其综合治理[J]. 张士功,邱建军,张华.  中国农业资源与区划. 2000(01)



本文编号：3694000