云南药用野生稻高质量染色体DNA的制备

发布时间：2022-11-06 07:44

　　药用野生稻是我国3种野生稻之一,蕴含丰富的优异基因资源,但由于其CC基因组与栽培稻的AA基因组差异大,远缘杂交不亲合,不易获得后代材料,导致育种中优异基因无法利用。构建大片段基因组文库是研究及利用基因的重要方法,而提取高质量的染色体DNA是建立BIBAC等大片段基因组文库的前提,但按常规方法很难从药用野生稻中提取到Mb级的染色体DNA,需要对提取体系进行优化。本研究对取材与研磨、细胞核的分离与包埋、组蛋白的去除与DNA释放、DNA的酶解与回收等实验步骤进行优化,从药用野生稻中成功提取出1.9Mb的高质量染色体DNA,并对酶解消化体系进行了摸索,制备的染色体DNA可用于构建大片段基因组文库。 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验材料
    1.2 试验方法
        1.2.1 制备核悬液
        1.2.2 分离细胞核
        1.2.3 细胞核包埋
        1.2.4 细胞核裂解
        1.2.5 酶解
        1.2.6 电泳检测
        1.2.7 目标DNA的收集
2 结果与分析
    2.1 药用野生稻叶片细胞核的分离
    2.2 药用野生稻叶片细胞核的包埋与洗涤
    2.3 药用野生稻染色体DNA的释放与消化
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]云南药用野生稻对四种水稻主要病害的抗性鉴定[J]. 杨雅云,张敦宇,陈玲,陈越,殷富有,蒋春苗,肖素勤,柯学,余腾琼,王波,付坚,钟巧芳,陈功友,程在全.  植物病理学报. 2019(01)
[2]药用野生稻ADF基因的克隆及其抗逆性分析[J]. 李培纲,李红梅,张帅,李劲松,陈志雄,刘向东.  华北农学报. 2017(06)
[3]广西药用野生稻遗传多样性分析及SSR引物数量对遗传多样性结果的影响研究[J]. 苏龙,徐志健,乔卫华,郑晓明,梁云涛,丁膺宾,刘莎,齐兰,公婷婷,梁新霞,王君瑞,张丽芳,程云连,兰进好,杨庆文.  植物遗传资源学报. 2017(04)
[4]药用野生稻OoLEA1基因的克隆和生物信息学分析[J]. 张大燕,李红梅,李培纲,张帅,陈志雄,李亚娟.  分子植物育种. 2017(05)
[5]药用野生稻叶中花色苷合成基因的序列特点与表达差异[J]. 秦宗燕,刘石娟,包颖.  植物生理学报. 2016(08)
[6]东乡野生稻耐冷分子机制研究进展[J]. 陈明亮,陈大洲,胡兰香,吴小燕,熊焕金,肖叶青.  作物杂志. 2016(04)
[7]药用野生稻-栽培稻渗入系后代卷叶表型的遗传分析[J]. 柯杰,祝贺,覃瑞,李刚.  安徽农业科学. 2016(03)
[8]利用广西普通野生稻创新选育抗白叶枯病优质水稻三系不育系[J]. 冯锐,郭辉,秦学毅,邓国富,岑贞陆,刘百龙,张晓丽,邓小翔.  作物杂志. 2014(04)
[9]药用野生稻BIBAC文库构建过程中质粒提取方法改进[J]. 侯思名,刘凌云,殷旭东,岑晓江,王波,程在全.  西南农业学报. 2014(01)
[10]利用SRAP标记研究海南野生稻的遗传多样性与遗传分化[J]. 齐兰,王效宁,张吉贞,唐清杰,孟卫东,严小微.  植物遗传资源学报. 2013(03)

博士论文
[1]药用野生稻基因组文库构建与大片段DNA转化[D]. 何瑞锋.武汉大学 2003



本文编号：3703117