茶树倍半萜类物质代谢及其对虫害胁迫响应
发布时间：2023-10-11 23:29
萜类化合物,又称类异戊二烯,是已知最大的一类次生代谢产物,从各类生物中发现的萜类物质有超过55000种。许多植物源的萜类化合物在植物与环境的相互作用中发挥重要功能。单萜、倍半萜和少数二萜、三萜分子量较小,具有较低的蒸气压,从而能够以气态形式被植物释放,是植物种群间、植物-昆虫间的重要化学信号媒介。本论文旨在系统地分析鉴定茶树倍半萜类挥发物种类、发掘茶树倍半萜类合成相关基因、明确倍半萜类合成酶功能,进而揭示倍半萜类物质代谢对各种胁迫的响应机制。本文以茶种Camellia sinensis(L.)O.Kuntze的普洱茶变种C.sinensis var.assamica和茶变种C.sinensis var.sinensis茶树花为材料,全面解析了茶树组成性萜类挥发物;通过非生物和生物胁迫处理,分析了茶树诱导性萜类挥发物。建立了2个茶树变种的花转录组和虫害诱导茶变种的叶片组织转录组数据库,发掘了茶树萜类MVA和MEP代谢途径的关键基因,验证了其功能。分离了10个茶树萜类合成酶,通过体外表达检测了其酶活性;以拟南芥为模式植物,转基因验证了茶树萜类合成酶基因1(CsTPS1)功能。比较了茶树对咀...
【文章页数】：90 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
1.1 植物萜类次生代谢物质分类、代谢与功能
1.1.1 植物挥发性萜类成分
1.1.2 植物萜烯合成代谢途径
1.1.3 植物萜烯物质的生物学功能
1.2 茶中的萜烯及其生态学与经济学价值
1.2.1 茶树中的萜烯及其生态学功能
1.2.2 茶叶中的萜烯成分与经济学价值
1.3 茶树萜烯指数
1.4 本研究的目的与内容
1.4.1 研究目的和意义
1.4.2 研究内容
1.4.3 技术路线
第二章 茶树倍半萜挥发物释放
2.1 茶花倍半萜挥发物
2.1.1 供试材料
2.1.2 研究方法
2.1.3 仪器设备和试剂
2.1.4 结果分析
2.2 茶树受胁迫下叶片的萜烯释放
2.2.1 供试材料
2.2.2 研究方法
2.2.3 仪器设备和试剂
2.2.4 结果分析
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 虫害茶树叶片与茶花转录组分析
3.1 材料与方法
3.1.1 供试材料
3.1.2 序列测定
3.1.3 测序结果分析
3.2 结果与分析
3.2.1 虫害处理茶树叶片组织中发掘的萜烯合成相关基因
3.2.2 茶树花组织中发掘的萜烯合成相关基因
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 茶树萜烯合成关键基因发掘与功能鉴定
4.1 材料与方法
4.2 茶树萜类合成酶克隆与功能分析
4.2.1 TPS基因克隆
4.2.2 TPS活性分析
4.2.3 CSTPS1转基因验证
4.3 茶树萜烯MVA和MEP代谢途径关键基因发掘
4.3.1 茶树HMGS和HMGR基因发掘与功能分析
4.3.2 茶树DXS和DXR基因发掘与功能分析
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 茶树挥发性萜类物质代谢对不同虫害的响应
5.1 材料与方法
5.2 结果与分析
5.2.1 不同虫害对倍半萜的诱导释放
5.2.2 JAS信号对茶树萜烯代谢的调控
5.3 讨论
5.4 小结
第六章 全文结论
6.1 茶树萜烯挥发物释放
6.2 茶树萜烯合成相关基因与功能鉴定
6.3 茶树倍半萜代谢对不同虫害的响应
参考文献
附录
一、总RNA提取方法
二、CDNA合成
三、PCR与RT-PCR反应
四、DNA产物切胶回收
五、DNA连接、转化、测序
六、质粒提取
七、荧光定量PCR
八、挥发物收集与鉴定
九、原核表达及酶活反应分析
十、三萜角鲨烯合成酶基因SQS原核表达与酶活分析
十一、DXR基因功能鉴定
十二、茶树萜类合成酶进化关系构建所用植物参考基因
十三、茶树萜类合成酶活性鉴定示例
十四、CSTPS1转基因载体构建及转基因植株筛选
致谢
作者简历
本文编号：3853003
【文章页数】：90 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
1.1 植物萜类次生代谢物质分类、代谢与功能
1.1.1 植物挥发性萜类成分
1.1.2 植物萜烯合成代谢途径
1.1.3 植物萜烯物质的生物学功能
1.2 茶中的萜烯及其生态学与经济学价值
1.2.1 茶树中的萜烯及其生态学功能
1.2.2 茶叶中的萜烯成分与经济学价值
1.3 茶树萜烯指数
1.4 本研究的目的与内容
1.4.1 研究目的和意义
1.4.2 研究内容
1.4.3 技术路线
第二章 茶树倍半萜挥发物释放
2.1 茶花倍半萜挥发物
2.1.1 供试材料
2.1.2 研究方法
2.1.3 仪器设备和试剂
2.1.4 结果分析
2.2 茶树受胁迫下叶片的萜烯释放
2.2.1 供试材料
2.2.2 研究方法
2.2.3 仪器设备和试剂
2.2.4 结果分析
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 虫害茶树叶片与茶花转录组分析
3.1 材料与方法
3.1.1 供试材料
3.1.2 序列测定
3.1.3 测序结果分析
3.2 结果与分析
3.2.1 虫害处理茶树叶片组织中发掘的萜烯合成相关基因
3.2.2 茶树花组织中发掘的萜烯合成相关基因
3.3 讨论
3.4 小结
第四章 茶树萜烯合成关键基因发掘与功能鉴定
4.1 材料与方法
4.2 茶树萜类合成酶克隆与功能分析
4.2.1 TPS基因克隆
4.2.2 TPS活性分析
4.2.3 CSTPS1转基因验证
4.3 茶树萜烯MVA和MEP代谢途径关键基因发掘
4.3.1 茶树HMGS和HMGR基因发掘与功能分析
4.3.2 茶树DXS和DXR基因发掘与功能分析
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 茶树挥发性萜类物质代谢对不同虫害的响应
5.1 材料与方法
5.2 结果与分析
5.2.1 不同虫害对倍半萜的诱导释放
5.2.2 JAS信号对茶树萜烯代谢的调控
5.3 讨论
5.4 小结
第六章 全文结论
6.1 茶树萜烯挥发物释放
6.2 茶树萜烯合成相关基因与功能鉴定
6.3 茶树倍半萜代谢对不同虫害的响应
参考文献
附录
一、总RNA提取方法
二、CDNA合成
三、PCR与RT-PCR反应
四、DNA产物切胶回收
五、DNA连接、转化、测序
六、质粒提取
七、荧光定量PCR
八、挥发物收集与鉴定
九、原核表达及酶活反应分析
十、三萜角鲨烯合成酶基因SQS原核表达与酶活分析
十一、DXR基因功能鉴定
十二、茶树萜类合成酶进化关系构建所用植物参考基因
十三、茶树萜类合成酶活性鉴定示例
十四、CSTPS1转基因载体构建及转基因植株筛选
致谢
作者简历
本文编号：3853003
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/nzwlw/3853003.html
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