恩诺沙星在中华绒螯蟹模拟养殖系统中的分布及其耐药性在转录水平的研究

发布时间：2020-07-06 23:13

【摘要】：采用高效液相法测定水体、底泥、金鱼藻、中华绒螯蟹及螺蛳的肌肉和内脏等不同样品中的恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星的残留量、分布及消除规律等变化过程;比较分析了恩诺沙星在弱酸、中性及弱碱模拟养殖系统三种不同酸碱度系统中的环境行为。恩诺沙星在水体中残留量低于5μg/L;弱碱性系统底泥中残留量高达2689.52μg/kg,消除半衰期长达96d。恩诺沙星易在生物体内脏内积累,其残留量具有组织差异性。酸碱度对恩诺沙星在水体、底泥及金鱼藻中的分布及消除影响较大;对中华绒螯蟹及螺蛳等生物体的影响较小。恩诺沙星在弱酸性模拟养殖系统内各分配相中的残留量均不同程度的大于中性及弱碱性养殖系统。三种模拟养殖系统中各分配相内的药物残留量依次为:弱酸中性弱碱。利用转录组学方法分析,中华绒螯蟹经口灌恩诺沙星后肝胰腺组织获得了4263个差异表达基因,其中上调2795个差异表达基因,下调1468个差异表达基因。通过差异基因的功能注释,得到了很多药物代谢和信号转导相关的差异表达基因功能注释。注释结果表明,恩诺沙星影响中华绒螯蟹肝胰腺的多种复杂生物过程,其中最明显的能量代谢及胞外刺激应答的信号转导过程。恩诺沙星在中华绒螯蟹肝胰腺中的代谢可能是通过CYP450及谷胱甘肽转移酶等药物代谢转运蛋白参与的耗能跨膜转运及MAPK等信号转导启动的细胞应答机制完成的。利用标准质控菌株ATCC7966诱导产生对恩诺沙星耐药的嗜水气单胞菌7966QR。对耐药菌株和敏感菌株进行转录组学分析,获得差异表达基因218个,其中135个基因明显上调83个基因明显下调。研究发现嗜水气单胞杆菌对恩诺沙星耐药性的产生主要是通过影响多种生理功能如ABC转运蛋白,DNA损伤修复等,同时研究结果表明嗜水气单胞菌对恩诺沙星的耐药机制可能与控制细胞内药物蓄积的ABC转运蛋白的增加和拓扑异构酶表达量上升降低了喹诺酮类药物对DNA复制的抑制作用密切相关。
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S948

【参考文献】

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本文编号：2744276