日本沼虾α2-巨球蛋白和低密度脂蛋白相关受体-1基因的分子克隆及其功能分析
发布时间:2020-12-18 18:28
氨氮是水产养殖中最重要的环境胁迫因子之一,能够严重影响水产动物生长发育与生理健康。α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,A2M)是一种广谱性蛋白酶抑制剂,在凝血补体系统、酚氧化酶原激活系统、细胞迁移、抗环境胁迫等方面都发挥着关键调控作用。低密度脂蛋白相关受体-1基因(Low-density lipoprotein receptor-related protein,LRP1)是低密度脂蛋白受体基因家族的一员,在诱导脂蛋白的摄取、血管损伤、细胞生长等方面具有重要作用,同时可以作为活化的α2-巨球蛋白、组织纤溶酶原激活剂等多种配体的细胞信号受体。本研究以我国重要的淡水养殖虾类日本沼虾(Macrobrachium nipponense)为实验材料,采用组织切片、RACE克隆、实时荧光定量PCR、Western blot等技术,对高浓度氨氮胁迫下虾的免疫组织变化和A2M、LRP1基因进行了分子克隆和基因表达与功能检测等。主要研究结果如下:在实验室条件下,对日本沼虾进行氨氮攻毒试验显示其半致死浓度LD50(48h)为96.8mg/L。组织学分析显示,氨氮胁迫对日本...
【文章来源】:山东农业大学山东省
【文章页数】:71 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
RNA1%琼脂糖凝胶电泳图
图 3-2 RNA 1% 琼脂糖凝胶电泳图Fig. 3-2 The RNA detected by 1% agarose gel electrophoresis根据实验室高通量测序结果(孙健 2017)设计引物 A2M/LRP1-F、A2M/LR增得到基因的中间序列,通过 5’RACE 扩增获得 5’UTR(图 3-3)通过 3’R3’UTR(图 3-4),最后通过 Chroma 和 DNAMAN 8.0 等软件处理拼接后得cDNA 全序列(图 3-5、图 3-6)。
图 3-2 RNA 1% 琼脂糖凝胶电泳图Fig. 3-2 The RNA detected by 1% agarose gel electrophoresis根据实验室高通量测序结果(孙健 2017)设计引物 A2M/LRP1-F、A2M/LR增得到基因的中间序列,通过 5’RACE 扩增获得 5’UTR(图 3-3)通过 3’R3’UTR(图 3-4),最后通过 Chroma 和 DNAMAN 8.0 等软件处理拼接后得cDNA 全序列(图 3-5、图 3-6)。
【参考文献】:
期刊论文
[1]Roles of lipoprotein receptors in the entry of hepatitis C virus[J]. Jingya Lyu,Hitomi Imachi,Kensaku Fukunaga,Takuo Yoshimoto,Huanxiang Zhang,Koji Murao. World Journal of Hepatology. 2015(24)
[2]养虾池氨氮的科学认识与调控[J]. 张水波. 水产养殖. 2013(11)
[3]Sleeve gastrectomy prevents lipoprotein receptor-1 expression in aortas of obese rats[J]. Jie Bai, Yong Wang, Yuan Liu, Dong-Hua Geng, Jin-Gang Liu, Department of General Surgery, China Medical University and the affiliated Shengjing Hospital, Shenyang 110004, Liaoning Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2011(32)
硕士论文
[1]日本沼虾抗氨氮胁迫转录组与代谢组分析[D]. 孙健.山东农业大学 2017
本文编号:2924400
【文章来源】:山东农业大学山东省
【文章页数】:71 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
RNA1%琼脂糖凝胶电泳图
图 3-2 RNA 1% 琼脂糖凝胶电泳图Fig. 3-2 The RNA detected by 1% agarose gel electrophoresis根据实验室高通量测序结果(孙健 2017)设计引物 A2M/LRP1-F、A2M/LR增得到基因的中间序列,通过 5’RACE 扩增获得 5’UTR(图 3-3)通过 3’R3’UTR(图 3-4),最后通过 Chroma 和 DNAMAN 8.0 等软件处理拼接后得cDNA 全序列(图 3-5、图 3-6)。
图 3-2 RNA 1% 琼脂糖凝胶电泳图Fig. 3-2 The RNA detected by 1% agarose gel electrophoresis根据实验室高通量测序结果(孙健 2017)设计引物 A2M/LRP1-F、A2M/LR增得到基因的中间序列,通过 5’RACE 扩增获得 5’UTR(图 3-3)通过 3’R3’UTR(图 3-4),最后通过 Chroma 和 DNAMAN 8.0 等软件处理拼接后得cDNA 全序列(图 3-5、图 3-6)。
【参考文献】:
期刊论文
[1]Roles of lipoprotein receptors in the entry of hepatitis C virus[J]. Jingya Lyu,Hitomi Imachi,Kensaku Fukunaga,Takuo Yoshimoto,Huanxiang Zhang,Koji Murao. World Journal of Hepatology. 2015(24)
[2]养虾池氨氮的科学认识与调控[J]. 张水波. 水产养殖. 2013(11)
[3]Sleeve gastrectomy prevents lipoprotein receptor-1 expression in aortas of obese rats[J]. Jie Bai, Yong Wang, Yuan Liu, Dong-Hua Geng, Jin-Gang Liu, Department of General Surgery, China Medical University and the affiliated Shengjing Hospital, Shenyang 110004, Liaoning Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2011(32)
硕士论文
[1]日本沼虾抗氨氮胁迫转录组与代谢组分析[D]. 孙健.山东农业大学 2017
本文编号:2924400
本文链接:https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/2924400.html