大黄鱼Rab相关基因的分子特征及功能研究
发布时间：2021-02-20 13:20
大黄鱼（Larimichthys crocea）作为我国主要海洋养殖鱼类,随着养殖规模扩大、养殖产量增多,病害问题也日益突出,严重制约了大黄鱼产业的发展。解决病害问题的关键是提高鱼体自身免疫力,加强大黄鱼免疫机制的理论研究,有利于提升大黄鱼疾病控制与预防水平,促进水产养殖业持续健康发展。本文分析了大黄鱼小G蛋白家族中Rab5A、Rab11和Rab13三个基因的分子结构以及特征;运用荧光定量PCR技术检测了刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans）、灭活的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）和脂多糖LPS、射病毒类似物poly I:C进行免疫刺激后,不同组织mRNA水平表达变化;在大肠杆菌中进行了Rab5A基因重组表达,利用纯化的重组蛋白制备了多克隆抗体,并用Elisa方法确定最佳工作浓度及标定抗体效价,用于Western blot检测Rab5A蛋白组织表达量以及在免疫刺激后蛋白质水平表达变化。本研究还采用GST pull-down技术初步分析大黄鱼Rab5A互作蛋白,运用免疫电镜方法观察了大黄鱼不同组织/器官中Rab5A和Rab13的亚细胞定位。结...
【文章来源】：集美大学福建省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RabGTPase作用机理Fig.1-1RegulationmechanismofRabGTPase.
合了 GST 融合蛋白的 Glutathione Sepharose 4B 介对还原型谷胱甘肽（50 mM Tris-HCl，10 mM）析。检测分析 得到的蛋白质洗脱液，进行冷冻干燥浓缩，SDS-P染色后，割取目的片段用于质谱分析质谱分析NA 的提取与检测A，分析 28S 、18S 条带确认完整性（如图 2-1合成。检测吸光度 OD260 和 OD280、OD230 比值
ab5A 基因 ORF 扩增琼脂糖凝胶CR products of the ORF of Rab5A 性扩增产物；M. 2000bp DNAmarker. conserved fragment was amplified; M.22bp，包括一个 651 bp 的 OR提交 GenBank，登录号为 K列为 GACAGTGT，符合 Ko 320bp，其中 3′端包含终止密ab5A 基因的基因组序列 6281T-AG。结果与其他硬骨鱼结
【参考文献】：
期刊论文
[1]Rab蛋白在葡萄糖转运中的作用[J]. 黄薇,康雁君. 中国生物化学与分子生物学报. 2016(03)
[2]Rab11对子宫颈癌HeLa细胞生物学功能的影响[J]. 张建华,章龙珍,阚岩岩,杨春华,周敏,赵菁菁,王侠. 肿瘤研究与临床. 2015 (07)
[3]Rho小G蛋白信号通路在癌细胞生物学中的多样功能[J]. 曹雪敏,刘祎,勿呢尔,周玲,范丽菲. 中国细胞生物学学报. 2015(06)
[4]大黄鱼[J]. 智己. 福建乡土. 2015(02)
[5]官井洋大黄鱼资源的兴衰演变及其修复对策[J]. 张其永,洪万树. 海洋渔业. 2015(02)
[6]动植物Rab蛋白的同源性:植物中药系统发生和分子系统发生药理学研究的一个分子例证[J]. 冯前进,刘润兰. 山西中医学院学报. 2014(05)
[7]快长、耐低温大黄鱼新品种东海1号的选育[J]. 苗亮,李明云,陈炯,张浩. 农业生物技术学报. 2014(10)
[8]植物Rab蛋白的分类与功能[J]. 王芳,刘超. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(08)
[9]Rho小G蛋白相关激酶的结构与功能[J]. 闫慧娟,勿呢尔,莫日根,范丽菲. 中国细胞生物学学报. 2014(07)
[10]小G蛋白Ran对胰腺癌细胞增殖和凋亡的调控[J]. 邓林,卢瑗瑗,孙艺,郭学刚. 现代生物医学进展. 2013(04)
硕士论文
[1]Rab6蛋白在果蝇S2细胞抗病毒吞噬中的作用[D]. 唐文.浙江大学 2012
本文编号：3042829
【文章来源】：集美大学福建省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RabGTPase作用机理Fig.1-1RegulationmechanismofRabGTPase.
合了 GST 融合蛋白的 Glutathione Sepharose 4B 介对还原型谷胱甘肽（50 mM Tris-HCl，10 mM）析。检测分析 得到的蛋白质洗脱液，进行冷冻干燥浓缩，SDS-P染色后，割取目的片段用于质谱分析质谱分析NA 的提取与检测A，分析 28S 、18S 条带确认完整性（如图 2-1合成。检测吸光度 OD260 和 OD280、OD230 比值
ab5A 基因 ORF 扩增琼脂糖凝胶CR products of the ORF of Rab5A 性扩增产物；M. 2000bp DNAmarker. conserved fragment was amplified; M.22bp，包括一个 651 bp 的 OR提交 GenBank，登录号为 K列为 GACAGTGT，符合 Ko 320bp，其中 3′端包含终止密ab5A 基因的基因组序列 6281T-AG。结果与其他硬骨鱼结
【参考文献】：
期刊论文
[1]Rab蛋白在葡萄糖转运中的作用[J]. 黄薇,康雁君. 中国生物化学与分子生物学报. 2016(03)
[2]Rab11对子宫颈癌HeLa细胞生物学功能的影响[J]. 张建华,章龙珍,阚岩岩,杨春华,周敏,赵菁菁,王侠. 肿瘤研究与临床. 2015 (07)
[3]Rho小G蛋白信号通路在癌细胞生物学中的多样功能[J]. 曹雪敏,刘祎,勿呢尔,周玲,范丽菲. 中国细胞生物学学报. 2015(06)
[4]大黄鱼[J]. 智己. 福建乡土. 2015(02)
[5]官井洋大黄鱼资源的兴衰演变及其修复对策[J]. 张其永,洪万树. 海洋渔业. 2015(02)
[6]动植物Rab蛋白的同源性:植物中药系统发生和分子系统发生药理学研究的一个分子例证[J]. 冯前进,刘润兰. 山西中医学院学报. 2014(05)
[7]快长、耐低温大黄鱼新品种东海1号的选育[J]. 苗亮,李明云,陈炯,张浩. 农业生物技术学报. 2014(10)
[8]植物Rab蛋白的分类与功能[J]. 王芳,刘超. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(08)
[9]Rho小G蛋白相关激酶的结构与功能[J]. 闫慧娟,勿呢尔,莫日根,范丽菲. 中国细胞生物学学报. 2014(07)
[10]小G蛋白Ran对胰腺癌细胞增殖和凋亡的调控[J]. 邓林,卢瑗瑗,孙艺,郭学刚. 现代生物医学进展. 2013(04)
硕士论文
[1]Rab6蛋白在果蝇S2细胞抗病毒吞噬中的作用[D]. 唐文.浙江大学 2012
本文编号：3042829
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/3042829.html
