红鳍东方鲀amhrⅡ和amh基因的表达研究及性腺转录组的初步研究
发布时间：2021-04-18 11:19
抗苗勒氏管激素（anti-müllerian hormone,AMH）是一种糖蛋白激素,属于β-转化生长因子（TGF-β）超家族。Amh基因能够在雄性哺乳动物性腺分化期,抑制缪勒氏管的形成,从而抑制雌性生殖器官的发育。它作为一个重要的性别分化因子,能够调节生殖细胞的发育及分化。抗苗勒氏管激素二型受体（anti-müllerian hormone type II receptor,AMHRII）也是转化生长因子β受体超家族的成员,它与配体AMH结合后,通过细胞内的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域起作用。为了研究amh和amhrII基因在红鳍东方鲀各组织和不同发育时期的表达情况,进而研究amh和amhrII基因在红鳍东方鲀性别分化和性腺发育等过程中的作用。本实验利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术分析amh和amhrII基因在红鳍东方鲀成鱼的肾脏、脑、心脏、脾脏、肝脏、精巢和卵巢等不同组织,以及23、30、40、60、80日龄及2龄和3龄,7个发育时期个体水平上的表达情况。结果显示:红鳍东方鲀amh基因在脾脏中的表达量最高,其次是肾脏、肝脏和精巢,在卵巢和脑中的表达量较低,并且精巢...
【文章来源】：大连海洋大学辽宁省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基于RNA-Seq技术的研究内容Fig1-1ThepipelineofRNA-Seqresearch
2.3.1 红鳍东方鲀幼鱼性别鉴定采用苯酚—氯仿抽提的方法提取不同发育时期幼鱼（23、30、40、60、80日龄）肌肉组织的基因组，用1%琼脂糖凝胶电泳检测其质量（图2-1）。以基因组DNA为模板，做PCR扩增反应，将含有目的基因片段的PCR产物送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。根据测序结果的峰图，鉴别幼鱼的雌雄，雄性个体SNP位点呈现的是套峰（杂合子），而雌性个体是单峰（纯合子），结果如图2-2所示。图2-1：红鳍东方鲀幼鱼肌肉组织基因组1%琼脂糖电泳图（M：DL2000，1~8：部分幼鱼的基因组）Fig2-1 The agarose gels electrophoresis results for the genome DNA of young Fugu rubripes muscle (M: DL2000; 1~8:DNA of young Fugu rubripes)图2-2：红鳍东方鲀幼鱼PCR产物测序峰图（雄性杂合子，雌性纯合子）Fig2-1 The PCR product sequencing peak figures of young Fugu rubripes (Males are heterozygous, females arehomozygous)
用1%琼脂糖凝胶电泳检测其质量（图2-1）。以基因组DNA为模板，做PCR扩增反应，将含有目的基因片段的PCR产物送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。根据测序结果的峰图，鉴别幼鱼的雌雄，雄性个体SNP位点呈现的是套峰（杂合子），而雌性个体是单峰（纯合子），结果如图2-2所示。图2-1：红鳍东方鲀幼鱼肌肉组织基因组1%琼脂糖电泳图（M：DL2000，1~8：部分幼鱼的基因组）Fig2-1 The agarose gels electrophoresis results for the genome DNA of young Fugu rubripes muscle (M: DL2000; 1~8:DNA of young Fugu rubripes)图2-2：红鳍东方鲀幼鱼PCR产物测序峰图（雄性杂合子，雌性纯合子）Fig2-1 The PCR product sequencing peak figures of young Fugu rubripes (Males are heterozygous, females arehomozygous)
【参考文献】：
期刊论文
[1]斑马鱼CYP11a1基因在不同性腺发育时期的表达[J]. 陈孝红,仇雪梅,郝薇薇,王秀利. 大连海洋大学学报. 2015(01)
[2]低温诱导红鳍东方鲀雄性化及性腺分化的组织学观察[J]. 周贺,李佳奇,马海艳,李雅娟,姜志强,李霞,徐雯,江振华. 大连海洋大学学报. 2015(01)
[3]Foxn4:A multi-faceted transcriptional regulator of cell fates in vertebrate development[J]. XIANG MengQing,LI ShengGuo. Science China（Life Sciences）. 2013(11)
[4]半滑舌鳎抗缪勒氏管激素（AMH）基因的克隆及组织表达分析[J]. 刘姗姗,孙冰,梁卓,张静,陈松林. 中国水产科学. 2013(01)
[5]PCR引物设计方法综述[J]. 尤超,赵大球,梁乘榜,周春华. 现代农业科技. 2011(17)
[6]实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J]. 陈旭,齐凤坤,康立功,李景富. 东北农业大学学报. 2010(08)
[7]鱼类性别决定与分化相关基因研究进展[J]. 文爱韵,尤锋,徐永立,张培军. 海洋科学. 2008(01)
[8]鱼类生长抑素及其受体的研究进展[J]. 叶星,李文笙,林浩然. 水产学报. 2007(02)
[9]黄颡鱼Sox9基因的分离及分析[J]. 俞菊华,李建林,曹丽萍,吴婷婷,杨弘. 农业生物技术学报. 2005(05)
[10]鲤鱼中Sox9b基因的克隆和表达[J]. 杜启艳,常重杰,王凤羽,华慧颖. 实验生物学报. 2005(05)
硕士论文
[1]Amhy/Amh及其受体AmhrⅡ对尼罗罗非鱼雄性性别的决定作用[D]. 赵九娥.西南大学 2015
[2]基于RNA-Seq技术的红鳍东方鲀鳃和鳔转录组的初步研究[D]. 崔军.大连海洋大学 2013
[3]尼罗罗非鱼性腺发育过程的转录组学研究及Fox家族生物信息学分析[D]. 袁静.西南大学 2013
[4]彭泽鲫amh、cyp19a1a和dax1的克隆及甲基睾丸酮对其在幼鱼中的表达影响[D]. 李蒙.西北农林科技大学 2013
[5]猪CART和AgRP基因启动子的克隆与活性分析[D]. 王涛.华南理工大学 2011
[6]若干大黄鱼性腺发育相关基因的克隆与表达[D]. 周鹏.集美大学 2009
本文编号：3145384
【文章来源】：大连海洋大学辽宁省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基于RNA-Seq技术的研究内容Fig1-1ThepipelineofRNA-Seqresearch
2.3.1 红鳍东方鲀幼鱼性别鉴定采用苯酚—氯仿抽提的方法提取不同发育时期幼鱼（23、30、40、60、80日龄）肌肉组织的基因组，用1%琼脂糖凝胶电泳检测其质量（图2-1）。以基因组DNA为模板，做PCR扩增反应，将含有目的基因片段的PCR产物送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。根据测序结果的峰图，鉴别幼鱼的雌雄，雄性个体SNP位点呈现的是套峰（杂合子），而雌性个体是单峰（纯合子），结果如图2-2所示。图2-1：红鳍东方鲀幼鱼肌肉组织基因组1%琼脂糖电泳图（M：DL2000，1~8：部分幼鱼的基因组）Fig2-1 The agarose gels electrophoresis results for the genome DNA of young Fugu rubripes muscle (M: DL2000; 1~8:DNA of young Fugu rubripes)图2-2：红鳍东方鲀幼鱼PCR产物测序峰图（雄性杂合子，雌性纯合子）Fig2-1 The PCR product sequencing peak figures of young Fugu rubripes (Males are heterozygous, females arehomozygous)
用1%琼脂糖凝胶电泳检测其质量（图2-1）。以基因组DNA为模板，做PCR扩增反应，将含有目的基因片段的PCR产物送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。根据测序结果的峰图，鉴别幼鱼的雌雄，雄性个体SNP位点呈现的是套峰（杂合子），而雌性个体是单峰（纯合子），结果如图2-2所示。图2-1：红鳍东方鲀幼鱼肌肉组织基因组1%琼脂糖电泳图（M：DL2000，1~8：部分幼鱼的基因组）Fig2-1 The agarose gels electrophoresis results for the genome DNA of young Fugu rubripes muscle (M: DL2000; 1~8:DNA of young Fugu rubripes)图2-2：红鳍东方鲀幼鱼PCR产物测序峰图（雄性杂合子，雌性纯合子）Fig2-1 The PCR product sequencing peak figures of young Fugu rubripes (Males are heterozygous, females arehomozygous)
【参考文献】：
期刊论文
[1]斑马鱼CYP11a1基因在不同性腺发育时期的表达[J]. 陈孝红,仇雪梅,郝薇薇,王秀利. 大连海洋大学学报. 2015(01)
[2]低温诱导红鳍东方鲀雄性化及性腺分化的组织学观察[J]. 周贺,李佳奇,马海艳,李雅娟,姜志强,李霞,徐雯,江振华. 大连海洋大学学报. 2015(01)
[3]Foxn4:A multi-faceted transcriptional regulator of cell fates in vertebrate development[J]. XIANG MengQing,LI ShengGuo. Science China（Life Sciences）. 2013(11)
[4]半滑舌鳎抗缪勒氏管激素（AMH）基因的克隆及组织表达分析[J]. 刘姗姗,孙冰,梁卓,张静,陈松林. 中国水产科学. 2013(01)
[5]PCR引物设计方法综述[J]. 尤超,赵大球,梁乘榜,周春华. 现代农业科技. 2011(17)
[6]实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J]. 陈旭,齐凤坤,康立功,李景富. 东北农业大学学报. 2010(08)
[7]鱼类性别决定与分化相关基因研究进展[J]. 文爱韵,尤锋,徐永立,张培军. 海洋科学. 2008(01)
[8]鱼类生长抑素及其受体的研究进展[J]. 叶星,李文笙,林浩然. 水产学报. 2007(02)
[9]黄颡鱼Sox9基因的分离及分析[J]. 俞菊华,李建林,曹丽萍,吴婷婷,杨弘. 农业生物技术学报. 2005(05)
[10]鲤鱼中Sox9b基因的克隆和表达[J]. 杜启艳,常重杰,王凤羽,华慧颖. 实验生物学报. 2005(05)
硕士论文
[1]Amhy/Amh及其受体AmhrⅡ对尼罗罗非鱼雄性性别的决定作用[D]. 赵九娥.西南大学 2015
[2]基于RNA-Seq技术的红鳍东方鲀鳃和鳔转录组的初步研究[D]. 崔军.大连海洋大学 2013
[3]尼罗罗非鱼性腺发育过程的转录组学研究及Fox家族生物信息学分析[D]. 袁静.西南大学 2013
[4]彭泽鲫amh、cyp19a1a和dax1的克隆及甲基睾丸酮对其在幼鱼中的表达影响[D]. 李蒙.西北农林科技大学 2013
[5]猪CART和AgRP基因启动子的克隆与活性分析[D]. 王涛.华南理工大学 2011
[6]若干大黄鱼性腺发育相关基因的克隆与表达[D]. 周鹏.集美大学 2009
本文编号：3145384
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