鳙对茜素络合物标记的应激响应及其标记放流效果的研究
发布时间：2021-04-25 19:34
近年来,由于城市河流污染加重,水利设施的过度兴建,违法捕鱼日益严重等原因导致鱼类资源大幅度减少,为了恢复生态环境与鱼类资源量,增殖放流活动日渐重要。放流效果的监测与评估需要有效的回捕数量,而放流鱼类的回捕率与标记方法的选择密切相关。茜素络合物（alizarin complexone,ALC）是一种可用于鱼类人工增殖放流的荧光标记物质。该物质对于大规模的人工增殖放流活动,有价格低廉、标记存留时间长等优点,为放流效果的评估提供了相对简便和廉价的检测手段。但一定浓度的茜素络合物浸泡标记,对鱼体有一定毒性,浓度越大,死亡率通常也会更高,且鱼体对ALC的耐受性存在种间差异和个体大小差异,因此,本研究选用不同的标记条件对鳙进行标记,根据ALC对鱼类可能产生的应激响应及标记效果,确定较适宜的标记条件,进行大规模标记放流,并初步评估灞河城市段流域的增殖放流的效果。主要结果如下:1、茜素络合物适宜作为鳙荧光标记的药物使用,根据荧光标记效果及其应激反应结果,发现对鳙进行荧光标记较适宜的浸泡浓度是100mg/L,浸泡时间是48h。2、通过对比不同荧光下不同耳石的标记效果,发现微耳石是检测茜素络合物对鳙荧光标...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 鳙的生物学特性与其研究进展
1.1.1 鳙的生物学特征
1.1.2 黄河流域四大家鱼的资源现状
1.2 增殖放流
1.2.1 增殖放流简介
1.2.2 增殖放流的标记方法
1.3 茜素络合物
1.4 生物标志物
1.4.1 抗氧化指标
1.4.2 谷胱甘肽硫转移酶（GST）
1.4.3 CYP1A
1.4.4 应激蛋白
1.4.5 谷丙转氨酶（GPT/ALT）、谷草转氨酶（GOT/AST）
1.5 研究的目的与意义
第二章 茜素络合物对鳙耳石的标记效果
2.1 引言
2.2 试验材料与方法
2.2.1 试验对象
2.2.2 试验试剂与仪器
2.2.3 浸泡试验及采样
2.2.4 耳石的摘取与观察
2.2.5 数据分析
2.3 试验结果与分析
2.3.1 荧光标记效果的等级界定
2.3.2 茜素络合物的浸泡浓度和鳙的浸泡密度的优化及用于荧光检测的耳石类型的确定
2.3.3 茜素络合物的较适浸泡时间的优化
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 茜素络合物标记对鳙应激相关指标的影响
3.1 引言
3.2 试验材料与方法
3.2.1 试验对象
3.2.2 试验试剂与仪器
3.2.3 暴露试验与采样
3.2.4 总RNA的提取与反转录
3.2.5 引物设计
3.2.6 引物PCR检测
3.2.7 实时定量PCR
3.2.8 抗氧化酶、GPT、GOT等酶活测定
3.2.9 组织样本HE染色
3.2.10 数据分析
3.3 试验结果与分析
3.3.1 茜素络合物标记对鳙体长体重的影响
3.3.2 茜素络合物标记对鳙CAT酶活力的影响
3.3.3 茜素络合物标记对鳙Gpx酶活力的影响
3.3.4 茜素络合物标记对鳙SOD酶活力的影响
3.3.5 茜素络合物标记对鳙H2O2 含量的影响
3.3.6 茜素络合物标记对鳙MDA含量的影响
3.3.7 茜素络合物标记对鳙GST酶活力的影响
3.3.8 茜素络合物标记对鳙GPT、GOT酶活力的影响
3.3.9 茜素络合物标记对鳙肝脏中应激相关基因表达的影响
3.3.10 茜素络合物标记对鳙肌肉中应激相关基因表达的影响
3.3.11 茜素络合物对鳙肝脏组织学的影响
3.3.12 茜素络合物对鳙微耳石标记的影响
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 灞河城市段流域鳙增殖放流的初步评价
4.1 引言
4.2 试验材料与方法
4.2.1 试验对象
4.2.2 试验试剂与仪器
4.2.3 放流前鳙的耳石标记效果与生长情况跟踪监测检测
4.2.4 放流地点的选择
4.2.5 回捕时间及所使用网具
4.2.6 耳石的摘取与观察
4.2.7 肥满度及每日相对增长率
4.2.8 数据分析
4.3 结果
4.3.1 放流情况
4.3.2 鳙放流回捕的耳石标记情况
4.3.3 鳙放流回捕的生长情况
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 结论
5.1 主要结论
5.2 创新点
5.3 展望
参考文献
附录
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]茜素络合物对鲤仔鱼耳石标记特征研究[J]. 邱晨,姜涛,陈修报,刘洪波,杨健. 水产学报. 2018(11)
[2]胶南近海金乌贼生长特性、资源分布及增殖放流效果初步评价[J]. 牛超,张秀梅,丁鹏伟,单斌斌. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2017(07)
[3]茜素络合物对半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）苗种耳石的染色标记效果[J]. 徐永江,柳学周,史宝,翟介明. 渔业科学进展. 2016(06)
[4]抗氧化系统在脂肪分化中的作用研究新进展[J]. 孙全贵,王钊,张洁舲,海春旭,王欣. 现代生物医学进展. 2015(24)
[5]滇池放流鲢鳙鱼生长情况跟踪[J]. 张丽媛,安莉,杨剑虹,肖勇. 农业与技术. 2015(11)
[6]茜素络合物对唐鱼耳石标记效果以及生长和存活率的影响[J]. 王正鲲,赵天,林小涛,许忠能,孙军,刘明中. 生态学杂志. 2015(01)
[7]长江三峡大坝—葛洲坝江段经济鱼类增殖放流效果初步评价[J]. 王军红,姜伟,唐锡良,黄涛,陈磊,高勇. 淡水渔业. 2014(06)
[8]蝇蛆抗菌肽对鳙鱼生长性能的影响[J]. 丘继新,刘邦辉,方彰胜,谢骏,王广军,余德光. 河北渔业. 2014(08)
[9]基于微卫星标记对长江中上游胭脂鱼增殖放流效果的评估[J]. 成为为,汪登强,危起伟,王成友,杜浩,吴金明,李雷. 中国水产科学. 2014(03)
[10]甲壳类生物增殖放流标志技术研究进展[J]. 高焕,阎斌伦,赖晓芳,蔡生力. 海洋湖沼通报. 2014(01)
博士论文
[1]渔业增殖放流及开发策略优化[D]. 徐海龙.上海海洋大学 2015
[2]圆口铜鱼应激生理机制及缓解策略研究[D]. 赵建华.华中农业大学 2014
硕士论文
[1]铜、镉及其联合暴露对稀有鮈鲫氧化应激和细胞凋亡的影响[D]. 余秋果.西北农林科技大学 2017
[2]双酚A对稀有鮈鲫氧化应激及精巢组织细胞连接损伤的研究[D]. 陶诗雨.西北农林科技大学 2017
[3]茜素红S对中华倒刺鲃幼鱼的染色效果以及对其氧化应激响应[D]. 霍来江.华中农业大学 2015
[4]山东沿海主要增殖放流种类摄食习性、回捕率及放流效益分析[D]. 谢周全.上海海洋大学 2015
[5]不同蛋白源饲料对团头鲂生长、消化、抗应激及基因表达的影响[D]. 邓伟.华中农业大学 2014
[6]山东半岛南部海蜇增殖放流效果评价[D]. 张金浩.烟台大学 2013
[7]生物絮团作为鳙饵料的研究与应用[D]. 李朝兵.上海海洋大学 2012
[8]荧光标记斑马鱼稚鱼耳石的效果及其对抗氧化酶活力的影响[D]. 许莉佳.西南大学 2012
[9]褐牙鲆标志技术与增殖放流试验研究[D]. 刘奇.中国海洋大学 2009
本文编号：3159967
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 鳙的生物学特性与其研究进展
1.1.1 鳙的生物学特征
1.1.2 黄河流域四大家鱼的资源现状
1.2 增殖放流
1.2.1 增殖放流简介
1.2.2 增殖放流的标记方法
1.3 茜素络合物
1.4 生物标志物
1.4.1 抗氧化指标
1.4.2 谷胱甘肽硫转移酶（GST）
1.4.3 CYP1A
1.4.4 应激蛋白
1.4.5 谷丙转氨酶（GPT/ALT）、谷草转氨酶（GOT/AST）
1.5 研究的目的与意义
第二章 茜素络合物对鳙耳石的标记效果
2.1 引言
2.2 试验材料与方法
2.2.1 试验对象
2.2.2 试验试剂与仪器
2.2.3 浸泡试验及采样
2.2.4 耳石的摘取与观察
2.2.5 数据分析
2.3 试验结果与分析
2.3.1 荧光标记效果的等级界定
2.3.2 茜素络合物的浸泡浓度和鳙的浸泡密度的优化及用于荧光检测的耳石类型的确定
2.3.3 茜素络合物的较适浸泡时间的优化
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 茜素络合物标记对鳙应激相关指标的影响
3.1 引言
3.2 试验材料与方法
3.2.1 试验对象
3.2.2 试验试剂与仪器
3.2.3 暴露试验与采样
3.2.4 总RNA的提取与反转录
3.2.5 引物设计
3.2.6 引物PCR检测
3.2.7 实时定量PCR
3.2.8 抗氧化酶、GPT、GOT等酶活测定
3.2.9 组织样本HE染色
3.2.10 数据分析
3.3 试验结果与分析
3.3.1 茜素络合物标记对鳙体长体重的影响
3.3.2 茜素络合物标记对鳙CAT酶活力的影响
3.3.3 茜素络合物标记对鳙Gpx酶活力的影响
3.3.4 茜素络合物标记对鳙SOD酶活力的影响
3.3.5 茜素络合物标记对鳙H2O2 含量的影响
3.3.6 茜素络合物标记对鳙MDA含量的影响
3.3.7 茜素络合物标记对鳙GST酶活力的影响
3.3.8 茜素络合物标记对鳙GPT、GOT酶活力的影响
3.3.9 茜素络合物标记对鳙肝脏中应激相关基因表达的影响
3.3.10 茜素络合物标记对鳙肌肉中应激相关基因表达的影响
3.3.11 茜素络合物对鳙肝脏组织学的影响
3.3.12 茜素络合物对鳙微耳石标记的影响
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 灞河城市段流域鳙增殖放流的初步评价
4.1 引言
4.2 试验材料与方法
4.2.1 试验对象
4.2.2 试验试剂与仪器
4.2.3 放流前鳙的耳石标记效果与生长情况跟踪监测检测
4.2.4 放流地点的选择
4.2.5 回捕时间及所使用网具
4.2.6 耳石的摘取与观察
4.2.7 肥满度及每日相对增长率
4.2.8 数据分析
4.3 结果
4.3.1 放流情况
4.3.2 鳙放流回捕的耳石标记情况
4.3.3 鳙放流回捕的生长情况
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 结论
5.1 主要结论
5.2 创新点
5.3 展望
参考文献
附录
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]茜素络合物对鲤仔鱼耳石标记特征研究[J]. 邱晨,姜涛,陈修报,刘洪波,杨健. 水产学报. 2018(11)
[2]胶南近海金乌贼生长特性、资源分布及增殖放流效果初步评价[J]. 牛超,张秀梅,丁鹏伟,单斌斌. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2017(07)
[3]茜素络合物对半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）苗种耳石的染色标记效果[J]. 徐永江,柳学周,史宝,翟介明. 渔业科学进展. 2016(06)
[4]抗氧化系统在脂肪分化中的作用研究新进展[J]. 孙全贵,王钊,张洁舲,海春旭,王欣. 现代生物医学进展. 2015(24)
[5]滇池放流鲢鳙鱼生长情况跟踪[J]. 张丽媛,安莉,杨剑虹,肖勇. 农业与技术. 2015(11)
[6]茜素络合物对唐鱼耳石标记效果以及生长和存活率的影响[J]. 王正鲲,赵天,林小涛,许忠能,孙军,刘明中. 生态学杂志. 2015(01)
[7]长江三峡大坝—葛洲坝江段经济鱼类增殖放流效果初步评价[J]. 王军红,姜伟,唐锡良,黄涛,陈磊,高勇. 淡水渔业. 2014(06)
[8]蝇蛆抗菌肽对鳙鱼生长性能的影响[J]. 丘继新,刘邦辉,方彰胜,谢骏,王广军,余德光. 河北渔业. 2014(08)
[9]基于微卫星标记对长江中上游胭脂鱼增殖放流效果的评估[J]. 成为为,汪登强,危起伟,王成友,杜浩,吴金明,李雷. 中国水产科学. 2014(03)
[10]甲壳类生物增殖放流标志技术研究进展[J]. 高焕,阎斌伦,赖晓芳,蔡生力. 海洋湖沼通报. 2014(01)
博士论文
[1]渔业增殖放流及开发策略优化[D]. 徐海龙.上海海洋大学 2015
[2]圆口铜鱼应激生理机制及缓解策略研究[D]. 赵建华.华中农业大学 2014
硕士论文
[1]铜、镉及其联合暴露对稀有鮈鲫氧化应激和细胞凋亡的影响[D]. 余秋果.西北农林科技大学 2017
[2]双酚A对稀有鮈鲫氧化应激及精巢组织细胞连接损伤的研究[D]. 陶诗雨.西北农林科技大学 2017
[3]茜素红S对中华倒刺鲃幼鱼的染色效果以及对其氧化应激响应[D]. 霍来江.华中农业大学 2015
[4]山东沿海主要增殖放流种类摄食习性、回捕率及放流效益分析[D]. 谢周全.上海海洋大学 2015
[5]不同蛋白源饲料对团头鲂生长、消化、抗应激及基因表达的影响[D]. 邓伟.华中农业大学 2014
[6]山东半岛南部海蜇增殖放流效果评价[D]. 张金浩.烟台大学 2013
[7]生物絮团作为鳙饵料的研究与应用[D]. 李朝兵.上海海洋大学 2012
[8]荧光标记斑马鱼稚鱼耳石的效果及其对抗氧化酶活力的影响[D]. 许莉佳.西南大学 2012
[9]褐牙鲆标志技术与增殖放流试验研究[D]. 刘奇.中国海洋大学 2009
本文编号：3159967
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