自制环保酵素对水产病原菌的抑制效果及其发酵菌株的分离鉴定

发布时间：2021-09-07 02:22

　　为探讨自制环保酵素对水产病原微生物的抑制作用,该研究对其发酵菌株进行了分离。通过比浊法和平板划线法,确定自制环保酵素对水产病原微生物坎氏弧菌SP-1 （Vibrio campbellii SP-1）、哈维氏弧菌SP-1 （V. harveyi SP-1）、轮虫弧菌SP-1 （V. rotiferianus SP-1）和嗜水气单胞菌245 （Aeromonas hydrophila）的最低抑制浓度分别是体积分数是体积分数为11.5%、11%、6.2%和11%,最小杀菌浓度分别是体积分数为16%、16%、16%和12%。攻毒保护试验表明,自制环保酵素无菌上清液可使嗜水气单胞菌对斑马鱼（Danio rerio）的致死率降低（90.5±6.49）%。pH、温度、蛋白酶敏感性试验显示自制环保酵素的主要抗菌活性物质为酸性物质,对加热和蛋白酶处理稳定。进一步从环保酵素中分离主要发酵菌株,通过ITS序列分析鉴定为库德毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）。研究结果可为自制环保酵素在水产养殖中对抗细菌性疾病的应用提供理论基础。 

【文章来源】：南方水产科学. 2020,16(06)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

环保酵素无菌上清液对水产病原菌的生长抑制作用

空白对照组斑马鱼在试验期间死亡率为0。嗜水气单胞菌245对斑马鱼的致死率较高，试验鱼用1×109 CFU·m L-1的嗜水气单胞菌浸泡攻毒12 h，换水移除病原菌后24 h内全部死亡(图2)。使用8%自制酵素药浴30 min能够显著降低嗜水气单胞菌攻毒斑马鱼的死亡率[(9.5±6.49)%]。与攻毒组相比，酵素药浴使嗜水气单胞菌对斑马鱼的致死率显著降低了[(90.5±6.49)%,P<0.01]。2.4 自制环保酵素的抗菌活性成分敏感性

为分析自制酵素中的有效作用物质，本研究考察了酵素在不同p H、温度下，以及在蛋白酶处理后抑菌效果的变化(图3)。在不同温度处理下(图3-a)，酵素对4种病原菌的抑制率无显著变化(P>0.05)，表明抑菌物质的热稳定性高。蛋白酶处理未影响酵素对4种病原菌的抑菌率(图3-b)，表明酵素中未含有抑制4种指示菌的蛋白质或肽类物质。将p H从酵素的原始p H (4.0)调节至接近中性的过程中，抑菌率逐渐下降(图3-c)；当p H为8时，酵素对哈维氏弧菌SP-1和嗜水气单胞菌245完全失去抑菌活性，但对轮虫弧菌SP-1和坎氏弧菌SP-1仍有部分抑菌活性。结果表明自制酵素对水产病原菌的抑制作用存在低p H依赖性，抑菌活性成分主要为酸性物质或在酸性条件下发挥作用。2.5 环保酵素中发酵菌株的分离和鉴定

【参考文献】：
期刊论文
[1]硫酸安普霉素对嗜水气单胞菌体外抑菌和体内抗感染研究[J]. 孙智武,黄燕华,曹俊明,王国霞,陈冰,莫文艳,周婷婷,刘群芳.  淡水渔业. 2012(05)
[2]半滑舌鳎病原菌轮虫弧菌（Vibrio rotiferianus）的分离与鉴定[J]. 陈政强,姚志贤,林茂,常建波.  生物技术通报. 2012(06)
[3]红茶菌发酵液抑菌活性研究[J]. 张虎成,范海涛,杨国伟,王晓杰,李小瑞,王亚萍,王孟君.  安徽农业科学. 2012(09)
[4]酵素菌技术主养花鲢示范基地效果初报[J]. 王涛,王安华.  渔业致富指南. 2007(15)
[5]应用酵素菌技术实现健康生态养虾[J]. 杨涛.  渔业致富指南. 2007(13)
[6]酵素菌生物有机鱼肥在水产养殖上的应用研究[J]. 杨涛,徐维烈.  河北渔业. 2007(01)
[7]弧菌属细菌及其所致海水养殖动物疾病[J]. 吴后波,潘金培.  中国水产科学. 2001(01)
[8]山东近海主要养殖动物的弧菌检测与病害防治的研究[J]. 陈梅,王奎旗,徐怀恕.  齐鲁渔业. 2000(06)

博士论文
[1]红茶菌优势微生物的分离、鉴定及抗菌机理的研究[D]. 蒋立文.湖南农业大学 2007



本文编号：3388665