罗非鱼唾液酸黏附素基因克隆及组织表达

发布时间：2022-12-10 08:06

　　【目的】研究尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）唾液酸黏附素（sialoahesin）在健康鱼及感染无乳链球菌（Streptococcusagalactiae）后的组织表达,探讨其在免疫反应中的作用。【方法】根据NCBI上公布的罗非鱼唾液酸黏附素基因（Gen Bank登录号LOC102078335,记为On-sialoahesin）克隆On-sialoahesin开放阅读框序列,采用实时荧光定量PCR技术检测On-sialoahesin在健康罗非鱼脾脏、头肾、肠道、皮肤、鳃、脑、肌肉、肝、胸腺、脾、外周血中的分布,以及无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）刺激后的表达。【结果与结论】On-sialoahesin基因编码区1617bp,编码538个氨基酸,理论分子质量59.44ku,等电点6.57。On-sialoahesin含有3个IG结构域和1个IGC2,是IG结构域蛋白质超级家族成员。多序列比对发现,On-sialoahesin与其他物种sialoahesin氨基酸序列同源性介于36.81%～92.94%,且与奈里朴丽鱼（Haplochr... 

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 罗非鱼总RNA提取和cDNA合成
        1.2.2罗非鱼On-sialoadhesin基因的分子克隆
        1.2.3 q RT-PCR检测On-sialoadhesin的表达
        1.2.4 用软件分析阳性克隆结果
2 结果
    2.1 On-sialoadhesin基因克隆与序列分析
    2.2 On-sialoadhesin蛋白二级结构和三级结构预测
    2.3 On-sialoadhesin序列同源比对及进化分析
    2.4 On-sialoadhesin在罗非鱼各组织中的分布
    2.5 无乳链球菌攻毒后On-sialoadhesin在罗非鱼组织中的表达
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]罗湖病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J]. 吴凤雷,黄瑜,黄郁葱,蔡双虎,简纪常,汤菊芬.  广东海洋大学学报. 2019(05)
[2]罗非鱼罗湖病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 雷燕,肖洋,赵振峰,唐绍林,黎建斌,陈福艳.  广东海洋大学学报. 2019(03)
[3]尼罗罗非鱼CD247基因克隆及其组织表达分析[J]. 樊博琳,黎源,汪志文,鲁义善,王蓓,简纪常.  广东海洋大学学报. 2018(06)
[4]缺氧缺血性脑病新生儿免疫功能的变化及其影响因素[J]. 黄健,唐晓霞.  海南医学. 2018(06)
[5]尼罗罗非鱼非特异性细胞毒性细胞（NCC）分离条件的优化[J]. 郑琦,陈一锦,黄瑜,蔡佳,汤菊芬,鲁义善,吴灶和,简纪常.  广东海洋大学学报. 2017(03)
[6]无乳链球菌灭活疫苗对罗非鱼的免疫效果[J]. 陈贺,吴灶和,王蓓,鲁义善,黄郁葱,简纪常.  广东海洋大学学报. 2012(06)
[7]鱼类免疫球蛋白分子生物学研究进展[J]. 冯建军,关瑞章,林鹏,郭松林.  集美大学学报(自然科学版). 2010(06)
[8]广东省罗非鱼主养区无乳链球菌的分离、鉴定与致病性[J]. 柯剑,赵飞,罗理,姜兰,卢迈新,邹为民.  广东海洋大学学报. 2010(03)
[9]氧化高密度脂蛋白通过MAPKs信号转导途径诱导ECV304细胞表达组织因子[J]. 卜梓斌,姜志胜,马珍妮,董宁征,赵战芝,季顺东,沈飞,江淼,王静,谢丽倩,冯雪娟,陈晶晶,阮长耿.  中国病理生理杂志. 2009(04)
[10]定量RT-PCR测定冠心病患者外周血Siglec-1（CD169）的基因表达水平[J]. 熊怡淞,王皓,吴炜霖,周运恒,梁艳,杨再兴,荣光华,仲人前.  第二军医大学学报. 2008(11)

博士论文
[1]罗非鱼NCC活性调控蛋白及效应因子的鉴定与功能分析[D]. 黄瑜.广东海洋大学 2018

硕士论文
[1]胭脂鱼血清免疫球蛋白单克隆抗体的制备及应用研究[D]. 张庆璜.西南大学 2014
[2]罗非鱼免疫记忆及体外淋巴细胞增殖的研究[D]. 庞碧剑.广东海洋大学 2012
[3]猪Siglec-1基因启动子克隆及其在肺泡巨噬细胞特异性表达的验证[D]. 谢周瑞.南京农业大学 2012
[4]中国罗非鱼出口贸易国际竞争力研究[D]. 王斌.江南大学 2011



本文编号：3716392