凡纳滨对虾微粒体谷胱甘肽硫转移酶3基因克隆及其功能分析

发布时间：2023-04-21 01:02

　　【目的】明确凡纳滨对虾微粒体谷胱甘肽硫转移酶3(LvMGST3)在机体抗逆境胁迫与抵御病原体侵染过程中的功能作用,为有效提高对虾的抗胁迫能力和抗病力提供理论依据。【方法】采用RACE克隆LvMGST3基因c DNA序列,以EditSeq、ExPASy、SignalP 5.0、TMHMM 2.0、Clustal X和MEGA 6.0等在线软件进行生物信息学分析,再应用半定量PCR进行组织表达量分析。凡纳滨对虾分别进行氨氮胁迫(20.00 mg/L)及脂多糖(LPS,8μg/g)刺激后,采用实时荧光定量PCR检测分析LvMGST3基因的表达响应情况。【结果】LvMGST3基因cDNA序列全长826 bp,包含85 bp的5’端非编码区(5’-UTR)、321 bp的3’端非编码区(3’-UTR)和420 bp的开放阅读框(ORF),在ploy(A)尾前端15个核苷酸处存在加尾信号AATAAA。LvMGST3基因编码139个氨基酸残基,包含MGST3亚家族共有的保守结构域FNCX1QRX2H,此序列为FNCYQRAH。LvMGST3蛋白分子量为15.53 kD,理论等电点(pI)为9.38,...

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 供试凡纳滨对虾
    1.2 凡纳滨对虾总RNA提取及c DNA合成
    1.3 Lv MGST3基因c DNA序列克隆
    1.4 Lv MGST3基因序列分析
    1.5 Lv MGST3基因组织分布特征分析
    1.6 氨氮胁迫及LPS刺激后Lv MGST3基因表达差异分析
2 结果与分析
    2.1 Lv MGST3基因c DNA序列分析结果
    2.2 Lv MGST3蛋白生物信息学分析结果
    2.3 Lv MGST3基因同源性及系统发育进化树分析结果
    2.4 Lv MGST3基因在凡纳滨对虾各组织中的表达分析结果
    2.5 氨氮胁迫下Lv MGST3基因的表达变化特征
    2.6 LPS刺激后Lv MGST3基因的表达变化特征
3 讨论
4 结论



本文编号：3795517