滚环扩增信号放大策略在单增李斯特菌检测中应用的研究
发布时间：2021-01-29 11:26
单增李斯特菌（L.monocytogenes）是一种常见的食源性致病菌,对人类构成重大威胁。L.monocytogenes感染可导致败血症、脑膜炎、肠膜炎和流产等症状。L.monocytogenes存在于土壤、水、植物、人或动物的粪便中,并且在冷藏温度下仍然能够维持其生命活力,这将对食物储藏构成巨大的威胁。因此,建立快速且灵敏的检测方法对预防和控制由L.monocytogenes引起的食物中毒事件极其重要。滚环扩增（Rolling circle amplification,RCA）是一种恒温的DNA扩增技术,通过引入一条引发链和环状DNA模板,在DNA聚合酶的作用下,可在短时间内产生大量的DNA。该技术操作简便,设计灵活,与染色或探针联用可实现检测信号的放大,在生物检测中得到了广泛的应用。本研究基于RCA技术,分别结合了不对称聚合酶链式反应（Asymmetric polymerase chain reaction,aPCR）和适配体技术用于生菜中L.monocytogenes的检测。各章内容分述如下:第一章综述了滚环扩增信号放大技术在生物检测中应用的研究进展。第二章建立了aPCR-RC...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RCA构建成环分类：(A)锁式DNA成环；(B)哑铃DNA成环；(C)平末端成环Figure1.1.TheclassificationofRCAloop:(A)PadlockDNAloop;(B)DumbbellDNAloop;(C)
图 1.2 RCA 分类：（A）单引物 RCA；（B）双引物 RCA；（C）多引物 RCAFigure 1.2. The classification of RCA: (A) single primer RCA; (B) hyper branched RCA; (C)multiple primer RCA.1.5滚环扩增技术的应用RCA 具有高扩增效率并且能在恒温条件下进行扩增，研究者们基于此建立了一系列生物检测方法，表 1.1 概括了近年来 RCA 技术在生物检测中的应用。
第一章 引言摆脱了反应时间的限制。同时，也可以在 RCA 过程中加入蛋白质（图 1.3 C），从而将蛋白质固定在 DNA 纳米花中用于后续的检测[75, 76]。作为一种快速且恒温的 DNA 扩增技术，RCA 扩增得到的大量 ssDNA 可用于搭载一系列的信号分子实现检测信号的放大，在微生物检测、疾病预防和环境监测等领域都得到了广泛应用。相信随着技术水平的不断提高，RCA 定会得到更广泛和实际的应用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]滚环扩增信号放大技术在生物检测中应用的研究进展[J]. 占忠旭,刘巨,陈博璐,汤奕舟,陈官华,许恒毅. 生物工程学报. 2019(07)
[2]基于滚环扩增技术的纸基显色传感器用于致病菌快速检测[J]. 黄梦琪,刘芳,周小明. 激光生物学报. 2017(06)
[3]SERS传感器间接检测蛋白质的研究进展[J]. 陈雷,刘毛毛,张永军,王雅新,韩晓霞,赵冰. 光谱学与光谱分析. 2017(10)
[4]利用超分支滚环扩增技术检测miR-21[J]. 郭仲莉,曾照芳,鲁卫平. 第三军医大学学报. 2014(18)
[5]番茄细菌性叶斑病菌超分支滚环扩增快速检测技术[J]. 王念武,王婷,沈建国,胡方平. 植物保护. 2014(02)
[6]表面等离子共振技术结合滚环扩增法检测丙型肝炎病毒[J]. 季明辉,胡贵方,郑义,顾大勇,龙军,鲁卫平,何建安,谈书勤,史蕾,刘春晓,赵纯中,徐云庆,徐华,欧青叶,孙秋香,滕娟. 上海交通大学学报(医学版). 2012(06)
[7]全球食源性疾病现状[J]. 刘秀英. 国外医学(卫生学分册). 2003(04)
本文编号：3006806
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
RCA构建成环分类：(A)锁式DNA成环；(B)哑铃DNA成环；(C)平末端成环Figure1.1.TheclassificationofRCAloop:(A)PadlockDNAloop;(B)DumbbellDNAloop;(C)
图 1.2 RCA 分类：（A）单引物 RCA；（B）双引物 RCA；（C）多引物 RCAFigure 1.2. The classification of RCA: (A) single primer RCA; (B) hyper branched RCA; (C)multiple primer RCA.1.5滚环扩增技术的应用RCA 具有高扩增效率并且能在恒温条件下进行扩增，研究者们基于此建立了一系列生物检测方法，表 1.1 概括了近年来 RCA 技术在生物检测中的应用。
第一章 引言摆脱了反应时间的限制。同时，也可以在 RCA 过程中加入蛋白质（图 1.3 C），从而将蛋白质固定在 DNA 纳米花中用于后续的检测[75, 76]。作为一种快速且恒温的 DNA 扩增技术，RCA 扩增得到的大量 ssDNA 可用于搭载一系列的信号分子实现检测信号的放大，在微生物检测、疾病预防和环境监测等领域都得到了广泛应用。相信随着技术水平的不断提高，RCA 定会得到更广泛和实际的应用。
【参考文献】：
期刊论文
[1]滚环扩增信号放大技术在生物检测中应用的研究进展[J]. 占忠旭,刘巨,陈博璐,汤奕舟,陈官华,许恒毅. 生物工程学报. 2019(07)
[2]基于滚环扩增技术的纸基显色传感器用于致病菌快速检测[J]. 黄梦琪,刘芳,周小明. 激光生物学报. 2017(06)
[3]SERS传感器间接检测蛋白质的研究进展[J]. 陈雷,刘毛毛,张永军,王雅新,韩晓霞,赵冰. 光谱学与光谱分析. 2017(10)
[4]利用超分支滚环扩增技术检测miR-21[J]. 郭仲莉,曾照芳,鲁卫平. 第三军医大学学报. 2014(18)
[5]番茄细菌性叶斑病菌超分支滚环扩增快速检测技术[J]. 王念武,王婷,沈建国,胡方平. 植物保护. 2014(02)
[6]表面等离子共振技术结合滚环扩增法检测丙型肝炎病毒[J]. 季明辉,胡贵方,郑义,顾大勇,龙军,鲁卫平,何建安,谈书勤,史蕾,刘春晓,赵纯中,徐云庆,徐华,欧青叶,孙秋香,滕娟. 上海交通大学学报(医学版). 2012(06)
[7]全球食源性疾病现状[J]. 刘秀英. 国外医学(卫生学分册). 2003(04)
本文编号：3006806
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