潜在益生作用乳酸菌的筛选及其在发酵乳中的应用研究
发布时间：2021-12-25 00:53
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物,其具有调节肠道菌群、抗氧化、降血脂等作用。为获得具有益生特性的乳酸菌菌株,本研究对分离自蒙古国牧区酸马奶样品中的197株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐、耐模拟人工胃肠道等生物学特性的筛选及鉴定,并将筛选所得的菌株制备发酵乳,对其进行抗氧化活性、抑制ACE活性的测定和调节小鼠肠道菌群的研究,为今后益生菌的开发和利用提供优良菌株。具体结果如下:1.潜在益生作用乳酸菌的筛选及鉴定。（1）通过耐酸（pH 2.0、pH 2.5、pH 3.0）和耐胆盐试验筛选出12株耐酸性能较强的菌株,用于后续试验。（2）在模拟人工胃肠液试验中,12株菌显示不同的耐受能力。在人工胃液处理3 h的存活率在22.81%～95.86%之间,其中菌株2-32和菌株2-33的存活率分别为80.64%和95.86%。选择存活率大于60%的菌株共5株（分别为2-7、2-13、2-20、2-32、2-33）进行模拟人工肠液试验（处理4 h和8 h后）得知,5株菌的活菌数均保持在109～1010 CFU/mL之间,存活率均在50%以上。通过细胞表面疏水能力测定,这5株菌均具有一定的粘附能力,其中菌株2-...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２乳酸菌菌株细胞表面疏水率??
２２?潜在益生作用乳酸菌的筛选鉴定及其发酵乳功能特性研究???＾１??图３菌株２－３３菌落形态及菌体形态??Ｆｉｇ．３?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｌｏｎｙ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ａｎｄ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｂｏｄｙ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ?２－３３??由图３可知，菌种在ＭＲＳ固体培养基上菌落呈圆形、边缘整齐、表面光泽、不??透明且颜色为乳白色；经革兰氏染色为紫色，显微镜下结果为短杆状革兰氏阳性菌。??４．１．８糖类发酵实验结果??将菌株２－３３的单菌落混悬于２?ｍＬ生理盐水中制成菌悬液，将其加入到糖类培??养基中，３７°Ｃ培养２４？４８?ｈ后观察的结果如下：??表１２糖类发酵实验??Ｔａｂｌｅ．?１２?ｓｕｇａｒ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ??生理生七叶苷纤维二麦芽糖甘露醇水杨苷山梨醇蔗糖棉子糖乳糖??化实验?ｍ???结果?＋?＋?＋?＋?＋?＋?＋?＋?＋??注：“＋”表示阳性，使培养基变色。??由表１２结果可知，将菌株２－３３接种于糖类发酵培养基中培养后，可利用七叶??苷（由紫色变黑色）及其他糖类（均变成黄色），结果判断均为阳性。对照《伯杰氏??细菌鉴定手册》，菌株２－３３利用糖类的特性与植物乳杆菌的特性相同，因此初步鉴??定菌株２－３３为植物乳杆菌。??４．１．９潜在益生菌株的１６Ｓ?ｒＤＮＡ基因序列分子鉴定??根据细菌基因组ＤＮＡ试剂盒提取方法进行了菌株２－３３的基因组ＤＮＡ提取，??并进行１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列的ＰＣＲ扩增。??
图４菌株２－３３的１６Ｓ?ｒＤＮＡ?ＰＣＲ扩增产物??
【参考文献】：
期刊论文
[1]云南自然发酵火腿中乳酸菌的分离鉴定及发酵特性研究[J]. 赵改名,李珊珊,崔文明,祝超智,焦阳阳,李佳麒,银峰,韩明山. 食品与发酵工业. 2020(01)
[2]乳酸菌液体发酵饲料对育肥猪养分表观消化率、粪样菌群、血液生化指标和生产性能的影响[J]. 张秀江,胡虹,王秋菊,权淑静,冯菲,谷立峰,卓辉. 饲料工业. 2019(20)
[3]热灭活副干酪乳杆菌Lc19对小鼠便秘的缓解作用研究[J]. 陈建国,李周勇,李桂花,周晓娟,桑跃,俞伟祖. 中国奶牛. 2019(09)
[4]乳酸菌的功能及其在食品工业中的应用[J]. 杜兰威,单蕊,赵蕾,张弘. 食品研究与开发. 2019(13)
[5]降胆固醇和耐酸耐胆盐益生菌的筛选研究[J]. 贺珊珊,鲍志宁,林伟锋,夏枫耿. 现代食品科技. 2019(08)
[6]益生菌的功能及其在功能食品中的应用[J]. 韩璐瑶. 现代食品. 2019(12)
[7]益生菌对肠道菌群的作用及其在畜禽生产中的应用[J]. 陈培炼. 湖南饲料. 2019(02)
[8]高抗氧化乳酸菌发酵剂的筛选及其最佳发酵条件[J]. 刘文文,李洋,李键,索化夷. 中国乳品工业. 2019(02)
[9]肠道菌群与益生菌在衰老及其调控中的研究与应用[J]. 王融,邵祎妍,林佳佳,郑柳杰,杨欣,傅正伟,倪银华. 生命科学. 2019(01)
[10]乳酸菌细菌素生物合成机制、抑菌机制及应用研究进展[J]. 彭书东,李键,刘士健,张玉,王洪伟,赵欣,索化夷. 食品与发酵工业. 2019(06)
博士论文
[1]抗氧化益生乳酸菌的筛选、抗氧化作用机制及应用研究[D]. 王英.南京师范大学 2016
[2]乳酸菌的分离鉴定及其抗菌肽与发酵性能研究[D]. 华鹤良.扬州大学 2014
[3]益生性降胆固醇植物乳杆菌的筛选、发酵特性及体内功效研究[D]. 于志会.吉林大学 2013
[4]降胆固醇益生乳酸菌筛选及其功能机理的研究[D]. 郭翔.江南大学 2009
[5]内蒙古牧区传统乳制品中乳杆菌生物学特性及其益生作用的研究[D]. 周雨霞.内蒙古农业大学 2006
硕士论文
[1]植物乳杆菌发酵中药复方工艺优化及对小鼠肠道菌群的作用研究[D]. 赵唐.兰州大学 2019
[2]开菲尔乳杆菌KL22的鉴定及其益生潜力评价[D]. 赵彤.河北工程大学 2019
[3]具有潜在益生特性乳酸菌的筛选鉴定及其特性研究[D]. 柳青.内蒙古农业大学 2018
[4]广谱抗菌活性乳酸杆菌的生物学特性及其应用研究[D]. 萨如拉.内蒙古农业大学 2018
[5]植物乳杆菌KLDS1.0386体内降胆固醇作用机制的研究[D]. 靳妲.东北农业大学 2018
[6]免疫活性乳酸菌的筛选及其对小鼠免疫调节作用的研究[D]. 蒙月月.东北农业大学 2018
[7]降胆固醇乳酸菌的筛选及不同离子对其降胆固醇的影响[D]. 王菁.西北农林科技大学 2018
[8]自制泡菜中抗氧化活性乳酸菌的筛选及其抗肥胖功能的评价[D]. 张智强.南京农业大学 2017
[9]核桃粕蛋白质组分的理化性质、抗氧化性质及ACE抑制率的研究[D]. 金子纯.陕西师范大学 2017
[10]青藏高原高抗氧化活性乳酸菌的筛选及其抗氧化特性研究[D]. 陈明.兰州大学 2017
本文编号：3551500
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２乳酸菌菌株细胞表面疏水率??
２２?潜在益生作用乳酸菌的筛选鉴定及其发酵乳功能特性研究???＾１??图３菌株２－３３菌落形态及菌体形态??Ｆｉｇ．３?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｌｏｎｙ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ａｎｄ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｂｏｄｙ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ?２－３３??由图３可知，菌种在ＭＲＳ固体培养基上菌落呈圆形、边缘整齐、表面光泽、不??透明且颜色为乳白色；经革兰氏染色为紫色，显微镜下结果为短杆状革兰氏阳性菌。??４．１．８糖类发酵实验结果??将菌株２－３３的单菌落混悬于２?ｍＬ生理盐水中制成菌悬液，将其加入到糖类培??养基中，３７°Ｃ培养２４？４８?ｈ后观察的结果如下：??表１２糖类发酵实验??Ｔａｂｌｅ．?１２?ｓｕｇａｒ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ??生理生七叶苷纤维二麦芽糖甘露醇水杨苷山梨醇蔗糖棉子糖乳糖??化实验?ｍ???结果?＋?＋?＋?＋?＋?＋?＋?＋?＋??注：“＋”表示阳性，使培养基变色。??由表１２结果可知，将菌株２－３３接种于糖类发酵培养基中培养后，可利用七叶??苷（由紫色变黑色）及其他糖类（均变成黄色），结果判断均为阳性。对照《伯杰氏??细菌鉴定手册》，菌株２－３３利用糖类的特性与植物乳杆菌的特性相同，因此初步鉴??定菌株２－３３为植物乳杆菌。??４．１．９潜在益生菌株的１６Ｓ?ｒＤＮＡ基因序列分子鉴定??根据细菌基因组ＤＮＡ试剂盒提取方法进行了菌株２－３３的基因组ＤＮＡ提取，??并进行１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列的ＰＣＲ扩增。??
图４菌株２－３３的１６Ｓ?ｒＤＮＡ?ＰＣＲ扩增产物??
【参考文献】：
期刊论文
[1]云南自然发酵火腿中乳酸菌的分离鉴定及发酵特性研究[J]. 赵改名,李珊珊,崔文明,祝超智,焦阳阳,李佳麒,银峰,韩明山. 食品与发酵工业. 2020(01)
[2]乳酸菌液体发酵饲料对育肥猪养分表观消化率、粪样菌群、血液生化指标和生产性能的影响[J]. 张秀江,胡虹,王秋菊,权淑静,冯菲,谷立峰,卓辉. 饲料工业. 2019(20)
[3]热灭活副干酪乳杆菌Lc19对小鼠便秘的缓解作用研究[J]. 陈建国,李周勇,李桂花,周晓娟,桑跃,俞伟祖. 中国奶牛. 2019(09)
[4]乳酸菌的功能及其在食品工业中的应用[J]. 杜兰威,单蕊,赵蕾,张弘. 食品研究与开发. 2019(13)
[5]降胆固醇和耐酸耐胆盐益生菌的筛选研究[J]. 贺珊珊,鲍志宁,林伟锋,夏枫耿. 现代食品科技. 2019(08)
[6]益生菌的功能及其在功能食品中的应用[J]. 韩璐瑶. 现代食品. 2019(12)
[7]益生菌对肠道菌群的作用及其在畜禽生产中的应用[J]. 陈培炼. 湖南饲料. 2019(02)
[8]高抗氧化乳酸菌发酵剂的筛选及其最佳发酵条件[J]. 刘文文,李洋,李键,索化夷. 中国乳品工业. 2019(02)
[9]肠道菌群与益生菌在衰老及其调控中的研究与应用[J]. 王融,邵祎妍,林佳佳,郑柳杰,杨欣,傅正伟,倪银华. 生命科学. 2019(01)
[10]乳酸菌细菌素生物合成机制、抑菌机制及应用研究进展[J]. 彭书东,李键,刘士健,张玉,王洪伟,赵欣,索化夷. 食品与发酵工业. 2019(06)
博士论文
[1]抗氧化益生乳酸菌的筛选、抗氧化作用机制及应用研究[D]. 王英.南京师范大学 2016
[2]乳酸菌的分离鉴定及其抗菌肽与发酵性能研究[D]. 华鹤良.扬州大学 2014
[3]益生性降胆固醇植物乳杆菌的筛选、发酵特性及体内功效研究[D]. 于志会.吉林大学 2013
[4]降胆固醇益生乳酸菌筛选及其功能机理的研究[D]. 郭翔.江南大学 2009
[5]内蒙古牧区传统乳制品中乳杆菌生物学特性及其益生作用的研究[D]. 周雨霞.内蒙古农业大学 2006
硕士论文
[1]植物乳杆菌发酵中药复方工艺优化及对小鼠肠道菌群的作用研究[D]. 赵唐.兰州大学 2019
[2]开菲尔乳杆菌KL22的鉴定及其益生潜力评价[D]. 赵彤.河北工程大学 2019
[3]具有潜在益生特性乳酸菌的筛选鉴定及其特性研究[D]. 柳青.内蒙古农业大学 2018
[4]广谱抗菌活性乳酸杆菌的生物学特性及其应用研究[D]. 萨如拉.内蒙古农业大学 2018
[5]植物乳杆菌KLDS1.0386体内降胆固醇作用机制的研究[D]. 靳妲.东北农业大学 2018
[6]免疫活性乳酸菌的筛选及其对小鼠免疫调节作用的研究[D]. 蒙月月.东北农业大学 2018
[7]降胆固醇乳酸菌的筛选及不同离子对其降胆固醇的影响[D]. 王菁.西北农林科技大学 2018
[8]自制泡菜中抗氧化活性乳酸菌的筛选及其抗肥胖功能的评价[D]. 张智强.南京农业大学 2017
[9]核桃粕蛋白质组分的理化性质、抗氧化性质及ACE抑制率的研究[D]. 金子纯.陕西师范大学 2017
[10]青藏高原高抗氧化活性乳酸菌的筛选及其抗氧化特性研究[D]. 陈明.兰州大学 2017
本文编号：3551500
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