基于肠道菌群探究贻贝提取物对食物诱导的系统低度炎症的干预作用
发布时间：2023-02-08 17:44
部分人群过量食用荔枝、辣椒和食品添加剂可以引起系统低度炎性“上火”,但机制尚不明确,且高效控制方法缺乏。现有合成抗炎药物具有明显不良反应,而贻贝作为天然安全的海洋源抗炎活性物质,应用于系统炎症的控制潜力巨大,但其抗炎效果及其控制机制尚待探明。本研究通过构建肠道菌群人源化小鼠模型,筛选出食物致炎人源化菌群小鼠模型并探讨其机制;并以贻贝提取物对致炎模型小鼠进行干预。通过生物化学、组织化学及生物信息学等手段测定小鼠血浆中LPS、炎性因子水平、肠道菌群谱和肠壁通透性水平,探究“上火”食物致炎及贻贝提取物抑炎作用及其机制。结果如下:1、构建肠道菌群人源化小鼠(HFA)模型可一定程度模拟志愿者肠道菌群通过给小鼠灌胃志愿者粪便菌悬液,其肠道菌群在门水平上各组分丰度比例接近于志愿者;在属水平上两组在UPGMA聚类分析可聚为一类;在种水平上志愿者特有的21种菌可以在模型小鼠肠道内定植成功,说明肠道菌群人源化小鼠在一定程度上模拟了志愿者肠道菌群,模型构建成功。2、高剂量荔枝诱发菌群紊乱改变肠道屏障完整性导致人源化小鼠系统低度炎症辣椒和双乙酸钠诱发小鼠机体产生低度系统炎症反应的程度都不如高剂量荔枝诱发的炎症...
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 文献综述
1.1 系统低度炎症概述
1.1.1 系统低度炎症的定义
1.1.2 食物引起的系统低度炎症研究进展
1.1.3 系统低度炎症的干预手段研究进展
1.2 肠道菌群概述
1.2.1 肠道菌群的功能
1.2.2 肠道菌群与系统低度炎症的关系
1.2.3 肠道菌群的检测方法
1.2.4 研究肠道菌群的动物模型
1.3 贻贝提取物概述
1.3.1 贻贝提取物的成分
1.3.2 贻贝提取物的抗炎功能
1.4 立题背景及意义
1.5 研究内容及技术路线
1.5.1 研究内容
1.5.2 技术路线
2 肠道菌群人源化小鼠模型的建立
2.1 材料与仪器
2.1.1 志愿者选择
2.1.2 试剂
2.1.3 粪便菌悬液
2.1.4 仪器与设备
2.1.5 实验动物
2.2 实验方法
2.2.1 伪无菌小鼠模型的构建
2.2.2 肠道菌群人源化小鼠模型的建立
2.2.3 粪便菌群总DNA的提取及测定
2.2.4 小鼠粪便DNA的16S rDNA扩增子焦磷酸测序
2.2.4.1 DNA样品的16S rDNA扩增
2.2.4.2 序列处理
2.2.5 物种分类及丰富度分析
2.2.6 样本复杂度分析和多样品比较分析
2.2.7 不同样本的物种组成聚类分析
2.2.8 肠道菌群人源化小鼠模型评价
2.2.9 统计学分析
2.3 结果与分析
2.3.1 肠道菌群人源化对小鼠肠道菌群多样性的影响
2.3.2 人源化菌群小鼠模型与志愿者肠道菌群在门水平上的相似性
2.3.3 人源化菌群小鼠模型与志愿者肠道菌群菌属水平上相似性分析
2.4 讨论
2.5 本章小结
3 食物诱导的小鼠系统低度炎症模型及其致炎机制研究
3.1 材料与方法
3.1.1 原料
3.1.2 试剂
3.1.3 仪器与设备
3.1.4 实验动物
3.2 实验方法
3.2.1 食物诱导的小鼠系统低度炎症模型的建立
3.2.2 小鼠血清中炎症水平的测定
3.2.3 小鼠血清中炎性因子含量的ELISA法检测
3.2.4 小鼠肠道屏障结构的观测(HE染色切片)
3.2.5 肠道菌群测序
3.2.6 统计学分析
3.3 结果与分析
3.3.1 荔枝、辣椒素和双乙酸钠诱导小鼠系统低度炎症效果比较
3.3.2 荔枝提取物灌胃对小鼠血液中几种炎性因子含量的影响
3.3.3 荔枝提取物灌胃对小鼠肠道菌群多样性的影响
3.3.4 荔枝灌胃对小鼠肠道菌群菌门属水平的影响
3.3.5 荔枝灌胃对小鼠肠道菌群功能预测分析的影响
3.3.6 荔枝灌胃对小鼠肠道通透性的影响
3.3.7 荔枝提取物对小鼠血液中致炎因子LPS含量的影响
3.4 讨论
3.5 本章小结
4.贻贝提取物对荔枝诱导的系统低度炎症的干预作用
4.1 材料与方法
4.1.1 原料
4.1.2 试剂
4.1.3 仪器与设备
4.1.4 实验动物
4.2 实验方法
4.2.1 小鼠血清中致炎因子LPS水平的测定
4.2.2 ELISA法检测小鼠血清中炎性因子含量
4.2.3 小鼠肠道屏障结构的观测(HE染色切片)
4.2.4 肠道菌群测序
4.2.5 统计学分析
4.3 结果与分析
4.3.1 贻贝提取物灌胃对小鼠血液中炎性因子含量的影响
4.3.2 贻贝灌胃对小鼠肠道菌群多样性的影响
4.3.3 贻贝灌胃对小鼠肠道菌群菌门属水平的影响
4.3.4 贻贝灌胃对小鼠肠道菌群功能预测分析的影响
4.3.5 荔枝灌胃对小鼠肠道通透性的影响
4.3.6 贻贝提取物对小鼠血液中炎症水平的影响
4.3.7 贻贝灌胃对小鼠肠道中革兰氏阴性菌数量的影响
4.4 讨论
4.5 本章小结
5 结论与展望
5.1 主要结论
5.2 创新及意义
5.3 展望
参考文献
致谢
作者简介
导师简介
本文编号：3738106
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 文献综述
1.1 系统低度炎症概述
1.1.1 系统低度炎症的定义
1.1.2 食物引起的系统低度炎症研究进展
1.1.3 系统低度炎症的干预手段研究进展
1.2 肠道菌群概述
1.2.1 肠道菌群的功能
1.2.2 肠道菌群与系统低度炎症的关系
1.2.3 肠道菌群的检测方法
1.2.4 研究肠道菌群的动物模型
1.3 贻贝提取物概述
1.3.1 贻贝提取物的成分
1.3.2 贻贝提取物的抗炎功能
1.4 立题背景及意义
1.5 研究内容及技术路线
1.5.1 研究内容
1.5.2 技术路线
2 肠道菌群人源化小鼠模型的建立
2.1 材料与仪器
2.1.1 志愿者选择
2.1.2 试剂
2.1.3 粪便菌悬液
2.1.4 仪器与设备
2.1.5 实验动物
2.2 实验方法
2.2.1 伪无菌小鼠模型的构建
2.2.2 肠道菌群人源化小鼠模型的建立
2.2.3 粪便菌群总DNA的提取及测定
2.2.4 小鼠粪便DNA的16S rDNA扩增子焦磷酸测序
2.2.4.1 DNA样品的16S rDNA扩增
2.2.4.2 序列处理
2.2.5 物种分类及丰富度分析
2.2.6 样本复杂度分析和多样品比较分析
2.2.7 不同样本的物种组成聚类分析
2.2.8 肠道菌群人源化小鼠模型评价
2.2.9 统计学分析
2.3 结果与分析
2.3.1 肠道菌群人源化对小鼠肠道菌群多样性的影响
2.3.2 人源化菌群小鼠模型与志愿者肠道菌群在门水平上的相似性
2.3.3 人源化菌群小鼠模型与志愿者肠道菌群菌属水平上相似性分析
2.4 讨论
2.5 本章小结
3 食物诱导的小鼠系统低度炎症模型及其致炎机制研究
3.1 材料与方法
3.1.1 原料
3.1.2 试剂
3.1.3 仪器与设备
3.1.4 实验动物
3.2 实验方法
3.2.1 食物诱导的小鼠系统低度炎症模型的建立
3.2.2 小鼠血清中炎症水平的测定
3.2.3 小鼠血清中炎性因子含量的ELISA法检测
3.2.4 小鼠肠道屏障结构的观测(HE染色切片)
3.2.5 肠道菌群测序
3.2.6 统计学分析
3.3 结果与分析
3.3.1 荔枝、辣椒素和双乙酸钠诱导小鼠系统低度炎症效果比较
3.3.2 荔枝提取物灌胃对小鼠血液中几种炎性因子含量的影响
3.3.3 荔枝提取物灌胃对小鼠肠道菌群多样性的影响
3.3.4 荔枝灌胃对小鼠肠道菌群菌门属水平的影响
3.3.5 荔枝灌胃对小鼠肠道菌群功能预测分析的影响
3.3.6 荔枝灌胃对小鼠肠道通透性的影响
3.3.7 荔枝提取物对小鼠血液中致炎因子LPS含量的影响
3.4 讨论
3.5 本章小结
4.贻贝提取物对荔枝诱导的系统低度炎症的干预作用
4.1 材料与方法
4.1.1 原料
4.1.2 试剂
4.1.3 仪器与设备
4.1.4 实验动物
4.2 实验方法
4.2.1 小鼠血清中致炎因子LPS水平的测定
4.2.2 ELISA法检测小鼠血清中炎性因子含量
4.2.3 小鼠肠道屏障结构的观测(HE染色切片)
4.2.4 肠道菌群测序
4.2.5 统计学分析
4.3 结果与分析
4.3.1 贻贝提取物灌胃对小鼠血液中炎性因子含量的影响
4.3.2 贻贝灌胃对小鼠肠道菌群多样性的影响
4.3.3 贻贝灌胃对小鼠肠道菌群菌门属水平的影响
4.3.4 贻贝灌胃对小鼠肠道菌群功能预测分析的影响
4.3.5 荔枝灌胃对小鼠肠道通透性的影响
4.3.6 贻贝提取物对小鼠血液中炎症水平的影响
4.3.7 贻贝灌胃对小鼠肠道中革兰氏阴性菌数量的影响
4.4 讨论
4.5 本章小结
5 结论与展望
5.1 主要结论
5.2 创新及意义
5.3 展望
参考文献
致谢
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