利用转基因小鼠鉴定肝胆胰世系特征

发布时间：2020-04-24 04:42

【摘要】：在哺乳动物早期肝脏和胰腺的形成过程中,两者由同一内胚层的前体细胞发育而来,且在一定的条件刺激下可以实现转分化。在肝脏损伤中有检测到胆管周围的细胞表达lgr5,lgr5阳性的细胞会大量增殖分化为肝细胞和胆管细胞来补充受损伤的肝脏细胞,起到修复损伤的作用,而在成体肝脏中未检测出lgr5的表达,胰腺亦如此。同时决定胰腺发育的pdxl基因和胰岛素基因Insulin在成体的表达也局限于胰岛细胞,其他胰腺细胞均未见有表达。lgr5、pdx1Insulin三种基因在成体肝脏和胰腺中的表达研究已经有许多报道,但是关于这三种基因在肝脏和胰腺的世系表达特征还未见研究报道。因此本试验利用cre-loxp系统和转基因小鼠,通过特异性启动子lgr5、pdx1和Insulin启动的cre重组酶体系,经药物诱导、冰冻切片及免疫染色探讨lgr5、pdx1及Insulin在肝胆胰的世系特征。研究结果显示,Insulin基因在成体小鼠胰腺的胰岛细胞中有表达,胰腺的腺泡细胞和胰腺导管细胞中未检测到表达,在肝脏中的肝实质细胞、肝导管细胞和胆导管细胞也未检测到表达;pdx1基因在成体小鼠肝实质细胞、肝导管细胞和胆管细胞中都有表达,在胰腺的腺泡细胞、胰岛细胞和导管细胞也检测到有表达;lgr基因在成体小鼠肝脏的肝实质细胞、肝导管细胞和胆导管细胞未检测到表达,在胰腺中的腺泡细胞、胰岛细胞和导管细胞也未检测到有表达,不具有世系特征。上述研究结果阐明了lgr5、pdx1和Insulin基因在肝脏和胰腺发育中的世系表达特征,为肝脏和胰腺发育中相关功能基因的研究奠定了基础。
【图文】：

图２－１邋ＰＣＲ结果逡逑

Ｆｉｇｕｒｅ邋２－３邋ｅｒｅ邋ｃｏｄｉｎｇ邋ａｒｅａ邋ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ邋ｒｅｓｕｌｔｓ逡逑２．３．２小鼠肝脏和胰腺实质以及导管免疫染色结果逡逑２．３．２．１小鼠肝、胰腺实质细胞免疫染色结果逡逑利用／ｒａｗ／／＞？－ｃｒｅ－ＯＴ７／ｗ？Ｇ小鼠鉴定肝胆胰世系特征，表达或表达过／ｍｗ／／／？基因的细逡逑胞呈现ＧＦＰ阳性。小鼠胰腺胰岛细胞免疫染色结果显示，胰岛细胞特异性胰岛素基因逡逑（／ｍ７／／ｚ＿／７）表达于胰腺胰岛细胞中，／ｍｗ／ｈ阳性胰岛细胞有ＧＴ７／＊表达，／ｔｗｗ／／＞？蛋白和逡逑ＧＦ／＾蛋白共定位于胰腺胰岛细胞中，即胰腺胰岛细胞表达／ｒａｗ／／＞？（图２－４，１１－４）；肝实逡逑质细胞免疫染色结果显示，肝细胞特异性表达白蛋白基因（ａ／Ｚｍｗｂ，邋ＪＺ５）广泛表达逡逑于肝细胞的细胞质中，阳性肝细胞未检测到ＧＦ７５的表达，阳性肝细胞和ＧＦＰ逡逑阳性细胞不存在共染的情况，，即肝细胞中不表达／ｍｗ／ｈ邋（图２－４，邋Ｌ１－４）；胰腺组织免疫逡逑染色结果显示，腺泡细胞淀粉酶基因（Ａｗ＿ｙ／ｍｅ）特异性表达于腺泡细胞的细胞质中，逡逑ｊｗｊ／ｏａ阳性细胞不表达ＧＦＰ，ｄｗｙｏｓｅ阳性腺泡细胞和ＧＦＰ阳性细胞不存在共染的情逡逑况，即腺泡细胞中不表达／似ｗ／／？邋（图２－４，Ａ１邋－４邋）。逡逑
【学位授予单位】：东北林业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：Q344

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本文编号：2638541