基于花菁染料新型荧光分子探针的设计合成及其对细胞内过氧亚硝酸根阴离子的检测
发布时间：2020-06-05 07:25
【摘要】：过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-)是一种短寿命的内源性活性物质,在许多生理和病理过程中起着重要作用。在这项工作中,我们合成了基于苯并噻唑衍生的花菁结构的近红外荧光探针Cy-SN,用于测定过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-。设计的探针通过氧化裂解共轭的碳碳双键与ONOO-特异性反应并产生非荧光产物。同时,与ONOO-反应后,探针在630 nm处的特征吸收大大降低,伴随着从亮蓝色到绿色黄色的剧烈颜色变化,呈现出明显的可视化特性。我们研究并证明了探针能够以剂量反应方式用于测量ONOCT并且具有低至26 nM的检测限。此外,我们通过共聚焦荧光显微镜将探针Cy-SN应用于活细胞中内源性ONOO-的成像,其显示出良好的细胞渗透性和低细胞毒性。探针Cy-SN用于外源ONOC-比色检测和内源荧光成像的成功应用表明其在生物分析中具有巨大的应用潜力。第一章,主要介绍了过氧亚硝酸根阴离子的性质,及其在细胞内与其合成相关的一氧化氮和超氧阴离子自由基的性质,及其相互作用。分析检测过氧亚硝酸根阴离子的方法,包括分光光度法、化学发光法、电子自旋共振法、电化学分析法和荧光光谱法。在荧光光谱法里介绍了用于检测过氧亚硝酸根阴离子的有机荧光探针,包括荧光素类、罗丹明类、氟硼荧(BODIPY)类及花菁类等。第二章,我们设计合成了一种新型的基于花菁结构Cy5并修饰有苯并噻唑基团的有机分子荧光探针Cy-SN,在这不跟我们介绍了详细和合成步骤并通过质谱和核磁氢谱对其进行表征。我们研究了该探针的光谱性质,不同pH条件下荧光探针Cy-SN的荧光强度及其对过氧亚硝酸根阴离子的响应能力,荧光探针Cy-SN对不同浓度ONOO-的光谱检测,并得到该探针对ONOC-的检测限为26 nM。除此之外,我们还探究了该探针Cy-SN对ONOC-的选择性,及其检测机理。最后,我们将该探针用于活细胞中内源及外源性ONOC-的检测,并对其进行荧光成像,该探针表现出低细胞毒性和良好的细胞成像性能。因此具有良好的应用前景。
【图文】：
华北电力大学硕士学位论文逡逑之一是它与二氧化碳（Ｃ0２）的反应，与碳酸氢盐（ｈｃｏ３ｏ平衡［２７］，同时形成‘ｎｏ２逡逑和Ｃ０３‘＿自由基（产率３５％），这两种高度氧化的物质，可以反过来导致生物分子逡逑的氧化损伤［２８］。需要考虑的一个重要方面是过氧亚硝酸阴离子可以作为水相中（如逡逑硫醇，金属蛋白和二氧化碳）的氧化中间产物。非常重要的是，ＯＮＯＯＨ可以自由逡逑地透过膜发生反应，并且二级自由基与疏水脂质和蛋白质反应，如图１－２所示［２９］。逡逑Ａ逦Ｒａｄｉｅａｆ邋ｒｅ？ｃｔ？？ｗ逡逑ｔｒｍｍ邋ｒｓｆｔａｔｉｃｒｓ逡逑
的氧化损伤［２８］。需要考虑的一个重要方面是过氧亚硝酸阴离子可以作为水相中（如逡逑硫醇，金属蛋白和二氧化碳）的氧化中间产物。非常重要的是，ＯＮＯＯＨ可以自由逡逑地透过膜发生反应，并且二级自由基与疏水脂质和蛋白质反应，如图１－２所示［２９］。逡逑Ａ逦Ｒａｄｉｅａｆ邋ｒｅ？ｃｔ？？ｗ逡逑ｔｙｒｍｍ邋ｒｓｆｔａｔｉｃｒｓ逡逑－邋ｃ＾ｔ逦（＞＞ａ邋ｓｘｓｄａｆｉｏｆｔ邋＾逡逑ｌ＆ｊａｑｗ＾ｏｕ＊逡逑ｐｈａｓ？Ｊ逡逑＊邋ＣＯ，逡逑＼逡逑？。，，邋一■＞＊？邋Ｃ＾ｏｏ．－逦十＿＿逡逑ｌＭ．逦８逦％逡逑ＧＮ0ＯＨ＾＝＝ｍ＝＝＝＾逦ＣＮＯＯＨ逦Ｃ：ｊ逡逑１邋１邋ｉ逡逑Ｇｉｏｔａｌ＾ｏｍ邋Ｍ逦｜逡逑Ｈ邋？逡逑Ｍｍｔｌｏｐｒ？热ｍ邋．广）逦、．．．．ｆｊ逡逑p哄危澹睿幔洌幔椋铮铄危茫哄义希ǎ椋铄澹妫瘢酰恚簦椋渝危蹋椋穑浚叔澹睿妫妫幔簦椋铮沐义希浚В矗
本文编号：2697708
【图文】：
华北电力大学硕士学位论文逡逑之一是它与二氧化碳（Ｃ0２）的反应，与碳酸氢盐（ｈｃｏ３ｏ平衡［２７］，同时形成‘ｎｏ２逡逑和Ｃ０３‘＿自由基（产率３５％），这两种高度氧化的物质，可以反过来导致生物分子逡逑的氧化损伤［２８］。需要考虑的一个重要方面是过氧亚硝酸阴离子可以作为水相中（如逡逑硫醇，金属蛋白和二氧化碳）的氧化中间产物。非常重要的是，ＯＮＯＯＨ可以自由逡逑地透过膜发生反应，并且二级自由基与疏水脂质和蛋白质反应，如图１－２所示［２９］。逡逑Ａ逦Ｒａｄｉｅａｆ邋ｒｅ？ｃｔ？？ｗ逡逑ｔｒｍｍ邋ｒｓｆｔａｔｉｃｒｓ逡逑
的氧化损伤［２８］。需要考虑的一个重要方面是过氧亚硝酸阴离子可以作为水相中（如逡逑硫醇，金属蛋白和二氧化碳）的氧化中间产物。非常重要的是，ＯＮＯＯＨ可以自由逡逑地透过膜发生反应，并且二级自由基与疏水脂质和蛋白质反应，如图１－２所示［２９］。逡逑Ａ逦Ｒａｄｉｅａｆ邋ｒｅ？ｃｔ？？ｗ逡逑ｔｙｒｍｍ邋ｒｓｆｔａｔｉｃｒｓ逡逑－邋ｃ＾ｔ逦（＞＞ａ邋ｓｘｓｄａｆｉｏｆｔ邋＾逡逑ｌ＆ｊａｑｗ＾ｏｕ＊逡逑ｐｈａｓ？Ｊ逡逑＊邋ＣＯ，逡逑＼逡逑？。，，邋一■＞＊？邋Ｃ＾ｏｏ．－逦十＿＿逡逑ｌＭ．逦８逦％逡逑ＧＮ0ＯＨ＾＝＝ｍ＝＝＝＾逦ＣＮＯＯＨ逦Ｃ：ｊ逡逑１邋１邋ｉ逡逑Ｇｉｏｔａｌ＾ｏｍ邋Ｍ逦｜逡逑Ｈ邋？逡逑Ｍｍｔｌｏｐｒ？热ｍ邋．广）逦、．．．．ｆｊ逡逑p哄危澹睿幔洌幔椋铮铄危茫哄义希ǎ椋铄澹妫瘢酰恚簦椋渝危蹋椋穑浚叔澹睿妫妫幔簦椋铮沐义希浚В矗
本文编号：2697708
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/2697708.html
