粟酒裂殖酵母蛋白Ppr10结构与功能的研究

发布时间：2020-07-01 16:58

【摘要】：粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe,S.pombe)线粒体蛋白Ppr10和Mpa1对线粒体呼吸链蛋白的合成非常重要。Ppr10与Mpa1形成复合体,但是Ppr10与Mpa1如何相互作用并不清楚。本文通过生物信息分析软件HHpred和HHrepID预测发现Ppr10有13个重复序列,这些重复序列由35个氨基酸组成,富含亮氨酸。由于Ppr10与PPR蛋白存在相似性以及Ppr10重复序列与PPR模体存在相似性,因此将这些重复序列命名为类PPR模体(PPR-like motif)。为了研究这些类PPR模体对Ppr10功能的重要性,本文构建了缺失单个或多个类PPR模体的突变菌株。本文分析了这些Ppr10突变体的稳定性,Ppr10突变体与Mpa1的互作以及Ppr10突变体的功能。本文研究发现,C-末端截短ppr10结果显示,在甘油培养基上(促进有氧呼吸),截短到第9号类PPR模体,不影响突变菌株的生长,不影响Ppr10突变体表达水平,并且不影响Ppr10突变体与Mpa1的相互作用。截短到第8号类PPR模体,严重影响突变菌株的生长,严重影响了Ppr10蛋白表达水平,并破坏了Ppr10突变体与Mpa1的相互作用。敲除单一类PPR模体的结果显示,分别缺失1-4号类PPR模体不影响Ppr10与Mpa1的相互作用,但影响突变菌株的生长;分别缺失5-8号类PPR模体破坏了Ppr10与Mpa1的相互作用,并且影响突变菌株的生长;分别缺失9-12号类PPR模体影响了Ppr10与Mpa1的相互作用,但不影响突变菌株的生长。本文研究表明,Ppr10的N端编码的包含320个氨基酸的蛋白能够正常表达,并且Ppr10能够正常发挥功能;Ppr10的13个类PPR模体中,1-8号类PPR模体对于Ppr10正常发挥功能是至关重要的,5-8号类PPR模体对Ppr10与Mpa1相互作用是必不可少的,9-12号类PPR模体对于Ppr10和Mpa1的相互作用很重要。本文为后继进一步研究Ppr10的结构与功能打下了基础。
【学位授予单位】：南京师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：Q78
【图文】：

PPR模体结构结构图

图 3 预测类 PPR 模体序列Figure 3 Sequences of PPR-like motifsA 图：Ppr10 的类 PPR 模体序列比对，每个类 PPR 模体为 35aa，；B 图：类 PPR 模体序列 logo

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本文编号：2737037