Slingshot N端结构域自抑制机制及其被F-actin激活机制的研究

发布时间：2020-12-10 20:10

　　丝切蛋白磷酸酶Slingshot属于I型酪氨酸磷酸酶家族（Protein Tyrosine Phophotase,PTP）中的双特异性磷酸酶（Dual-specificity phosphatase,DUSP）家族,双特异性磷酸酶家族不同与经典型的蛋白酪氨酸磷酸酶家族,它们既能够去磷酸化酪氨酸（pY）,又能够去磷酸化丝/苏氨酸（pS/T）。目前被报道已知的Slingshot特异性底物是磷酸化的丝切蛋白（p-Cofilin）;Slingshot可以通过调节底物Cofilin的去磷酸化来影响肌动蛋白（F-actin）的聚合与解离,从而参与细胞骨架动力学;另一方面,F-actin会与Slingshot磷酸酶上的某些特定氨基酸或是结构域相结合,从而极大提高Slingshot磷酸酶的活力。最近的研究发现,在一些癌症,阿尔兹海默病及某些血管性疾病中都检测到了 Slingshot磷酸酶的活性异常升高;尽管Slingshot2（SSH2）催化结构域晶体结构在2006时年就被解析出,但目前关于SSH2磷酸酶更为全面深入的底物催化机制及如何被F-actin激活的相关机制并没有详细的说明。一、研究目的:1.... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【部分图文】：

图１．２不同磷酸酶ＷＰＤ－ｌｏｏｐ的状态［６］

Ｙｅｒｓｉｎｉａ?ＰＴＰ中Ｔ４１０可能参与了?Ｅ－Ｐ的水解过程；此外序歹！Ｊ分析还存在一个保??守的谷氨酸Ｑ４４６，有利于Ｅ－Ｐ水解过程中对亲核攻击Ｈ２０分子的位置的正确??放置（图１＿４）。??＾?ｋ?ｋ??Ｅ?＋?ＡｒＯＰＯ＾?－＾ｓ？＾?Ｅ?■?ＡｌＯＰＯｒ＇?Ｅ－Ｆ?——Ｅ?＋Ｈ０Ｐ０３２＇??ｋ｜?＞??ＡｒＯＨ??图１．３磷酸酶催化步骤［３０】??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ?ｃａｔａｌｙｔｉｃ?ｓｔｅｐｓ??２４??

?￡？Ｐｉ??Ｅ－Ｐ?Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ??图１．４耶尔森氏菌磷酸酶催化反应的化学机理??Ｆｉｇｕｒｅ?１．４?Ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ａｎｄ?ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ?ｓｔａｔｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?Ｙｅｒｓｉｎｉａ?ＰＴＰ?ｒｅａｃｔｉｏｎ??１．１．２．１蛋白酪氨酸磷酸酶催化作用的结构基础??尽管ＰＴＰ之间一级氨基酸序列的不同或活性中心底物的差异，但这种催化??机制适用于所有的ＰＴＰ成员，可以从结构数据上得到支持。ＰＴＰ由ａ＋Ｐ类型域??组成，其中四个平行的Ｐ－折叠形成的核心被ａ－螺旋包围在中间［２８］，活性中心??ＨＣｘｘＧｘｘＲＳ?（Ｔ）（图１．５红色）在ｐ－折叠末端以ＨＣ结束，ａ－螺旋以ＲＳ开始，??这些氨基酸形成磷酸底物结合口袋。在活性中心底部亲核分子半胱氨酸Ｃｙｓ，??精氨酸Ｒ?（图１．５绿色和蓝色）胍基向活性中心折叠协助磷酸底物的结合和催??化。位于半胱氨酸的氨基末端大约３０－４０个残基后是天冬氨酸（图１．５金色），??位于ＷＰＤ－ｌｏｏｐ环上（图１．５黄色）当酶与底物结合时构象会发生变化［３２］。活??性中心的Ｐ－ｌｏｏｐ和ＷＰＤ－ｌｏｏｐ对于底物结合和催化很重要，在ＰＴＰ超家族的所??有成员中


本文编号：2909301