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利用转基因家蚕丝腺表达重组hVEGF165的研究

发布时间:2020-12-30 15:19
  鳞翅目昆虫家蚕(Bombyx mori)是重要的产丝昆虫,至今已被人类饲养利用逾5000年。家蚕丝腺是合成和分泌蚕丝蛋白的专一场所(一头家蚕可生产约0.5克丝蛋白),是蚕丝业最为核心的生物学基础。近些年来,随着生物技术的蓬勃发展,特别是近年在家蚕基因组计划的推动下,人们对丝腺高效合成与分泌丝蛋白的分子机制有了深入了解,同时也注意到家蚕不仅能用于产丝织绸,其丝腺还是一个理想的生物反应器。2003年,日本学者首次报道了利用转基因家蚕丝腺表达重组人Ⅲ型胶原蛋白,其后,国内外学者利用转基因家蚕丝腺已成功表达了数十种外源蛋白,少数重组蛋白素材已进入中试或产业化生产阶段,表明利用家蚕丝腺作为生物反应器生产重组蛋白,有着巨大的开发应用潜力。人血管内皮生长因子(human vascular endothelial growth factor,hVEGF)是一种对内皮细胞具有高度特异性的有丝分裂原,在血管再生和血管发生中起着重要作用。hVEGF165是hVEGF-A亚型中组织表达频率最高、最具生理相关性的一种异构体,在外周缺血性疾病或慢性伤口的治疗性血管再生研究中效果显著。目前,重组hVEGF165蛋白... 

【文章来源】:西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

利用转基因家蚕丝腺表达重组hVEGF165的研究


丝腺表达系统示意图

三维结构


图 3 VEGF 的三维结构[59]Figure 3 The three-dimensional structure of VEGF是新生血管网络的形成,在胚胎发育,器官稳态和疾病进程中具血管发成主要由几种不同的生长因子及其相关的受体酪氨酸激es,RTKs)调控。其中最为重要的是血管内皮生长因子(VEGF)体(Vascular Endothelial Growth Factor Receptors,VEGFR)。VEGvascular permeability factor,VPF),是内皮细胞生理的重要调节因大小在 34-42kDa 的由二硫键结合的二聚体糖蛋白[60],在成人正上腺中 VEGF-A 的 mRNA 表达水平最高,而在肝、脾和胃粘膜,但仍可轻易检测。VEGF-A 基因由 7 个内含子和 8 个外显子组的剪切从而产生不同的异构体[61,62]。VEGF-A 至少存在 7 个同型由 121,145,148,165,183,189 和 206 个氨基酸组成(图 4),编码的氨基酸在除 VEGF148 以外的所有亚基中都是保守的,而 6 和第 7 外显子中,它们编码两个不同的肝素结合区,这些结构

结构比较,家族,成员


图 4 VEGF 家族各成员的结构比较[63]Figure 4 Comparison of structures of the VEGF family皮生长因子受体(Vascular Endothelial Growth Factor Receptors,VEGFR),-like tyrosine kinase,Flt-1)[67],VEGFR-2(kinase domain rFlt-4)[69],它们均属于受体酪氨酸激酶超家族膜蛋白。其共白同源区重复序列,一个跨膜结构域和一个分裂酪氨酸激酶EGFR-1 和 VEGFR-2,VEGF-B 和 PIGF 结合 VEGFR-1,VE但是 VEGF-C,D 经过蛋白酶裂解后也可与 VEGFR-2 结合成员可与非酪氨酸激酶受体(non-tyrosine kinase receptors,为是 VEGFR2 的共受体[71]。中,VEGFR-1 和 VEGFR-2 表达水平最高,在调节血管ECs)的增殖,迁移中起着重要作用。在不同的 VEGF 配体中中的作用最为清楚。VEGFR-2 主要表达在血管和淋巴管

【参考文献】:
期刊论文
[1]家蚕转基因技术中若干因素对转基因效率的影响[J]. 马三垣,徐汉福,段建平,赵爱春,张美蓉,夏庆友.  昆虫学报. 2009(06)



本文编号:2947865

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