污染物胁迫下微生物VBNC状态的形成及Rpf复苏环境功能菌种的研究

发布时间：2021-03-05 01:09

　　活的但非可培养（viable but non-culturable,VBNC）状态作为微生物抵御不良环境的生存机制,在污染环境中普遍存在。绝大多数微生物因进入VBNC状态而无法分离培养且难以发挥其污染物降解功能。研究VBNC状态的复苏培养、挖掘其潜在的环境功能具有重要意义。但目前针对VBNC状态的研究主要集中在医学领域,对于自然环境中功能型VBNC状态菌的相关文献较少。鉴于此,本研究首次从环境污染角度探究在高浓度污染物（苯酚）诱导下,苯酚降解真菌可培养性能、形态、生理生化及功能的变化,并测定去除苯酚胁迫后,其苯酚降解及可培养性能的恢复。其次,本研究利用金属亲和层析的方法获得纯化的复苏促进因子（resuscitation promoting factor,Rpf）,依据Rpf蛋白的氨基酸排列顺序构建其蛋白空间结构从而确定溶菌酶样结构域,并通过酶谱分析和肽聚糖水解酶活性分析探究Rpf蛋白对VBNC状态菌的复苏促进作用。最后,以高氨氮废水为富集源,分离培养、鉴定Rpf蛋白添加组的特有菌株,筛选出高效好氧反硝化菌并测定其脱氮性能,以挖掘复苏菌种降解污染物的潜能。研究结果如下:（1）分离筛选获得... 

【文章来源】：浙江师范大学浙江省

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

II型毒素抗毒素（TA）机制[62]

本研究的技术路线图

2高浓度苯酚胁迫下苯酚降解菌VBNC状态的形成及机理研究20表2-1菌株LN1的IlluminaWGS全基因组信息和质量Table2-1InformationandqualityofIlluminawhole-genomesequencingofthestrainLN1.R1R2SampleR1_readsR1_basesQ20Q30R2_readsR2_basesQ20Q30LN153504397945714670.98670.952953504397927512100.98000.9346图2-1序列库组装的可视化。程序集中的序列被描绘成圆形，其直径与序列长度成比例，并用不同颜色进行分类注释Fig.2-1Visualizationoftheassemblyofsequencinglibrary.Sequencesintheassemblyaredepictedascircles,withdiameterscaledproportionaltosequencelengthandtaxonomicannotationwithdifferentcolor为了进一步确定菌株LN1的分类，依据其基因序列构建系统发育树。结果如图2-2所示，菌株LN1归属于Debaryomycetaceae家族中Candida的可能性最大，而且它是C.tropicalisMYA-3404的一个亚种，与C.viswanathiiATCC20962,

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]多氯联苯污染环境样品中非可培养状态菌的复苏及形成机理研究[D]. 苏晓梅.浙江大学 2016



本文编号：3064289