静态及剪切力下BMSCs-HUVECs共培养物成骨分化和血管生成及机制研究

发布时间：2021-03-06 11:09

　　将体外构建的工程骨预血管化可降低其内部的传质限制,促进骨修复。在基于内皮细胞的工程骨血管化策略中,通过将间充质干细胞和内皮细胞进行体外共培养支持构建物成骨分化和血管生成。但在共培养研究中,尤其是在成骨诱导条件下,对两种细胞间的相互作用及相关分子机制认识尚不清楚。此外,体内骨组织中存在机械刺激,其中流体剪切力（Fluid shear stress,FSS）是骨组织中调控间充质干细胞成骨分化和内皮细胞血管生成的重要因素,但目前FSS刺激对体外共培养物成骨和成血管影响的研究刚刚起步。本研究以大鼠骨髓来源的间充质干细胞（Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）和人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial,HUVECs）为研究对象,考察生长培养基（Growth medium,GM）和成骨诱导培养基（Osteogenic induction medium,OIM）对BMSCs-HUVECs共培养体系成骨分化以及血管生成的影响,探究OIM下BMSCs对HUVECs成血管和FSS刺激对共培养体系成骨分化的... 

【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．１在ＧＭ和ＯＩＭ条件下ＢＭＳＣｓ单培养和ＢＭＳＣｓ－ＨＵＶＥＣｓ共培养成骨分化??

第２０页?华东理工大学硕士学位论文??２．３．２培养基对ＢＭＳＣｓ单培养及ＢＭＳＣｓ－ＨＵＶＥＣｓ共培养物基因表达影响??为了考察ＢＭＳＣｓ单培养和ＢＭＳＣｓ－ＨＵＶＥＣｓ共培养物中成骨与成血管相关基因的??表达，本实验使用ｑＲＴ－ＲＣＲ分析在ＧＭ和ＯＩＭ中培养１、３、７和１４ｄ后相关基因的表??达情况。??结果如图２．２所示，在成骨诱导条件下，与ＢＭＳＣｓ单培养组相比，共培养组的成??骨标志基因办似２和（９你ｒ／ｘ显著上调（Ｐ＜０．０５），ｃｏ／／ａｇｅ？?／基因表达水平在１?ｄ??和３ｄ显著升高（ＰＣ０．０５），而ＭＺ和ＯＣ＃的基因表达在７ｄ和１４ｄ显著上调（Ｐ＜??０．０５）。此外，成骨诱导条件下，共培养组成骨标志基因的表达水平明显高于生长条件??下的共培养组（ＰＣ０．０５）。基因表达水平检测的结果证明，在成骨诱导条件下与ＨＵＶＥＣｓ??共培养能显著促进ＢＭＳＣｓ的成骨能力。??大量研宂表明ＶＥＧＦ－Ａ和趋化因子Ｃｘｃｌ９、Ｃｘｃｌｌ２对成骨和血管生成至关重要［４１］。??由图２．２可见，１４ｄ内，成骨诱导条件下共培养组中趋化因子Ｃｘｃ／７２的基因表达要显著??低于ＢＭＳＣｓ单培养和ＧＭ组（Ｐ＜０．０５）。第１、３ｄ时，与ＧＭ组相比，成骨诱导条??件下共培养组中Ｃｃｃ／９和叹有更高的基因表达（Ｐ＜０．０５）。??ＡＬＰ?Ｃｏｔｉａｇｅｎ?Ｔ?纪??Ｗ－ｊ?５．?（Ｈｉ?５．０－??［ＩＩ?，．?ｈ?＾?＃?ｙ?＼ｒ?｛！－?＃?＃?ｉ?＾??ｊｌｉｙ?．Ｉ?Ｉ?ｊ，『ｉｕＭｉ?＂Ｈｉｉｉ?ｉ？ｌ?Ｊ?ｙ??１?ａ?７?１４?１?３?７?１４?ｔ?３?７?１４??Ｔｉｍｅ?（ｄａｙｓ）?

图２．５间接共培养中Ｃｘｃｌ９对ＨＵＶＥＣｓ增殖的影响??Ｆｉｇ．２．５?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｃｘｃｌ９?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ??

【参考文献】：
期刊论文
[1]剪切力和拉伸应力对血管内皮细胞的影响[J]. 王艺璇,蔡军.  中国医学前沿杂志(电子版). 2012(08)
[2]平行平板流动腔的研究进展[J]. 唐婉容,王璐.  口腔材料器械杂志. 2012(02)

博士论文
[1]ERK5信号通路在流体剪切力调控成骨细胞力学信号转导中的机制研究[D]. 姜金.兰州大学 2016



本文编号：3066990