生物合成10-HDA关键酶分子的克隆及工程菌构建研究
发布时间：2021-03-07 11:42
10-羟基-2-癸烯酸（10-HDA）是一种同时具有双键、羟基的中链脂肪酸衍生物,仅存在蜂王浆中,具有抗菌、抗炎、免疫调节、神经调节、抗癌、抗肿瘤等作用,有很高的药用价值。目前10-HDA来源单一,直接提取法难以满足需求;化学合成法具有不可避免的缺点,比如:生产条件苛刻,易产生污染等,所以需要探求新的合成方法。分析其结构式可知羟基和双键是其中两个特殊的官能团,明确这两个官能团的形成过程对研究10-HDA的生物合成具有重要意义。本研究提出了构建10-HDA生物合成途径思路,即以癸酸为底物,在P450酶的作用下末端羟基化生成10-羟基癸酸,10-羟基癸酸在硫激酶的作用下加上辅酶A,然后在脂酰辅酶A脱氢酶的作用下在Cα和Cβ处脱掉两个氢原子形成反式双键,至此ω羟基和双键均形成。最后在硫酯酶的作用下脱掉辅酶A,形成10-HDA。（1）本实验首先克隆了四种来源的细胞色素P450酶:来自于巨大芽孢杆菌的细胞色素P450酶P450BM3,来自于枯草芽孢杆菌的细胞色素P450酶CYP102A1,来自于热带假丝酵母的细胞色素P450酶CY...
【文章来源】：齐鲁工业大学山东省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
0-HDA的结构式
全部可以对脂肪酸进行羟基化，底物主要是中链的不饱和脂肪酸。催化位置主要在 ω-1、ω酶发生羟基化反应的过程中有两个特点：一催化底物的速度不同，且差距很大；二是细体专一性。目前研究比较多的细胞色素 P450 素 P450 酶 P450BM3。研究表明，未经改造的和或不饱和脂肪酸具有催化作用，对其进行，对烷烃、环烷烃等均有活性。Carmichal[39]水性位点(R47L/Y51F)，这两个突变酶对环芳烃]等利用理性设计和定向进化相结合的方8Q，R47L/A74G/F87V/L188Q， V26T/R47F/到了扩展。其中第一个突变酶具有更广泛的底烷等生成相应的羟基化产物，且催化活性提子耦合率也提高了数百倍。来自枯草芽孢杆菌似性。
图 1.3 合成 α，β-不饱和脂肪酸的新方法Fig.1.3 The new method of synthesis α, β-unsaturated carboxylic acids肪酸的应用酸的特性来源于其中的羟基，因具有羟基而得名，研究表的分子比非羟基脂肪酸反应活性更高。末端羟基脂肪酸可以业和医药意义的各种工业产品，包括粘合剂、润滑剂、化妆癌剂[66,67]。中长链末端羟基脂肪酸衍生物可作为合成具有生物塑料等聚合物的原材料[68,69]。这些聚合材料与别的生，具有极大的优越性，是至今为止最理性的生物可降解材合物对撞击、高温、化学腐蚀等具有更高的耐受性，而且解、生物相容性较好，植入体内后引起的组织学反应非常端羟基脂肪酸与其衍生物对肿瘤细的生长具有抑制作用，具抑制效果与碳链的数目和不饱和度息息相关。这就要求大量
【参考文献】：
期刊论文
[1]王浆酸的研究进展[J]. 张炎斌,陈忠忠,俞海东,张甲春. 广州化工. 2013(09)
[2]3-羟基脂肪酸生产及生理学应用研究现状[J]. 邹湘辉. 科技资讯. 2010(09)
[3]学习贯彻GB9697-2008《蜂王浆》国家标准的体会[J]. 胡元强. 蜜蜂杂志. 2008(10)
[4]蜂王浆中10-HDA的研究现状及前景展望[J]. 蔡柳,林亲录. 农产品加工(学刊). 2007(05)
[5]蜂王浆中10-HDA的研究进展[J]. 倪辉,杨远帆,彭莺. 中国蜂业. 2006(03)
[6]发酵液中提取10-HDA的研究[J]. 王腾飞,王海燕,刘洪玲,王乐,王瑞明. 酿酒科技. 2006(01)
[7]蜂王浆对大鼠力竭运动能力影响的实验研究[J]. 赵光,解黎明. 四川体育科学. 2003(01)
[8]蜜蜂生物学理论的运用与实践[J]. 匡邦郁,匡海鸥,刘意秋,周丹银,赵灵芝. 蜜蜂杂志. 2000(03)
[9]蜂王浆抗衰老探秘[J]. 郭芳彬. 中国养蜂. 1998(06)
[10]10－羟基－2－癸烯酸对小鼠T淋巴细胞及其亚型和白介素2产生的影响[J]. 王国燕,林志彬. 中国药理学与毒理学杂志. 1996(01)
硕士论文
[1]蜜蜂细胞色素P450基因的表达与功能研究[D]. 武雪龙.齐鲁工业大学 2017
本文编号：3069023
【文章来源】：齐鲁工业大学山东省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
0-HDA的结构式
全部可以对脂肪酸进行羟基化，底物主要是中链的不饱和脂肪酸。催化位置主要在 ω-1、ω酶发生羟基化反应的过程中有两个特点：一催化底物的速度不同，且差距很大；二是细体专一性。目前研究比较多的细胞色素 P450 素 P450 酶 P450BM3。研究表明，未经改造的和或不饱和脂肪酸具有催化作用，对其进行，对烷烃、环烷烃等均有活性。Carmichal[39]水性位点(R47L/Y51F)，这两个突变酶对环芳烃]等利用理性设计和定向进化相结合的方8Q，R47L/A74G/F87V/L188Q， V26T/R47F/到了扩展。其中第一个突变酶具有更广泛的底烷等生成相应的羟基化产物，且催化活性提子耦合率也提高了数百倍。来自枯草芽孢杆菌似性。
图 1.3 合成 α，β-不饱和脂肪酸的新方法Fig.1.3 The new method of synthesis α, β-unsaturated carboxylic acids肪酸的应用酸的特性来源于其中的羟基，因具有羟基而得名，研究表的分子比非羟基脂肪酸反应活性更高。末端羟基脂肪酸可以业和医药意义的各种工业产品，包括粘合剂、润滑剂、化妆癌剂[66,67]。中长链末端羟基脂肪酸衍生物可作为合成具有生物塑料等聚合物的原材料[68,69]。这些聚合材料与别的生，具有极大的优越性，是至今为止最理性的生物可降解材合物对撞击、高温、化学腐蚀等具有更高的耐受性，而且解、生物相容性较好，植入体内后引起的组织学反应非常端羟基脂肪酸与其衍生物对肿瘤细的生长具有抑制作用，具抑制效果与碳链的数目和不饱和度息息相关。这就要求大量
【参考文献】：
期刊论文
[1]王浆酸的研究进展[J]. 张炎斌,陈忠忠,俞海东,张甲春. 广州化工. 2013(09)
[2]3-羟基脂肪酸生产及生理学应用研究现状[J]. 邹湘辉. 科技资讯. 2010(09)
[3]学习贯彻GB9697-2008《蜂王浆》国家标准的体会[J]. 胡元强. 蜜蜂杂志. 2008(10)
[4]蜂王浆中10-HDA的研究现状及前景展望[J]. 蔡柳,林亲录. 农产品加工(学刊). 2007(05)
[5]蜂王浆中10-HDA的研究进展[J]. 倪辉,杨远帆,彭莺. 中国蜂业. 2006(03)
[6]发酵液中提取10-HDA的研究[J]. 王腾飞,王海燕,刘洪玲,王乐,王瑞明. 酿酒科技. 2006(01)
[7]蜂王浆对大鼠力竭运动能力影响的实验研究[J]. 赵光,解黎明. 四川体育科学. 2003(01)
[8]蜜蜂生物学理论的运用与实践[J]. 匡邦郁,匡海鸥,刘意秋,周丹银,赵灵芝. 蜜蜂杂志. 2000(03)
[9]蜂王浆抗衰老探秘[J]. 郭芳彬. 中国养蜂. 1998(06)
[10]10－羟基－2－癸烯酸对小鼠T淋巴细胞及其亚型和白介素2产生的影响[J]. 王国燕,林志彬. 中国药理学与毒理学杂志. 1996(01)
硕士论文
[1]蜜蜂细胞色素P450基因的表达与功能研究[D]. 武雪龙.齐鲁工业大学 2017
本文编号：3069023
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3069023.html
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