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转化生长因子β1诱导肺支气管上皮细胞发生上皮间质转化

发布时间:2021-03-20 21:06
  目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对人肺支气管上皮细胞(HBEC)的细胞形态和上皮间质转化(EMT)标志基因表达的影响。方法:TGF-β1处理HBEC 0、1、2、3、4和5 d,观察细胞形态;运用免疫荧光实验,观察TGF-β1处理HBEC 4 d时的细胞骨架;TGF-β1分别处理0、1、3、6 h和0、1、2、3、4、5 d,提取总RNA后反转录并进行实时荧光定量PCR检测EMT标志基因α-SMA、β-catenin、SNAI1和E-cadherin的mRNA表达情况。结果:TGF-β1处理HBEC 2 d时就能够引起类似EMT的形态改变,在处理3、4和5 d时细胞形态改变尤为明显,大多数细胞变为纺锤形;免疫荧光实验结果显示,细胞骨架的分布随细胞形态发生改变;实时荧光定量PCR结果显示,SNAI1在3 h和Ecadherin在6 h的mRNA表达量显著升高;α-SMA和β-catenin的mRNA表达量在各时间点均显著降低;SNAI1和Ecadherin的mRNA表达量在1 d时显著升高,随后各时间点mRNA表达量都呈现不同程度的下降,SNAI1在3和4 d时mRNA表达量显... 

【文章来源】:生物技术通讯. 2020,31(01)

【文章页数】:5 页

【部分图文】:

转化生长因子β1诱导肺支气管上皮细胞发生上皮间质转化


TGF-β1诱导HBEC形态变化

细胞骨架,时间点,荧光定量PCR,程度


利用实时荧光定量PCR检测TGF-β1处理细胞0、1、2、3、4和5 d的mRNA表达量。如图4所示,与对照组相比,SNAI1在1 d时的mRNA表达量极显著上升,而后各时间点的mRNA表达量都呈现不同程度的下降,2、4和5 d的mRNA表达量显著下降;α-SMA在1 d时的mRNA表达量极显著上升,而后各时间都呈现不同程度的下降,3和4 d的mRNA表达量显著下降;E-cadherin在2、3和5 d的mRNA表达量都显著下降;β-catenin的mRNA表达量在不同时间点均无显著变化。图3 TGF-β1处理HBEC 0~6 h EMT标志基因mRNA的表达量

细胞骨架,基因


TGF-β1处理HBEC 0~6 h EMT标志基因mRNA的表达量

【参考文献】:
期刊论文
[1]ZEB家族调节上皮-间质转化的作用机制[J]. 沈灵,辛天池,李明发.  细胞生物学杂志. 2009(06)

博士论文
[1]GLIPR-2促进Ⅱ、Ⅲ型EMT的作用和机制研究[D]. 黄绍光.第三军医大学 2013

硕士论文
[1]人结直肠癌相关成纤维细胞和结肠正常成纤维细胞对结直肠癌细胞EMT的影响及机制[D]. 聂倩倩.浙江大学 2016



本文编号:3091668

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