人脐带间充质干细胞对HaCaT细胞增殖与迁移的影响

发布时间：2021-04-02 03:19

　　目的探讨人脐带间充质干细胞（hucMSCs）对人表皮角质形成细胞增殖与迁移的影响及其可能机制。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法从新生儿脐带中分离制备hucMSCs,用流式细胞术鉴定P3代hucMSCs表面标记抗原,用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行间充质干细胞三向分化能力鉴定;以人表皮角质细胞系HaCaT为研究模型,在transwell上室接种P3代hucMSCs进行共培养,显微镜观察24、48和72 h时HaCaT的细胞形态,CCK8法检测细胞增殖状况,划痕法检测细胞12 h和24 h迁移率,qRT-PCR法测定HaCaT细胞迁移、增殖相关生长因子KGF-2、FGFR-2、TGF-β1,以及细胞外基质蛋白Fibronectin、MMP-1和Collagen Ⅰ mRNA表达水平。结果 hucMSCs呈成纤维细胞样贴壁生长,其表面间充质干细胞标志性抗原CD105、CD90、CD73阳性表达率分别为98.35%、99.97%和99.94%,不表达CD45、CD34、CD14和CD19,在诱导培养16d后出现明显的成脂、成骨和成软骨细胞特性。hucMSCs共培养24、48和72 h,... 

【文章来源】：中国医药生物技术. 2020,15(03)

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

huc MSCs表面标志性抗原流式鉴定结果（A：总细胞散点分布；B：活性细胞；C：阴性对照；D～F:CD105+、CD90+、CD73+细胞比例；G：阳性细胞比例）

图5 huc MSCs共培养对HaCaT细胞迁移的影响（A:huc MSCs共培养12 h、24 h细胞向划痕区域迁移状况；B:huc MSCs共培养12和24 h时细胞划痕区面积的变化；*P<0.05)3 讨论

将hucMSCs处理组与对照组的A450作差，再与对照组A450作比，计算HaCaT细胞存活率的增加比例。结果显示（图4、表2),hucMSCs与HaCaT共培养24、48和72 h,Ha Ca T细胞存活率分别显著增加了20.42%(P<0.01）、36.30%(P<0.01）和27.31%(P<0.05），与形态学观察结果（图3）一致。提示hucMSCs共培养能够持续促进HaCaT细胞的增殖。图3 huc MSCs共培养对HaCaT细胞生长及形态的影响（×100)


本文编号：3114483