hMSCs来源的外泌体对单核细胞增殖和分泌炎性因子的影响

发布时间：2021-04-03 19:45

　　目的研究人间充质干细胞（hMSCs）来源的外泌体对单核细胞增殖和分泌炎性因子的影响,初步探讨外泌体的免疫调节功能。方法离心法培养hMSCs,收集培养的hMSCs上清液,利用试剂盒提取外泌体,电镜下观察其结构,Western blot检测其CD63和CD81的表达水平。密度梯度离心法分离外周血单核细胞,在培养的单核细胞中加入外泌体,MTT法检测单核细胞的增殖情况,流式细胞仪检测其凋亡情况,ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）及白介素-8（IL-8）的分泌量。结果 hMSCs来源的外泌体在透射电镜下呈小球状,Western blot显示外泌体CD63和CD81表达阳性。MTT检测显示,在LPS的刺激下,单核细胞增殖增加;加入外泌体后单核细胞的增殖受到抑制。流式细胞仪检测结果表明外泌体具有促进单核细胞凋亡的作用。ELISA检测结果表明,外泌体能够抑制炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-8的分泌。结论 h MSCs来源的exosmes能够抑制单核细胞的增殖并促进其凋亡,同时抑制了单核细胞分泌炎性因子TNF-α、I... 

【文章来源】：安徽医科大学学报. 2020,55(07)北大核心

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【部分图文】：

外泌体的鉴定

在LPS的刺激下,单核细胞增殖增加,生长曲线呈典型的“S”型;而加入外泌体后单核细胞的增殖受到抑制。终浓度为1 mg/L 的外泌体对单核细胞增殖的抑制作用不明显;终浓度为10、50和100 mg/L的外泌体均能抑制单核细胞的增殖,随着浓度的增加,抑制作用明显,显示剂量依赖性,差异有统计学意义。见图2。2.3 外泌体对单核细胞凋亡的影响

hMSCs来源的外泌体具有促进单核细胞凋亡的作用,实验组(图3A)的早期凋亡率(B4:13.8%)、晚期凋亡率(B2:9.5%)以及总凋亡率(B2+B4:23.3%)均高于对照组(图3B)。图4 ELISA检测外泌体对单核细胞分泌炎性因子的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]采用高速离心及ExoQuick-TC法提取小鼠骨髓间充质干细胞来源外泌体比较及鉴定[J]. 韩金秀,李宏远,撒亚莲,严丹,贺继刚.  安徽医科大学学报. 2017(04)
[2]MicroRNA-29a在脂多糖诱导人单核细胞凋亡中的作用和机制[J]. 熊旭明,张振辉,江子欣,陈伟燕,杨其霖,刘卫江.  中华急诊医学杂志. 2013 (01)



本文编号：3116970