人间充质干细胞成软骨分化中DNA甲基化调控X型胶原表达

发布时间：2021-04-18 01:11

　　目的在人间充质干细胞（hMSCs）诱导成软骨分化过程中,探讨X型胶原与其启动子甲基化状态之间的关系,为揭示表观遗传学调控参与成软骨分化的可能机制提供理论基础。方法收集6例来源于深圳市第二人民医院脊柱外科患者的腰椎椎体骨髓间充质干细胞为研究对象,运用离心沉淀法进行细胞微球培养,用含有转化生长因子β3（TGF-β3）及2%胎牛血清（FBS）的高糖细胞培养基（DMEM）进行成软骨诱导并作为实验组（3例）;在该诱导液中加入5’-氮杂胞苷（5’-AZA）作为诱导组（3例）;不含TGF-β3的2%胎牛血清的高糖细胞培养基的为对照组（3例）。在分化3 d后进行定量PCR,检测成软骨分化相关基因表达以及X型胶原启动子区域甲基化改变情况,采用方差分析及多样本间的均数比较（q检验）分析基因水平表达差异;组间DNA甲基化水平差异采用Kruskal-Wallis检验统计学差异。结果通过生物信息学预测X型胶原的启动子区域可能存在CpG富集区域,在含有5’-氮杂胞苷的成软骨诱导分化过程中,X型胶原表达逐渐上升,与对照组相比差异具有统计学意义（F=37.526,P <0.001）,而X型胶原启动子区域的甲基化... 

【文章来源】：中华关节外科杂志(电子版). 2020,14(02)CSCD

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【部分图文】：

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中华关节外科杂志（电子版）２〇２〇?年?４?月第?Ｉ４?卷第?２?期?Ｃｈｉｎ?Ｊ?Ｊｏｉｎｔ?Ｓｕｒｇ（Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ?Ｅｄｉｔｉｏｎ），Ａｐｒｉｌ?２〇２〇，Ｖｏｌ．?Ｍ，Ｎｏ．?２??？?１７１?？??０．０??？??对照组?诱导组?诱导组＋５’－ＡＺＡ??图２?Ｃｄ－Ｘａｌ，倉动子Ｋ＿域餅ＣｐＧ．島甲碁租比率比较．。图．Ａ为Ｍ－Ｘａｌ廢戰子Ｊｉ雜约ｌＯＯＯｂｐ?興及韻國Ｂ为３０??个克隆子经测序显示Ｃ〇ｌ－Ｘａｌ启动子区域的旮６岛＿．蠢彻謹＿蔡；图Ｃ为比较咨组．闻Ｃｏｌ－Ｘａｉｇ着子Ｋ獄的ＣＰＧ岛ｆ?＿化??率，对照组部．诱審组ｔｉ？?＝?１１．?０６６，Ｐ?＞０．０５》，》．．＃照组与诱＿?＋ＭＡＺＡ祖比较＜〇．?０５＞??有研究翁萌在某些情况下，腿Ａ申基化抑制的??效車可能取决于申基化ＣＰＧ位点的总数Ｄｅ＿１１］，但??有几项研寃清楚地表明，早个ＣＰＧ位点的去甲基化??对于允许基因表达可能是决定性的￥在稀疏时??ＣｐＧ，皂动子中，基因组区域的完全脱甲盡化对于允??许转录不是必需的。但仍有另外一种可能性，针？对??软骨调节蛋白启动子的分析表明，ＤＮＡ甲基化和组??蛋白乙酰化均与转录调控均有关［１２＿１３］。组蛋白乙??酰化也参与了软骨细胞肥大的減节，，因此也可能存??在Ｃｏｌ－Ｘａｌ表达受祖蛋白乙酰化调节＊但是，需ｇ??进一步的研究怔实这种可能性＆??在轶骨分化过程中，甲基化水平进一步阵低，这??可能是由于复制过程中子代ＤＮＡ链甲基化的抑制??所致。因此甲棊化永平降低与细胞生长也有关，这??是由于分化过程中细胞群体的甲塞化丧失所致ｓ??同样也需要对生长板中的肥大软脅细胞进行分析，??ＡＡＴＴＴ


本文编号：3144501