微小RNA-485-5p通过靶基因DHRS3调控骨髓间充质干细胞增殖和分化

发布时间：2021-04-18 05:23

　　目的研究miR-485-5p和脱氢酶/还原酶3（DHRS3）在骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖和分化中的表达和作用。方法将细胞分为第1转染组、第2转染组、第3转染组和第4转染组,分别用anti-miR-con、anti-miR-485-5p、si-con和si-DHRS3分别转染/共转染BMSCs细胞。转染9 d后,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞存活率,实时荧光定量-聚合酶链式反应检测各组细胞中miR-485-5p和DHRS3 mRNA的表达,Western blot检测DHRS3、成骨分化蛋白标志物核心结合蛋白因子2（RUNX2）、骨钙蛋白（OCN）和骨形态发生蛋白2（BMP2）,增殖蛋白周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）和细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）,Notch受体1（Notch 1）、Notch配体（Jagged1）和Split多毛增强子1（Hes1）蛋白的表达。结果第1转染组、第2转染组、第3转染组和第4转染组的细胞存活率分别为（100.58±10.09）%,（132.50±11.45）%,（135.62±12.66）%和（110.96±9.58）%;DHR3蛋... 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020,36(13)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养和成骨定向分化
        2.2 细胞转染前分组与给药方法
        2.3 细胞转染[4]
    3 检测指标
        3.1 qRT- PCR检测RNA的表达
        3.2 MTT法测定细胞存活率
        3.3 Western blot检测蛋白表达
        3.4 双荧光素酶报告系统实验
    4 统计学处理
结 果
    1 BMSCs定向分化培养后细胞中RUNX2、OCN和BMP2表达
    2 BMSCs定向分化培养后细胞中miR-485-5p低表达和DHRS3高表达
    3 miR-485-5p靶向调控DHRS3的表达
    4 转染后BMSCs增殖情况
    5 转染后BMSCs细胞中DHRS3、CDK4、Cyclin D1、RUNX2、OCN、BMP-2、Notch1、Jagged1和 Hes1的表达情况
讨 论



本文编号：3144891