抑瘤素M对人脐带间充质干细胞增殖和成骨分化的影响

发布时间：2021-04-26 09:43

　　目的:探讨抑瘤素M （OSM）对体外培养的人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）增殖及成骨分化的影响,阐明OSM是一种有效的成骨诱导活性因子。方法:体外培养hUCMSCs,流式细胞术检测第3代hUCMSCs表面标志物;CCK-8法测定不同剂量(0.1、1.0和10.0μg·L^-1)重组人抑瘤素M （rhOSM）处理后hUCMSCs的增殖活性。将hUCMSCs分为对照组、经典成骨诱导剂组和不同剂量(0.1、1.0和10.0μg·L^-1)rhOSM组,于成骨诱导第4、7和14天,采用BCIP/NBT法进行碱性磷酸酶（ALP）染色并定量检测细胞中ALP活性,茜素红染色法检测钙结节的生成情况并半定量分析细胞矿化活性,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测hUCMSCs中Runt相关转录因子2 （Runx2）和OCN mRNA表达水平。结果:hUCMSCs符合间充质干细胞（MSCs）鉴定标准。rhOSM处理hUCMSCs 72h,与对照组比较,10.0μg·L^-1 rhOSM组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）;处理96... 

【文章来源】：吉林大学学报(医学版). 2020,46(04)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞、主要试剂和仪器
    1.2 细胞培养
    1.3 流式细胞术鉴定hUCMSCs免疫表型
    1.4 CCK-8法检测hUCMSCs的增殖活性
    1.5 hUCMSCs成骨分化诱导培养
    1.6 BCIP/NBT法进行ALP染色和ALP活性检测
    1.7 茜素红染色法检测钙结节的生成及半定量分析细胞矿化活性
    1.8 实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测细胞中成骨分化相关基因mRNA表达水平
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 流式细胞术鉴定hUCMSCs表面标志物
    2.2 各组hUCMSCs增殖活性
    2.3 各组细胞ALP染色情况和ALP活性
    2.4 各组细胞矿化钙结节形成情况和细胞矿化活性
    2.5 各组细胞中Runx2和OCN mRNA表达水平
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]前列腺素E2诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中p38MAPK信号通路蛋白的表达[J]. 才忠民,王欢,尚平,王琦,李劼若.  郑州大学学报(医学版). 2020(01)
[2]骨髓间充质干细胞在基础医学及临床应用中的研究进展[J]. 李婷,陈莉智,黄文华.  中国医学物理学杂志. 2019(08)
[3]转化生长因子β3促进兔牙髓干细胞成骨向分化机制的初步研究[J]. 艾力麦尔旦·艾尼瓦尔,木合塔尔·霍加.  口腔医学. 2019(02)
[4]巴斯德毕赤酵母表达的人抑瘤素M发酵条件及发酵产物分析[J]. 孔宁,高海成,刘国民,陈月,周余来,颜炜群.  吉林大学学报(医学版). 2012(05)

博士论文
[1]BMP9通过MAPKs通路调控间充质干细胞成骨分化及其机制的初步研究[D]. 赵迎泽.重庆医科大学 2010



本文编号：3161195