产褐藻胶裂解酶交替单胞菌的发酵优化及alg2951的外源表达

发布时间：2021-05-07 09:53

　　褐藻胶裂解酶是制备生物活性寡糖的重要功能酶,在食品、农业、工业等行业中具有重要应用价值。本研究以交替单胞菌属新种HB161718为出发菌株,在单因素实验基础上,通过Box-Behnken设计及响应面法优化获得该菌的最佳产酶培养基:海藻酸钠7.23 g/L,蛋白胨7 g/L,NaCl 23.11 g/L,K₂HPO₄0.1 g/L,MgSO₄0.1 g/L,优化条件下酶活力为（54.28±3.47） U/mL,达到优化前的1.59倍。为进一步提高酶活性,通过分子生物学方法实现了褐藻胶裂解酶alg2951在大肠杆菌中的外源表达,纯化后的酶活性为636 U/mL,达到原始菌株酶活的18.6倍。本研究为褐藻胶裂解酶的工业生产提供了新的来源。 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2020,39(05)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 单因素实验
    1.2 Plackett-Burman实验设计与分析
    1.3 Box-Behnken中心组合实验设计
    1.4 优化培养基验证实验
    1.5 褐藻胶裂解酶的外源表达、纯化及活性检测
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 实验材料
    3.2 培养方法
    3.3 菌体生物量和酶活测定
    3.4 产褐藻胶裂解酶单因素优化实验
    3.5 Plackett-Burman实验设计
    3.6 Box-Behnken中心组合实验
    3.7 褐藻胶裂解酶的外源表达、纯化及活性检测


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]褐藻胶裂解酶分泌菌株的分离鉴定及Tamlana holothuriorum s12T中褐藻胶裂解酶的研究[D]. 周燕霞.山东大学 2016



本文编号：3173190