洋葱orf393基因线粒体定位表达载体构建及功能初探

发布时间：2021-06-18 16:18

　　通过转基因拟南芥表型分析对洋葱线粒体差异表达基因orf393的功能进行了初步研究。通过In-Fusion Cloning的方法,将基因orf393与编码线粒体定位的靶向肽序列Rf1b5’融合,构建了orf393基因的线粒体定位表达载体pROK2-Rf1b5’-orf393,通过花序浸染法成功转化至野生型拟南芥,获得了雄性育性降低的拟南芥转基因植株,转基因植株的雄蕊花丝变短,柱头表面光滑几乎没有花粉附着,花药颜色暗淡无法正常开裂,种荚短小皱缩、结实率低。亚历山大染色实验结果显示,转基因植株的花药中花粉量少,仅含有极少量的活性花粉。初步证明线粒体基因orf393与细胞质雄性不育有一定关系,为明确orf393参与洋葱细胞质雄性不育的分子机制提供了参考。 

【文章来源】：分子植物育种. 2020,18(18)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

重组质粒pROK2-Rf1b-orf393菌落PCR

表达载体pROK2-Rf1b5"-orf393的酶切验证

卡那霉素筛选压力试验

【参考文献】：
期刊论文
[1]洋葱S型细胞质雄性不育相关基因的挖掘及分子标记开发[J]. 陈立,杨亚会,霍雨猛,刘冰江,孙雨晴,杨建平,吴雄,杨妍妍.  园艺学报. 2018(03)
[2]细胞质雄性不育烟草orfB基因的PCR扩增与序列分析[J]. 陶瑶,王瑜,吴凌敏,谢丽娟,聂亚平,钟思荣,周玮,王建革,刘齐元.  基因组学与应用生物学. 2016(06)
[3]适于基因组测序的高纯度的大豆线粒体基因组DNA提取方法[J]. 李玉秋,张春宝,赵洪锟,谭化,费晓燕,赵丽梅,董英山.  基因组学与应用生物学. 2015(08)
[4]甘蓝Ogura胞质雄性不育系发生同源异型转化的分子机制研究[J]. 张强,张晓伟,原玉香,姚秋菊,赵艳艳,蒋武生,魏小春,王志勇.  河南农业科学. 2015(05)



本文编号：3236984