aurJ3M、aurT基因对金褐霉素生物合成的调控作用研究

发布时间：2021-06-28 15:54

　　金褐霉素（Aureofuscin）是由金褐链霉菌（Streptomyces aureofuscus）产生的一种次级代谢产物,属于四烯大环内酯类抗生素,具有抗真菌活性,有待应用在医疗卫生、食品加工等更广泛的领域。因其生物合成的调控机制尚未明确,金褐霉素的产量较低,限制其进一步应用,所以提高金褐霉素的产量成为重中之重。前期实验通过在金褐链霉菌中过表达aurJ3M基因,高效液相色谱（HPLC）分析检测发酵产物,金褐霉素产量提高5-6倍。本论文针对aurJ3M和aurT的功能和调控作用进行近一步研究。（1）生物信息学分析表明,在金褐链霉菌中存在属于PAS-LuxR家族的调控因子AurJ3M（EU697915.1）,构建aurJ3M基因敲除质粒pC1203-11599,通过发酵产物形态观察,HPLC测定aurJ3M基因敲除突变株（ΔaurJ3M）不能合成金褐霉素,初步证实aurJ3M基因对金褐霉素的生物合成起正向调控作用;进一步通过反转录PCR实验分析,与野生型菌株相比,在ΔaurJ3M中聚酮合成酶基因S0、S1和基因B、C、G、F、D均不发生转录,I、J、A基因转录水平显著降低,R、E、H基因... 

【文章来源】：辽宁大学辽宁省 211工程院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

过表达菌株S.aureofuscus♂aurT的MS接合转移子

第 3 章 aurT 基因对金褐霉素生物合成的影响图 3-16 aurT 上、下游同源臂 aurT-5、aurT-3 的克隆M:100bp DNA Marker;Lane 1-2:aurT 上游同源臂;Lane 3-4:aurT 下游同源臂获得的重组敲除质粒 pC1203-ΔaurT,图谱见图 3-17(a),经 XbaI 单酶切后能够得到 1290bp 的 aac(3)IV-OriT 片段，证明基因敲除质粒构建成功,单酶切电泳结果见图 3-17(b)。M 1 2 3 4700bp500bp

【参考文献】：
期刊论文
[1]两性霉素B合成基因簇及其组合生物学进展[J]. 张博,张海东,周奕腾,黄恺,柳志强.  科技导报. 2017(19)
[2]天然生物抗菌剂纳他霉素在食品中的应用及研究进展[J]. 宋雪健,张东杰,王洪江,李志江,于金池.  保鲜与加工. 2017(05)
[3]链霉菌抗生素生物合成的基因调控[J]. 黄敏红,刘田甜,陆群,田永强.  中国抗生素杂志. 2009(07)
[4]金褐霉素微生物检定法[J]. 王富金,武济民.  抗生素. 1980(05)
[5]一种新的抗真菌抗菌素——金褐霉素[J]. RESEARCH GROUP OF AUREOFUSCIN,SHANGHAI INSTITUTE OF MATERIA MEDICA(Shanghai).  微生物学报. 1975(03)

博士论文
[1]恰塔努加链霉菌中纳他霉素生物合成调控机制研究[D]. 杜艺岭.浙江大学 2011
[2]金褐霉素基因工程菌的构建及表达产物的纯化[D]. 魏杰.沈阳农业大学 2009



本文编号：3254611