重要猫病病毒非结构蛋白抑制宿主Ⅰ型干扰素应答的分子机制
发布时间：2021-07-19 12:45
截止2019年,我国宠物猫数量已达到7000多万只,宠物猫疫病防控面临了极大的挑战。临床上,以猫泛白细胞减少症病毒（FPV）引起的猫泛白细胞减少症和猫杯状病毒（FCV）引起的猫传染性鼻结膜炎最为流行。尽管对两种病毒病原学研究已经数十年。但它们对宿主天然免疫应答的影响却研究甚少。在本研究中,我们首先利用建立的猫干扰素信号通路研究平台证明了 FPV感染不能够激活宿主细胞Ⅰ型干扰素转录,并且可以拮抗仙台病毒（SeV）对宿主细胞Ⅰ型干扰素转录的激活作用。随后通过筛选FPV病毒蛋白,发现只有FPV NS2蛋白能够抑制宿主Ⅰ型干扰素的转录,并证明了 FPV NS2蛋白通过阻断IRF3信号通路抑制SeV诱导的IFN-β的产生。进一步研究表明FPV感染细胞后NS2蛋白通过结合宿主TBK1分子,抑制其被STING分子招募,从而阻止STING介导的TBK1对IRF3的磷酸化,达到抑制IRF3通路对I型干扰素转录激活的目的。在FCV的研究中,我们发现FCV 2280株具有拮抗IFN-β的抗病毒作用。FCV 2280感染抑制了 IFN诱导的ISRE启动子的激活和ISGs的转录。机理分析表明,FCV 2280感...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：84 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２直径２５ｎｍ无囊膜的ＦＰＶ衣壳原子模型问
中国农业科学院博士后出站报告?第一章绪论??Ｉ?，?．１??图１．３?ＦＣＶ病毒电镜观察图片和粒子模式图??Ｆｉｇ．?１．３?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＦＣＶ?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｐａｒｔｉｃｌｅ?ｍｏｄｅｌ．??１．２．２猫杯状病毒基因结构??ＦＣＶ的基因组为一条单股正链不分节段的ＲＮＡ分子，大小在７．７ｋｂ??左右，在其５’端结合有基因组链接蛋白ＶＰｇ，ＶＰｇ之后是５’ＵＴＲ，随后??是三个开放阅读框（Ｏｐｅｎ?Ｒｅａｄｉｎｇ?Ｆｒａｍｅ，〇ＲＦ），分别为０ＲＦ１、ＯＲＦ２??和０ＲＦ３。ＦＣＶ的ＯＲＦ１位于基因组ＲＮＡ的５’端，起始位点是从第２０??位到第５３１１位核苷酸，是位于５’１７０１后的第一个０１１？，０１１？１编码？（＾／??的非结构蛋白，ＯＲＦ１首先翻译出一个２００?ｋＤａ的多聚蛋白，随后在蛋??白酶聚合酶（Ｐｒｏｔｅａｓｅ?Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，ＰＰ）的作用下能够将多聚蛋白切割??成单独非结构蛋白，ＦＣＶ共有６个非结构蛋白，依次为５．６?ｋＤａ的ｐ５．６、??３２?ｋＤａ?的?ｐ３２、３８．９?ｋＤａ?的?ｐ３９?（ＮＴＰａｓｅ）、３０．１?ｋＤ?的?ｐ３０、１２．７?ｋＤａ??的?ＶＰｇ?和?７５．７?ｋＤａ?的?ｐ７６?（Ｐｒｏ－Ｐｏｌ）?［２９－３Ｑ］。ＦＣＶ?的?ＯＲＦ２?和?ＯＲＦ３?分??别编码主要结构蛋白ＶＰ１和次要结构蛋白ＶＰ２。ＶＰ１和ＶＰ２是经一条??亚基因组基因翻译得到的。ＯＲＦ２编码的衣壳蛋白前体大小约为７３?ｋＤａ，??被ＰＰ切割成一个１４ｋＤａ大小的衣壳蛋白前导区和衣壳蛋白成熟区ＶＰ１，??大量成熟的ＶＰ１加
扰素刺??激应答元件（ＩＳＲＥ）结合从而诱导千扰素刺激基因（ＩＳＧ）来源的几百??个基因的表达，使细胞建立起抗病毒免疫反应［７５］。??广?４。??、、、??／?Ｉ叫Ｏ?蠢、、??广——??（／?Ｙ?ｆ?ｄ？ＲＮＡ?＾??Ｓ?丨晒祕ＴＬＲ３＆＾?：?－＾－Ｌ｜?｝?ｏｇ?〇??香?ｉ?＾?／?ｉ＾ｉｉＳ?务?４?°??ＩｔＲＡｊ）?１?ｉｉ＾?ｐｉｗＳｉｌ?１１＃?１?！?＜ｇＳｉｐＳ）?Ｂａ—／?／??ｉｌＫＫｏｉｌ?ｈｌＫ沿紙?Ｉ?广?，??图１．４?Ｉ型干扰素信号通路模式图??Ｆｉｇ．?１．４?Ｔｈｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＩＦＮ－Ｉ?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ［７６］．??１．４病毒逃逸宿主Ｉ型干扰素应答策略??鉴于Ｉ型干扰素强大的抗病毒作用，在病毒和宿主共进化的过程中，??病毒要生存就必须编码一些组分抑制宿主干扰素信号通路的激活。其??中，抑制干扰素转录是病毒逃逸Ｉ型干扰素的常用伎俩，如流感病毒编??码的非结构蛋白ＮＳ１、埃博拉病毒编码的ＶＰ３５和丙型肝炎病毒编码的??１３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猫杯状病毒的分离鉴定及其对理化因素抵抗力的研究[J]. 黄倩倩,刘家森,田进,孔德生,曲连东. 中国兽医科学. 2015(04)
[2]猫杯状病毒分子生物学特征及研究进展[J]. 谢守玉,张健騑,吴健敏,白安斌,向华. 中国动物传染病学报. 2010(06)
[3]消毒剂灭活猫杯状病毒中和剂鉴定试验方法[J]. 薄玉霞,Syed A.Sattar. 中国消毒学杂志. 2008(05)
[4]犬细小病毒病的病原学研究进展[J]. 颜文卿,吴德峰,戴亚东,林永利. 动物医学进展. 2006(01)
硕士论文
[1]猫杯状病毒蛋白酶-聚合酶蛋白关闭宿主基因表达机制的研究[D]. 黄佳培.中国农业科学院 2020
[2]嵌合猫杯状病毒F9株反向遗传系统的建立及复制差异基因的筛选[D]. 左智敏.黑龙江八一农垦大学 2019
[3]猫杯状病毒2280毒株反向遗传系统的建立及初步应用[D]. 祖少坡.东北农业大学 2017
[4]犬细小病毒四川株的分离鉴定与VP2结构蛋白基因变异性研究[D]. 戈锐.四川农业大学 2007
本文编号：3290727
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：84 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２直径２５ｎｍ无囊膜的ＦＰＶ衣壳原子模型问
中国农业科学院博士后出站报告?第一章绪论??Ｉ?，?．１??图１．３?ＦＣＶ病毒电镜观察图片和粒子模式图??Ｆｉｇ．?１．３?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＦＣＶ?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｐａｒｔｉｃｌｅ?ｍｏｄｅｌ．??１．２．２猫杯状病毒基因结构??ＦＣＶ的基因组为一条单股正链不分节段的ＲＮＡ分子，大小在７．７ｋｂ??左右，在其５’端结合有基因组链接蛋白ＶＰｇ，ＶＰｇ之后是５’ＵＴＲ，随后??是三个开放阅读框（Ｏｐｅｎ?Ｒｅａｄｉｎｇ?Ｆｒａｍｅ，〇ＲＦ），分别为０ＲＦ１、ＯＲＦ２??和０ＲＦ３。ＦＣＶ的ＯＲＦ１位于基因组ＲＮＡ的５’端，起始位点是从第２０??位到第５３１１位核苷酸，是位于５’１７０１后的第一个０１１？，０１１？１编码？（＾／??的非结构蛋白，ＯＲＦ１首先翻译出一个２００?ｋＤａ的多聚蛋白，随后在蛋??白酶聚合酶（Ｐｒｏｔｅａｓｅ?Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，ＰＰ）的作用下能够将多聚蛋白切割??成单独非结构蛋白，ＦＣＶ共有６个非结构蛋白，依次为５．６?ｋＤａ的ｐ５．６、??３２?ｋＤａ?的?ｐ３２、３８．９?ｋＤａ?的?ｐ３９?（ＮＴＰａｓｅ）、３０．１?ｋＤ?的?ｐ３０、１２．７?ｋＤａ??的?ＶＰｇ?和?７５．７?ｋＤａ?的?ｐ７６?（Ｐｒｏ－Ｐｏｌ）?［２９－３Ｑ］。ＦＣＶ?的?ＯＲＦ２?和?ＯＲＦ３?分??别编码主要结构蛋白ＶＰ１和次要结构蛋白ＶＰ２。ＶＰ１和ＶＰ２是经一条??亚基因组基因翻译得到的。ＯＲＦ２编码的衣壳蛋白前体大小约为７３?ｋＤａ，??被ＰＰ切割成一个１４ｋＤａ大小的衣壳蛋白前导区和衣壳蛋白成熟区ＶＰ１，??大量成熟的ＶＰ１加
扰素刺??激应答元件（ＩＳＲＥ）结合从而诱导千扰素刺激基因（ＩＳＧ）来源的几百??个基因的表达，使细胞建立起抗病毒免疫反应［７５］。??广?４。??、、、??／?Ｉ叫Ｏ?蠢、、??广——??（／?Ｙ?ｆ?ｄ？ＲＮＡ?＾??Ｓ?丨晒祕ＴＬＲ３＆＾?：?－＾－Ｌ｜?｝?ｏｇ?〇??香?ｉ?＾?／?ｉ＾ｉｉＳ?务?４?°??ＩｔＲＡｊ）?１?ｉｉ＾?ｐｉｗＳｉｌ?１１＃?１?！?＜ｇＳｉｐＳ）?Ｂａ—／?／??ｉｌＫＫｏｉｌ?ｈｌＫ沿紙?Ｉ?广?，??图１．４?Ｉ型干扰素信号通路模式图??Ｆｉｇ．?１．４?Ｔｈｅ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＩＦＮ－Ｉ?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ［７６］．??１．４病毒逃逸宿主Ｉ型干扰素应答策略??鉴于Ｉ型干扰素强大的抗病毒作用，在病毒和宿主共进化的过程中，??病毒要生存就必须编码一些组分抑制宿主干扰素信号通路的激活。其??中，抑制干扰素转录是病毒逃逸Ｉ型干扰素的常用伎俩，如流感病毒编??码的非结构蛋白ＮＳ１、埃博拉病毒编码的ＶＰ３５和丙型肝炎病毒编码的??１３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猫杯状病毒的分离鉴定及其对理化因素抵抗力的研究[J]. 黄倩倩,刘家森,田进,孔德生,曲连东. 中国兽医科学. 2015(04)
[2]猫杯状病毒分子生物学特征及研究进展[J]. 谢守玉,张健騑,吴健敏,白安斌,向华. 中国动物传染病学报. 2010(06)
[3]消毒剂灭活猫杯状病毒中和剂鉴定试验方法[J]. 薄玉霞,Syed A.Sattar. 中国消毒学杂志. 2008(05)
[4]犬细小病毒病的病原学研究进展[J]. 颜文卿,吴德峰,戴亚东,林永利. 动物医学进展. 2006(01)
硕士论文
[1]猫杯状病毒蛋白酶-聚合酶蛋白关闭宿主基因表达机制的研究[D]. 黄佳培.中国农业科学院 2020
[2]嵌合猫杯状病毒F9株反向遗传系统的建立及复制差异基因的筛选[D]. 左智敏.黑龙江八一农垦大学 2019
[3]猫杯状病毒2280毒株反向遗传系统的建立及初步应用[D]. 祖少坡.东北农业大学 2017
[4]犬细小病毒四川株的分离鉴定与VP2结构蛋白基因变异性研究[D]. 戈锐.四川农业大学 2007
本文编号：3290727
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