腺相关病毒应用于丘脑束旁核—纹状体通路的研究

发布时间：2021-08-03 19:04

　　目的:本实验采用腺相关病毒（adeno-associated virus2/9-green fluorescence Protein,AAV2/9-GFP）通过自制微量注射系统注射到大鼠丘脑束旁核（Parafascicular nucleus,PF）或背外侧纹状体（dorsolateral striatum,DLS）经注射不同的剂量和不同的转染周数,观察病毒转染及在丘脑束旁核-纹状体通路投射情况,找出示踪试剂的最佳剂量及其转染时间。同时观察转染病毒对组织的影响。方法:wistar雄性大鼠77只,体重280-320g,实验前经行为学检测确认无异常行为。根据是否注射病毒将实验大鼠随机分为2组,分别为接种病毒的实验组（n=72只）和对照组（n=5只）。运用脑立体定位技术在DLS和PF注射不同剂量的示踪剂AAV2/9-GFP,经过不同转染时间后进行灌流取脑,将脑组织进行冰冻切片,最终得到尼氏染色的脑片标本。在激光共聚焦荧光显微镜下观察神经和脑组织,组织学位点鉴定。通过Image-Pro Plus6.0软件进行统计分析,优化参数:示踪剂平均光密度、细胞平均周长、细胞平均面积、示踪剂注射最佳作用时... 

【文章来源】：山东师范大学山东省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

微量注射系统

注射手术

图 2.1 病毒注射至 DLS 及位点鉴定DLS 投射情况：病毒注射至 DLS 部位时，可以投射至皮层、底丘脑核。如图 3.2，3.3，3.4 所示。图 2.2 病毒注射至 DLS 部及放大图


本文编号：3320164