降胆固醇益生菌菌株及活性的研究
发布时间：2021-08-05 06:15
益生菌有益于人体健康,现已发现某些菌株具有降胆固醇功能,但尚对降胆固醇功能的研究存在不足。本论文中首先优化胆固醇-MRS培养基及胆固醇的测定方法用于降胆固醇益生菌的筛选;接着从5株益生菌中筛选出具有较强降胆固醇功能的菌株,研究其发酵特性;并通过耐酸、耐胆盐实验,从中筛选出耐高酸性、高胆盐环境的优质菌株;进而对该菌株进行动物实验,以确证其体内降胆固醇功效;最后从分子水平探讨益生菌降胆固醇功能的遗传特性。主要结果如下:（1）对胆固醇-MRS培养基进行优化。对胆固醇粗溶液进行90℃热水浴、涡旋、超声处理,有助于制备澄清透明的胆固醇胶束溶液,接着对加入胆固醇胶束后的MRS培养基进行磁力搅拌,加速胆固醇在MRS中均匀、稳定存在,有利于益生菌菌株进行长时间发酵降胆固醇体外实验。（2）对胆固醇测定方法进行优化。确定了优化后的胆固醇提取步骤、皂化、除去MRS培养基中的Tween-80以及增加胆固醇溶液的加样量都有利于增加改良后的OPA方法测定胆固醇-MRS发酵液中胆固醇的准确度。（3）利用优化后的胆固醇-MRS培养基及胆固醇测定方法,从5株益生菌中筛选出3株胆固醇体外去除率约为20%的益生菌用于下一步...
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：125 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
胆固醇（胶束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution
华南理工大学工程硕士学位论文26图2-1胆固醇（胶束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排从左至右分别a、b、c组制备的胆固醇（胶束）溶液；第二排从左至右分别为d、e组制备的胆固醇胶束溶液由图2-1可知，a组超声处理30min后，溶液澄清透明，说明胆固醇在超声作用下完全溶于冰乙酸；b组、c组超声30min后有细小颗粒，处理50min后仍有絮状悬浮物，而d组超声处理30min后胆固醇完全溶解，无悬浮物产生，说明胆固醇胶束的制备必须同时使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e组较d组浑浊，超声处理30min后无悬浮物产生，说明无水乙醇在制备胆固醇胶束的过程中也可以作为胆固醇溶剂使用。（2）五组胆固醇（胶束）溶液在MRS中的结果将制成的胆固醇（胶束）溶液加入至含有10mLMRS的试管内，每组有三支试管，37℃恒温放置0h、2h、24h后的结果分别如图2-2、图2-3和图2-4所示。图2-2放置0h的MRS培养基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：从左至右分别为空白MRS培养基、a、b、c、d、e组胆固醇-MRS培养基；每组三支试管的胆固醇浓度从左至右分别为0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。图2-3放置2h的MRS培养基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
华南理工大学工程硕士学位论文26图2-1胆固醇（胶束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排从左至右分别a、b、c组制备的胆固醇（胶束）溶液；第二排从左至右分别为d、e组制备的胆固醇胶束溶液由图2-1可知，a组超声处理30min后，溶液澄清透明，说明胆固醇在超声作用下完全溶于冰乙酸；b组、c组超声30min后有细小颗粒，处理50min后仍有絮状悬浮物，而d组超声处理30min后胆固醇完全溶解，无悬浮物产生，说明胆固醇胶束的制备必须同时使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e组较d组浑浊，超声处理30min后无悬浮物产生，说明无水乙醇在制备胆固醇胶束的过程中也可以作为胆固醇溶剂使用。（2）五组胆固醇（胶束）溶液在MRS中的结果将制成的胆固醇（胶束）溶液加入至含有10mLMRS的试管内，每组有三支试管，37℃恒温放置0h、2h、24h后的结果分别如图2-2、图2-3和图2-4所示。图2-2放置0h的MRS培养基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：从左至右分别为空白MRS培养基、a、b、c、d、e组胆固醇-MRS培养基；每组三支试管的胆固醇浓度从左至右分别为0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。图2-3放置2h的MRS培养基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
【参考文献】：
期刊论文
[1]高密度脂蛋白逆转运胆固醇的分子生物学基础[J]. 梅俊,徐凤芹. 中国动脉硬化杂志. 2019(03)
[2]实验性高脂血症动物模型的研究进展[J]. 马尚伟,高瑷洁,赵玲娟,朱琳,崔远武. 黑龙江医学. 2018(11)
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[10]3株益生菌体外降胆固醇能力及体内降血脂效果评价[J]. 韦云路,刘义,王瑶,孟祥飞,李平兰. 食品科学. 2017(23)
博士论文
[1]基于高通量测序数据的遗传调控元件识别及算法研究[D]. 张绍军.哈尔滨工业大学 2014
[2]植物乳杆菌ST-Ⅲ全基因组序列分析及其对低聚果糖代谢通路的解析[D]. 陈臣.江南大学 2014
[3]意蜂哺育蜂与采集蜂头部mRNAs与miRNAs表达谱Solexa测序比较分析及其调控网络研究[D]. 刘芳.浙江大学 2012
[4]人源性益生菌降胆固醇机制及影响因素研究[D]. 郭春锋.哈尔滨工业大学 2011
硕士论文
[1]降胆固醇乳酸菌的筛选及其体内降胆固醇作用[D]. 郭均.华南理工大学 2016
[2]基于高通量测序方法研究家蚕品种间产丝量差异[D]. 彭莉.西南大学 2016
[3]高效降胆固醇乳酸菌的筛选和全基因组测序分析[D]. 刘兆山.华南理工大学 2016
[4]几种动物来源益生菌部分生物学特性的比较研究[D]. 刘钊熠.东北农业大学 2013
[5]降胆固醇功能乳酸菌的筛选及其特性的研究[D]. 姜华.南京农业大学 2010
[6]植物乳杆菌降胆固醇作用的研究[D]. 王欢.黑龙江大学 2010
[7]降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降解机制的研究[D]. 汪晓辉.浙江工商大学 2010
[8]具有降胆固醇功能益生菌的筛选[D]. 王巍.黑龙江大学 2009
[9]降胆固醇乳酸菌的研究[D]. 郭东起.大连工业大学 2008
[10]罗伊氏乳杆菌生物学特性及功能性发酵乳的研究[D]. 李正华.江南大学 2008
本文编号：3323232
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：125 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
胆固醇（胶束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution
华南理工大学工程硕士学位论文26图2-1胆固醇（胶束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排从左至右分别a、b、c组制备的胆固醇（胶束）溶液；第二排从左至右分别为d、e组制备的胆固醇胶束溶液由图2-1可知，a组超声处理30min后，溶液澄清透明，说明胆固醇在超声作用下完全溶于冰乙酸；b组、c组超声30min后有细小颗粒，处理50min后仍有絮状悬浮物，而d组超声处理30min后胆固醇完全溶解，无悬浮物产生，说明胆固醇胶束的制备必须同时使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e组较d组浑浊，超声处理30min后无悬浮物产生，说明无水乙醇在制备胆固醇胶束的过程中也可以作为胆固醇溶剂使用。（2）五组胆固醇（胶束）溶液在MRS中的结果将制成的胆固醇（胶束）溶液加入至含有10mLMRS的试管内，每组有三支试管，37℃恒温放置0h、2h、24h后的结果分别如图2-2、图2-3和图2-4所示。图2-2放置0h的MRS培养基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：从左至右分别为空白MRS培养基、a、b、c、d、e组胆固醇-MRS培养基；每组三支试管的胆固醇浓度从左至右分别为0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。图2-3放置2h的MRS培养基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
华南理工大学工程硕士学位论文26图2-1胆固醇（胶束）溶液Fig.2-1Cholesterol(micelle)solution注：第一排从左至右分别a、b、c组制备的胆固醇（胶束）溶液；第二排从左至右分别为d、e组制备的胆固醇胶束溶液由图2-1可知，a组超声处理30min后，溶液澄清透明，说明胆固醇在超声作用下完全溶于冰乙酸；b组、c组超声30min后有细小颗粒，处理50min后仍有絮状悬浮物，而d组超声处理30min后胆固醇完全溶解，无悬浮物产生，说明胆固醇胶束的制备必须同时使用蔗糖脂肪酸酯和Tween-80；e组较d组浑浊，超声处理30min后无悬浮物产生，说明无水乙醇在制备胆固醇胶束的过程中也可以作为胆固醇溶剂使用。（2）五组胆固醇（胶束）溶液在MRS中的结果将制成的胆固醇（胶束）溶液加入至含有10mLMRS的试管内，每组有三支试管，37℃恒温放置0h、2h、24h后的结果分别如图2-2、图2-3和图2-4所示。图2-2放置0h的MRS培养基Fig.2-2EachgroupofMRSmediumwasplacedfor0h注：从左至右分别为空白MRS培养基、a、b、c、d、e组胆固醇-MRS培养基；每组三支试管的胆固醇浓度从左至右分别为0.15mg/mL、0.20mg/mL和0.30mg/mL。图2-3放置2h的MRS培养基Fig.2-3EachgroupofMRSmediumwasplacedfor2h
【参考文献】：
期刊论文
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[3]基于高通量测序技术的新疆传统干奶酪乳酸菌多样性分析[J]. 赵顺先,关统伟,向慧平,张国栋,张习超,欧梦莹,林宜锦,王鹏昊. 四川农业大学学报. 2018(05)
[4]一株降胆固醇乳酸菌的筛选及其在模拟消化环境活性的研究[J]. 范颖,陈思涵,党芳芳,王喆,满朝新,姜毓君. 中国乳品工业. 2018(09)
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[6]芒果源植物乳杆菌FMNP01的全基因组测序及序列分析[J]. 李雪飞,郭丽琼,叶志伟,刘英丽,林俊芳. 中国食品学报. 2018(05)
[7]强化人群血脂分层管理和创新提出低密度脂蛋白胆固醇更低靶标[J]. 李建军. 中华老年心脑血管病杂志. 2018(02)
[8]第二代高通量测序技术用于进口细菌型微生物肥料菌群分析[J]. 刘玉莉,魏霜,刘碧琳,鄞杰平,林利平. 安徽农业科学. 2017(28)
[9]植物甾醇及添加植物甾醇乳制品降低心脑血管疾病风险的功能性评价（英文）[J]. 明珠,陈庆森,张蕾,闫亚丽,赵培. 食品科学. 2017(17)
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博士论文
[1]基于高通量测序数据的遗传调控元件识别及算法研究[D]. 张绍军.哈尔滨工业大学 2014
[2]植物乳杆菌ST-Ⅲ全基因组序列分析及其对低聚果糖代谢通路的解析[D]. 陈臣.江南大学 2014
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[4]人源性益生菌降胆固醇机制及影响因素研究[D]. 郭春锋.哈尔滨工业大学 2011
硕士论文
[1]降胆固醇乳酸菌的筛选及其体内降胆固醇作用[D]. 郭均.华南理工大学 2016
[2]基于高通量测序方法研究家蚕品种间产丝量差异[D]. 彭莉.西南大学 2016
[3]高效降胆固醇乳酸菌的筛选和全基因组测序分析[D]. 刘兆山.华南理工大学 2016
[4]几种动物来源益生菌部分生物学特性的比较研究[D]. 刘钊熠.东北农业大学 2013
[5]降胆固醇功能乳酸菌的筛选及其特性的研究[D]. 姜华.南京农业大学 2010
[6]植物乳杆菌降胆固醇作用的研究[D]. 王欢.黑龙江大学 2010
[7]降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降解机制的研究[D]. 汪晓辉.浙江工商大学 2010
[8]具有降胆固醇功能益生菌的筛选[D]. 王巍.黑龙江大学 2009
[9]降胆固醇乳酸菌的研究[D]. 郭东起.大连工业大学 2008
[10]罗伊氏乳杆菌生物学特性及功能性发酵乳的研究[D]. 李正华.江南大学 2008
本文编号：3323232
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