17β—雌二醇介导GPER/AKT途径干预成骨细胞线粒体自噬的分子机制研究
发布时间：2021-08-11 15:08
目的:自噬（autophagy）是当细胞状态为饥饿或应激时,细胞可通过自我消化胞内多余或反常的成分,进而得取养分以促使内环境处于稳态的过程,自噬在真核细胞生长发育过程中广泛存在,适度自噬,可促进蛋白质和细胞器的循环利用,并且对促使细胞功能正常和细胞存活有不可忽视的价值;但是,如果细胞自噬过度,细胞会出现吞噬自身的细胞器而死亡。现如今,有关自噬和程序性细胞死亡,分子生物和细胞生物学家的认知尚停留于初级水平。在国内,有关细胞自噬等方面的探索更为少见,且常常拘泥于其在肿瘤、心血管、神经退行性疾病变等方面的研究,尚未发现自噬与成骨细胞相关的研究。骨代谢过程中,激素调节、生长因子、神经系统与骨生长和骨吸收的全部调节过程,共同形成调节网络。雌激素对骨代谢和保持骨量正常等方面,具有调节作用。通过文献表明,雌激素匮乏使成骨细胞增殖异常,并使其功能受损。在人体诸多组织器官内,雌激素在调节生理、病理等方面意义巨大。雌激素受体α（estrogen receptorα,ERα）和雌激素受体β（estrogen receptor β,ERβ）是雌激素的主要受体,转录因子位于细胞核,会与雌激素反应元件相结合,进而...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
7β-E2对GPERmRNA表达的影响
中国医科大学博士学位论文123结果3.117β-E2促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1中GPER的mRNA表达实验结果发现，17β-E2呈剂量依赖性促进MC3T3-E1细胞中GPER的mRNA表达。在10-8M和10-7M组17β-E2促进GPERmRNA的表达作用较为明显，差异有统计学意义（P＜0.05，图3.1）。图3.117β-E2对GPERmRNA表达的影响3.217β-E2促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1GPER蛋白的表达本实验结果表明，在MC3T3-E1成骨细胞中GPER蛋白有少量表达。17β-E2（10-7M）可以使GPER蛋白的表达程度显著升高（p<0.05）。17β-E2对GPER蛋白表达的促进作用能够被GPER特异性抑制剂G15所抑制（图3.2）。图3.2MC3T3-E1细胞中GPER蛋白表达随17β-E2浓度梯度变化情况
中国医科大学博士学位论文133.317β-E2促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞质中GPER蛋白的表达免疫荧光结果也发现，与对照组相比，10-7M17β-E2能够促使MC3T3-E1细胞质中GPER蛋白表达升高（P＜0.05），即红色荧光颗粒数目增多（图3.3）。图3.3免疫荧光法观察17β-E2对MC3T3-E1细胞质中GPER表达的影响3.417β-E2抑制小鼠成骨细胞MC3T3-E1线粒体中自噬体的形成本实验结果显示，对照组的小鼠成骨细胞MC3T3-E1中，细胞质、细胞核和细胞器的形态均表现正常，可见较少自噬小泡于细胞质中。用10-7M17β-E2对MC3T3-E1细胞进行处理24小时，透射电子显微镜图像结果为：同对照组相比，自噬小泡数量于MC3T3-E1细胞质内显著减少。将MC3T3-E1细胞用10-7M17β-E2结合15μMG15做24小时的处理，透射电子显微镜图像结果为：同对照组相比，MC3T3-E1细胞质内自噬小泡个数减少不显著（图3.4）。图3.417β-E2对MC3T3-E1细胞质内自噬小泡形成的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]2016年《美国内分泌医师协会与美国内分泌协会绝经后骨质疏松症诊疗指南》解读[J]. 李静,陈德才,王覃. 中国全科医学. 2017(08)
[2]雌激素受体β在乳腺癌生长中的作用研究进展[J]. 陈风飞,高颖生,孙立,袁胜涛. 药学进展. 2017(01)
[3]绝经后骨质疏松症骨折危险因素及中医症状相关性研究[J]. 申浩,魏戌,谢雁鸣,杨靖,曾宪斌,易丹辉,虞鲲,康树. 中国中西医结合杂志. 2017(01)
[4]促骨形成药物干预骨质疏松性骨折临床研究进展[J]. 辛力,林华. 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志. 2017(01)
[5]Inhibition of Autophagy by Estradiol Promotes Locomotor Recovery after Spinal Cord Injury in Rats[J]. Chao-Wei Lin,Bi Chen,Ke-Lun Huang,Yu-Sen Dai,Hong-Lin Teng. Neuroscience Bulletin. 2016(02)
[6]饥饿诱导下小鼠成骨细胞自噬与凋亡相互作用研究[J]. 朱文胤,陈倩倩,刘祁,周云,晏燕,曹军. 川北医学院学报. 2015(02)
[7]重组腺相关病毒介导VEGF和BMP双基因共表达对兔早期激素性股骨头坏死的修复作用[J]. 张晨,李兴华,李苗,唐一仑,时志斌,党晓谦,王坤正. 中华骨科杂志. 2014 (08)
[8]刺参酸性黏多糖对宫颈癌HeLa细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表达的影响[J]. 刘风仙,宋扬. 实用医学杂志. 2010(12)
[9]非基因型雌激素膜性受体GPR30在生后雌性大鼠海马内的发育学表达与亚细胞水平定位研究[J]. 赵承军,邓其跃,张东梅,蔡文琴,张吉强. 生物化学与生物物理进展. 2009(01)
本文编号：3336383
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
7β-E2对GPERmRNA表达的影响
中国医科大学博士学位论文123结果3.117β-E2促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1中GPER的mRNA表达实验结果发现，17β-E2呈剂量依赖性促进MC3T3-E1细胞中GPER的mRNA表达。在10-8M和10-7M组17β-E2促进GPERmRNA的表达作用较为明显，差异有统计学意义（P＜0.05，图3.1）。图3.117β-E2对GPERmRNA表达的影响3.217β-E2促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1GPER蛋白的表达本实验结果表明，在MC3T3-E1成骨细胞中GPER蛋白有少量表达。17β-E2（10-7M）可以使GPER蛋白的表达程度显著升高（p<0.05）。17β-E2对GPER蛋白表达的促进作用能够被GPER特异性抑制剂G15所抑制（图3.2）。图3.2MC3T3-E1细胞中GPER蛋白表达随17β-E2浓度梯度变化情况
中国医科大学博士学位论文133.317β-E2促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞质中GPER蛋白的表达免疫荧光结果也发现，与对照组相比，10-7M17β-E2能够促使MC3T3-E1细胞质中GPER蛋白表达升高（P＜0.05），即红色荧光颗粒数目增多（图3.3）。图3.3免疫荧光法观察17β-E2对MC3T3-E1细胞质中GPER表达的影响3.417β-E2抑制小鼠成骨细胞MC3T3-E1线粒体中自噬体的形成本实验结果显示，对照组的小鼠成骨细胞MC3T3-E1中，细胞质、细胞核和细胞器的形态均表现正常，可见较少自噬小泡于细胞质中。用10-7M17β-E2对MC3T3-E1细胞进行处理24小时，透射电子显微镜图像结果为：同对照组相比，自噬小泡数量于MC3T3-E1细胞质内显著减少。将MC3T3-E1细胞用10-7M17β-E2结合15μMG15做24小时的处理，透射电子显微镜图像结果为：同对照组相比，MC3T3-E1细胞质内自噬小泡个数减少不显著（图3.4）。图3.417β-E2对MC3T3-E1细胞质内自噬小泡形成的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]2016年《美国内分泌医师协会与美国内分泌协会绝经后骨质疏松症诊疗指南》解读[J]. 李静,陈德才,王覃. 中国全科医学. 2017(08)
[2]雌激素受体β在乳腺癌生长中的作用研究进展[J]. 陈风飞,高颖生,孙立,袁胜涛. 药学进展. 2017(01)
[3]绝经后骨质疏松症骨折危险因素及中医症状相关性研究[J]. 申浩,魏戌,谢雁鸣,杨靖,曾宪斌,易丹辉,虞鲲,康树. 中国中西医结合杂志. 2017(01)
[4]促骨形成药物干预骨质疏松性骨折临床研究进展[J]. 辛力,林华. 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志. 2017(01)
[5]Inhibition of Autophagy by Estradiol Promotes Locomotor Recovery after Spinal Cord Injury in Rats[J]. Chao-Wei Lin,Bi Chen,Ke-Lun Huang,Yu-Sen Dai,Hong-Lin Teng. Neuroscience Bulletin. 2016(02)
[6]饥饿诱导下小鼠成骨细胞自噬与凋亡相互作用研究[J]. 朱文胤,陈倩倩,刘祁,周云,晏燕,曹军. 川北医学院学报. 2015(02)
[7]重组腺相关病毒介导VEGF和BMP双基因共表达对兔早期激素性股骨头坏死的修复作用[J]. 张晨,李兴华,李苗,唐一仑,时志斌,党晓谦,王坤正. 中华骨科杂志. 2014 (08)
[8]刺参酸性黏多糖对宫颈癌HeLa细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表达的影响[J]. 刘风仙,宋扬. 实用医学杂志. 2010(12)
[9]非基因型雌激素膜性受体GPR30在生后雌性大鼠海马内的发育学表达与亚细胞水平定位研究[J]. 赵承军,邓其跃,张东梅,蔡文琴,张吉强. 生物化学与生物物理进展. 2009(01)
本文编号：3336383
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