拟南芥VQ3基因在调控植物生长发育中的作用及机制研究

发布时间：2021-09-08 11:26

　　VQ蛋白是一类与生长发育以及响应环境胁迫相关的植物特异性转录调控辅助因子,其氨基酸序列仅在VQ结构域处高度保守。并且大多数拟南芥VQ基因不含内含子,其编码的蛋白质氨基酸残基的数目大多都少于300。研究表明,含有VQ（FxxxVQxLTG）结构域的蛋白质与WRKY转录因子互作,进一步的分析表明,VQ结构域中保守的V和Q残基对于与WRKY蛋白的互作特别重要。另外,VQ蛋白并非与所有的WRKY家族成员互作,而是仅与Ⅰ亚族和Ⅱc亚族的WRKY蛋白互作。VQ蛋白与WRKY蛋白结合后,形成蛋白复合体共同对下游靶基因进行调控。本研究对拟南芥中功能尚属未知的VQ3基因开展了相关研究,取得的主要结果如下:1.拟南芥AtVQ3基因的功能分析构建了带有GFP报告基因的pCAMBIA2300GFP-AtVQ3载体,然后注射烟草利用瞬时表达系统进行研究发现,该蛋白定位于细胞核内。之后利用CRISPR/Cas9基因编辑系统获得了atvq3突变体植株,对F1代进行表型鉴定,发现功能缺失突变体相比于野生型拟南芥植株发生矮化现象并且莲座叶叶片呈椭圆形。2.拟南芥AtVQ3基因的表达模式分析对不同器官中的AtVQ3基因的... 

【文章来源】：山东师范大学山东省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

拟南芥VQ蛋白结构域的分析

图 2 拟南芥 VQ 蛋白的系统发育树[12]Fig. 2 Phylogenetic trees of the VQ proteins fromArabidopsis白生物学功能研究 VQ14 基因在种子胚乳发育早期中表达量升高，当该基因种子变小[11]，进一步探究表明：VQ14 蛋白在种子发育过6]。过量表达 AtVQ29 基因发现，转基因植株在远红光或弱的长度明显要比野生型长，该基因 T-DNA 插入或转座子生型短[13,14]，并且 VQ29 基因还能够调控花的发育，其过延迟[14]。过量表达 VQ17 基因发现植株的生长发育变得录本升高同样具有发育迟缓的表型，而且 VQ8 基因功能过程中也受到抑制，在整个生命周期中显示出叶片呈浅绿

图 3 重组质粒 AtU6-26-sgRNA-SK-AtVQ3 图谱Fig.3 Map of recombinant plasmid of AtU6-26-sgRNA-SK-AtVQ37） 取 2μg pCAMBIA1300-pYAO-Cas9 质粒 10U SpeⅠ（50μl 体系）37℃酶切 30min，PCR 仪 80℃，20min，电泳切胶回收；8） sgRNAcassette 连接反应试剂 体积（μL）10×T4 DNAligase buffer 1 μl酶切后的 pCAMBIA1300-pYAO-Cas9 载体 40 ngsgRNAcassette 10-20 ngT4 DNAligase 0.2 μl

【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥VQ基因家族响应抗性相关激素表达谱分析[J]. 林渊源,余迪求.  植物分类与资源学报. 2012(05)



本文编号：3390705