人腺病毒36型诱导3T3-L1前脂肪细胞棕色化的作用研究

发布时间：2021-09-08 17:04

　　目的:初步探讨人腺病毒36型（adenvirus type 36,Ad36）在诱导3T3-L1前脂肪细胞棕色化过程中的作用。方法:（1）对MDI诱导组（对照组）和MDI+Ad36诱导组（实验组）第0、2、4、6、8天细胞进行BODIPY染色,观察细胞成脂情况。（2）分别收取对照组与实验组第0、2、4、6、8天细胞,利用实时荧光定量PCR检测两组棕色脂肪标记基因pgc1α、ucp1、fgf21,线粒体氧化磷酸化相关基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA表达水平变化;Western blot检测两组上述基因的蛋白质表达水平变化。（3）使用mTOR的抑制剂雷帕霉素后,BODIPY染色检测细胞成脂情况;实时荧光定量PCR与Western blot检测各组棕色脂肪标记基因pgc1α、ucp1、fgf21,线粒体氧化磷酸化相关基因atp5o、cox5b、nd2 mRNA与蛋白质表达水平变化。结果:（1）在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,MDI诱导组细胞内脂滴逐渐增多并汇集,而MDI+Ad36诱导组细胞内脂滴先增多、汇集,在细胞分化的第4天加入Ad36后,与对照组相比,细胞内脂滴大小逐渐减小... 

【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1a基因qRT-PCR结果

图1 e1a基因qRT-PCR结果Fig.1 The expression of e1a gene注：e1a mRNA表达水平变化， *表示MDI+Ad36诱导组与第0天比较P<0.052 检测 MDI 与 MDI+Ad36 诱导组细胞成脂情况分别使用MDI、MDI+Ad36对3T3-L1前脂肪细胞进行成脂诱导，对两组第0、2、4、6、8天细胞进行BODIPY染色，激光共聚焦显微镜下出现绿色提示脂肪滴形成。结果显示：两组在成脂诱导的第2天时，显微镜下可见到脂滴出现，随着细胞诱导分化，两组细胞内脂滴逐渐增多，但MDI+Ad36诱导组在诱导分化的第四天加入Ad36后，细胞内脂滴逐渐减小。激光共聚焦显微镜采集图像（1320x），（见图2）。

新疆医科大学硕士学位论文3 3T3-L1 前脂肪细胞分化过程中，MDI 诱导组与 MDI+Ad36 诱导组 pparg mRNA 与蛋白质表达水平变化分别使用 MDI 与 MDI+Ad36 诱导 3T3-L1 前脂肪细胞分化，检测两组第 0、2、4、6、8 天 pparg mRNA 与蛋白质表达水平变化。结果显示：两种诱导方法都能促进pparγ mRNA 与蛋白质表达（见图 3A、B）。表19 3T3-L1前脂肪细胞分化过程中pparg mRNA表达水平变化（x s）Table 19 Changes in expression levels of pparg mRNA during differentiation of 3T3-L1preadopocutes基因名称 组别 第 0 天 第 2 天 第 4 天 第 6 天 第 8 天pparg MDI 0.99+0.04 2.53+0.13*5.46+0.31*8.69+0.46*10.33+1.89*MDI+Ad36 1.0+0.02 2.01+0.07#4.99+0.28#8.23+0.41#8.54+0.46#注：*、#分别表示MDI诱导组、MDI+Ad36诱导组与第0天比较P<0.05

【参考文献】：
期刊论文
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[2]腺病毒36感染对人脂肪源性间充质干细胞PPARγ和adiponectin基因表达的影响[J]. 努尔比耶·努尔麦麦提,焦谊,伊力亚斯·艾萨,地力木拉提·艾克热木,开色尔·喀米力,陆建飞,常曦,关亚群.  新疆医科大学学报. 2015(05)
[3]Ad36感染对维吾尔族肥胖患者progranulin表达的调节作用[J]. 常曦,焦谊,陆剑飞,努尔比耶·努尔麦麦提,关亚群.  西安交通大学学报(医学版). 2015(02)
[4]中国超重和肥胖造成相关慢性疾病的经济负担研究[J]. 赵文华,翟屹,胡建平,王建生,杨正雄,孔灵芝,陈春明.  中华流行病学杂志. 2006(07)



本文编号：3391159