毕赤酵母中糖基转移酶（UGT76G1）与蔗糖合成酶（SUS）的异源表达及优化

发布时间：2021-09-09 11:12

　　糖过量摄取所引起的肥胖症和糖尿病等公众健康问题日益严重,低卡路里天然甜味剂的开发成为热点。甜菊糖具有高甜度、低热能及健康辅助功能已作为“世界第三蔗糖”开发。甜菊苷(Stevioside和莱鲍迪苷A（Rebaudioside A）是甜菊糖含量最丰富的两种成分,分别占干叶重的5-10%和2-4%。莱鲍迪苷A甜度最高,稳定性和水溶性较好,且不带有甜菊苷的苦涩味,具有巨大的应用价值。目前制备高纯度莱鲍迪苷A产品的方法主要有:培育高产莱鲍迪苷A的甜叶菊品种、树脂吸附或重结晶提纯莱鲍迪苷A、环糊精转移酶等酶对甜菊糖进行改性等,但都存在工艺繁琐、成本高、效果不佳等缺点。甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni）UGT76G1已报道可特异性催化甜菊糖中含量高、苦涩味重的甜菊苷生成莱鲍迪苷A。然而,甜叶菊中天然UGT76G1含量甚微,分离纯化成本高,难以获取大量的酶蛋白,并且在这个一步糖基化反应中需要昂贵的尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）作为糖基供体,必然导致RA酶促合成应用的经济性差。为了解决底物昂贵的问题,已经有研究发现了一种蔗糖合成酶SUS能催化蔗糖和UDP生成UDPG和果糖。蔗糖作... 

【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

甜菊糖苷的生物合成途径[24]

途径一：羰基-1-1磷酸核苷酶逆向催化反应提供DNP-糖

途径二：糖基转移酶的逆向催化反应提供DNP-糖Fig1-3.Route2:reversecatalyticreactionofglycosyltransferasetoprovideDNPsugar

【参考文献】：
期刊论文
[1]毕赤酵母全细胞催化合成新型高倍甜味剂莱鲍迪苷A[J]. 唐小雁,陈美琪,林影,梁书利.  现代食品科技. 2020(01)
[2]甜菊糖的生物合成、转化与糖基化[J]. 吴则东,马龙彪,周艳丽,张文彬.  中国糖料. 2018(02)
[3]糖基转移酶在改善天然产物成药性方面的应用[J]. 金月,吴旭日,陈依军.  中国药科大学学报. 2017(05)
[4]世界甜叶菊发展概况[J]. 吴则东,张文彬,吴玉梅,刘乃新.  中国糖料. 2016(04)
[5]菊粉酶基因的异源表达、分离纯化及酶学性质[J]. 李益民,高教琪,袁文杰,相瑞娟,侯胜博.  生物工程学报. 2015(05)
[6]高效液相色谱法测定甜叶菊中的3个甜菊醇糖苷的含量[J]. 朱吟吟,周凌.  药物分析杂志. 2014(01)
[7]甜菊糖苷应用研究现状[J]. 杨双春,赵倩茹,张爽,王明,潘一.  中国食品添加剂. 2013(02)
[8]甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的克隆表达及其性质研究[J]. 刘欢,李艳,严明,陈圣,郝宁,许琳.  食品工业科技. 2012(20)
[9]重组酿酒酵母全细胞催化合成莱鲍迪苷A[J]. 刘欢,李艳,严明,陈圣,郝宁,许琳.  食品与发酵工业. 2012(07)
[10]巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展和前景展望[J]. 娄瑞娟,罗利龙,张霞,张瑞刚,宋水山.  生物学杂志. 2010(05)

博士论文
[1]基于RNA-Seq技术的毕赤酵母转录组学研究及其表达元件的挖掘[D]. 梁书利.华南理工大学 2012

硕士论文
[1]斯替夫苷的酶促糖基化及甜菊糖苷的应用初探[D]. 张延栋.江南大学 2017
[2]糖基转移酶工程菌株UDPG合成途径的强化及应用[D]. 连振静.浙江工业大学 2015
[3]生物催化莱鲍迪苷A生成莱鲍迪苷D的研究[D]. 李铭敏.浙江工业大学 2015
[4]甜叶菊UGT76G1在毕赤酵母细胞的表面展示[D]. 王蓓蓓.华南理工大学 2014
[5]甜叶菊中总糖苷和总黄酮的提取、纯化工艺及清除自由基研究[D]. 王红玉.兰州理工大学 2013
[6]固化单宁大孔吸附树脂的合成及吸附机理研究[D]. 刘建.北京林业大学 2006



本文编号：3391990