Fiber1与Fiber2在禽腺病毒4型（FAdV-4）细胞培养中的作用研究
发布时间：2021-09-25 19:10
禽腺病毒血清4型（Fowl Adenovirus serotype 4,FAdV-4）属于Ⅰ亚群禽腺病毒。对FAdV-4的研究可追溯至1971年。但是由于之前发现的FAdV-4毒株都属于低致病性的腺病毒,因此对其的研究进度一直处于较慢状态。2015年由FAdV-4引起的肝炎-心包积液综合征（Hepatitis Hydropericardium Syndrome,HHS）在山东、河南、浙江等地大面积爆发,对华东地区的家禽养殖业造成了严重的打击,这引起了中国乃至国际社会对FAdV-4的重视。对FAdV-4的Fiber进行反向遗传改造得到重组病毒。为研究两个Fiber对F AdV-4的复制增殖和毒力影响,分别构建了删除Fiber1的FAV4XF1GFP和删除F iber2的FAV4XF2GFP重组病毒。结果表明FAV4XF1GFP可以拯救但不能正常复制增殖。用pcDNA3-FAV4F1辅助时,FAV4XF1GFP可以复制增殖。FAV4XF2GF P可以正常复制增殖,但其复制增殖能力减弱。研究Fiber Knob蛋白对FAdV-4感染细胞过程的阻断作用。本研究以人5型腺病毒为载体,构建真核表达...
【文章来源】：青岛科技大学山东省
【文章页数】：97 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
穿梭质粒pMD-FAV4Fs的构建流程图
Fiber1与Fiber2在禽腺病毒4型（FAdV-4）细胞培养中的作用研究282.3.1.1PCR片段扩增PCR分别得到2999和2699bp，均与预期大小相符。见图2-4。图2-4PCR片段电泳图Fig2-4electropherogramofPCRfragment注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1:2999bp；2：2699bp2.3.1.2穿梭质粒pMD-FAV4Fs的鉴定小提得到4管质粒，分别PvuII鉴定，得到三条片段，分别为544,2364,2699bp，均与预期大小相符。见图2-5。对酶切正确的质粒进行测序，测序结果与预期相符。将鉴定正确的质粒命名为pMD-FAV4Fs。图2-5pMD-FAV4Fs的酶切鉴定电泳图Fig2-5DigestionidentificationelectrophoretogramofpMD-FAV4Fs注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1-4：pMD-FAV4Fs#1-4PvuII；MD：DL2000Marker2.3.2穿梭质粒pMD-FAV4XF1的构建及鉴定
Fiber1与Fiber2在禽腺病毒4型（FAdV-4）细胞培养中的作用研究282.3.1.1PCR片段扩增PCR分别得到2999和2699bp，均与预期大小相符。见图2-4。图2-4PCR片段电泳图Fig2-4electropherogramofPCRfragment注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1:2999bp；2：2699bp2.3.1.2穿梭质粒pMD-FAV4Fs的鉴定小提得到4管质粒，分别PvuII鉴定，得到三条片段，分别为544,2364,2699bp，均与预期大小相符。见图2-5。对酶切正确的质粒进行测序，测序结果与预期相符。将鉴定正确的质粒命名为pMD-FAV4Fs。图2-5pMD-FAV4Fs的酶切鉴定电泳图Fig2-5DigestionidentificationelectrophoretogramofpMD-FAV4Fs注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1-4：pMD-FAV4Fs#1-4PvuII；MD：DL2000Marker2.3.2穿梭质粒pMD-FAV4XF1的构建及鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]禽腺病毒血清4型广东株的分离鉴定及致病性研究[J]. 申祖杰,黎世彬,林华源,任行星,洪艳芬,廖佳钰,张建民,廖明,徐成刚. 中国兽医科学. 2018(06)
[2]一株高致病性血清4型禽腺病毒的分离与鉴定[J]. 梁广成,高巍,谢泉,张建军,邵红霞,秦爱建,叶建强. 中国家禽. 2016(19)
[3]山东省血清4型禽腺病毒的分离鉴定[J]. 于可响,黄兵,凌红丽,庞运倩,王友令,李峰,亓丽红,宋敏训. 中国动物传染病学报. 2016(05)
[4]5型和35型腺病毒纤毛蛋白的原核表达及活性验证[J]. 张文峰,张琼宇,薄华本,邵红伟,李晓程,王腾,黄树林. 中国生物工程杂志. 2013(12)
[5]病毒空斑技术的研究和应用概况[J]. 孟继鸿,朱圣禾. 国外医学(微生物学分册). 1989(01)
硕士论文
[1]禽腺病毒血清4型重组株的构建及生物学特性研究[D]. 柴冬华.中国农业科学院 2019
[2]血清4型Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及流行病学调查[D]. 窦砚国.山东农业大学 2017
[3]Ⅰ群禽腺病毒纤突knob区域基因序列同源性分析及病毒部分生物学特性研究[D]. 陈跃.扬州大学 2009
[4]CELO禽腺病毒载体的构建及fiber 1部分片段的原核表达[D]. 王凤雪.中国农业科学院 2005
本文编号：3410283
【文章来源】：青岛科技大学山东省
【文章页数】：97 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
穿梭质粒pMD-FAV4Fs的构建流程图
Fiber1与Fiber2在禽腺病毒4型（FAdV-4）细胞培养中的作用研究282.3.1.1PCR片段扩增PCR分别得到2999和2699bp，均与预期大小相符。见图2-4。图2-4PCR片段电泳图Fig2-4electropherogramofPCRfragment注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1:2999bp；2：2699bp2.3.1.2穿梭质粒pMD-FAV4Fs的鉴定小提得到4管质粒，分别PvuII鉴定，得到三条片段，分别为544,2364,2699bp，均与预期大小相符。见图2-5。对酶切正确的质粒进行测序，测序结果与预期相符。将鉴定正确的质粒命名为pMD-FAV4Fs。图2-5pMD-FAV4Fs的酶切鉴定电泳图Fig2-5DigestionidentificationelectrophoretogramofpMD-FAV4Fs注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1-4：pMD-FAV4Fs#1-4PvuII；MD：DL2000Marker2.3.2穿梭质粒pMD-FAV4XF1的构建及鉴定
Fiber1与Fiber2在禽腺病毒4型（FAdV-4）细胞培养中的作用研究282.3.1.1PCR片段扩增PCR分别得到2999和2699bp，均与预期大小相符。见图2-4。图2-4PCR片段电泳图Fig2-4electropherogramofPCRfragment注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1:2999bp；2：2699bp2.3.1.2穿梭质粒pMD-FAV4Fs的鉴定小提得到4管质粒，分别PvuII鉴定，得到三条片段，分别为544,2364,2699bp，均与预期大小相符。见图2-5。对酶切正确的质粒进行测序，测序结果与预期相符。将鉴定正确的质粒命名为pMD-FAV4Fs。图2-5pMD-FAV4Fs的酶切鉴定电泳图Fig2-5DigestionidentificationelectrophoretogramofpMD-FAV4Fs注：MH：λDNA/HindIIIMarker；1-4：pMD-FAV4Fs#1-4PvuII；MD：DL2000Marker2.3.2穿梭质粒pMD-FAV4XF1的构建及鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]禽腺病毒血清4型广东株的分离鉴定及致病性研究[J]. 申祖杰,黎世彬,林华源,任行星,洪艳芬,廖佳钰,张建民,廖明,徐成刚. 中国兽医科学. 2018(06)
[2]一株高致病性血清4型禽腺病毒的分离与鉴定[J]. 梁广成,高巍,谢泉,张建军,邵红霞,秦爱建,叶建强. 中国家禽. 2016(19)
[3]山东省血清4型禽腺病毒的分离鉴定[J]. 于可响,黄兵,凌红丽,庞运倩,王友令,李峰,亓丽红,宋敏训. 中国动物传染病学报. 2016(05)
[4]5型和35型腺病毒纤毛蛋白的原核表达及活性验证[J]. 张文峰,张琼宇,薄华本,邵红伟,李晓程,王腾,黄树林. 中国生物工程杂志. 2013(12)
[5]病毒空斑技术的研究和应用概况[J]. 孟继鸿,朱圣禾. 国外医学(微生物学分册). 1989(01)
硕士论文
[1]禽腺病毒血清4型重组株的构建及生物学特性研究[D]. 柴冬华.中国农业科学院 2019
[2]血清4型Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及流行病学调查[D]. 窦砚国.山东农业大学 2017
[3]Ⅰ群禽腺病毒纤突knob区域基因序列同源性分析及病毒部分生物学特性研究[D]. 陈跃.扬州大学 2009
[4]CELO禽腺病毒载体的构建及fiber 1部分片段的原核表达[D]. 王凤雪.中国农业科学院 2005
本文编号：3410283
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